知识点挑题 - 高中生物 - 优优班--学霸训练营

1．
人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白，可通过转基因技术在羊乳中获得。流程如下：

（1）上述基因工程中，目的基因是 ______ ；在重组表达载体中有一段特殊的DNA片段，是RNA聚合酶识别和结合的部位，这段DNA被称为 ______ 。
（2）在操作中要对供体母羊注射 ______ 进行超数排卵处理；应采用 ______ 法使精子体外获能；对供体母羊和 ______ 进行同期发情处理。该转基因母羊进入泌乳期后，可以通过分泌的乳汁来生产htPA，因而被称为 ______ 。
（3）为了获得含有htPA的羊乳，在移植前取早期胚胎滋养层细胞进行 ______ 。
（4）人的基因能在羊体内表达说明 ______ 。

难度：较易

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2．
转基因抗虫棉的培育过程如图所示。苏云金芽孢杆菌中的抗虫基因（阴影表示）与质粒上有PstI、SmaI、EcoRI、ApaI等限制酶的切割位点（箭头所示），质粒上还有唯一标记基因--抗卡那霉素基因（阴影表示）。有人通过实验，获得的农杆菌细胞有的未被转化，有的被转化。被转化的农杆菌细胞有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的农杆菌。请据此回答：

（1）构建含抗虫基因的重组质粒A时，应选用的限制酶是 ______ ，对 ______ 进行切割。
（2）若抗虫蛋白分子是由m条肽链组成的，控制其合成的基因含n个碱基对，氨基酸的平均分子质量为g，则抗虫蛋白的分子质量最大约为 ______ （不考虑终止密码）。
（3）如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述四种农杆菌中，未被转化的和仅含环状目的基因的农杆菌是不能区分的，其原因是 ______ ；并且 ______ 的农杆菌也是不能区分的，其原因是 ______ 。

难度：较易

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3．

用XhoⅠ和SalⅠ两种限制性核酸内切酶分别处理同一DNA片段，酶切位点及酶切位点及酶切产物分离结果如图。以下叙述不正确的是（　　）

A．图1中两种酶识别的核苷酸序列不同

B．图2中酶切产物可用于构建重组DNA

C．泳道①中是用SalⅠ处理得到的酶切产物

D．图中被酶切的DNA片段是单链DNA

难度：较易

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4．
根据基因工程的有关知识，回答下列问题：
（1）大肠杆菌质粒常作为基因工程目的基因的载体，另外， ______ 和 ______ 也可作为载体。若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是 ______ 。
（2）利用转基因技术实现胰岛素的批量生产是目前糖尿病治疗的新思路，该过程中的关键操作环节是 ______ 。
（3）对于胰岛素基因的获取，途径之一是通过提取 ______ 细胞中的膜岛素mRNA，经过 ______ 过程合成，之后通过 ______ 技术大量扩增。

难度：较易

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5．
人参是一种名贵药材，具有良好的滋补作用．口服α-干扰素在慢性乙肝、丙肝及部分肿瘤的治疗中有一定疗效．下图为科研人员制备能合成干扰素的人参愈伤组织细胞的流程，①～④表示相关的操作，EcoRⅠ、BamHⅠ为限制酶，它们的识别序列及切割位点如表所示．请回答下列问题：

（1）步骤①中，利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是 ______ ．科研人员还在两种引物的一端分别加上了 ______ 和 ______ 序列，以便于后续的剪切和连接．
（2）过程②所构建的基因表达载体中未标注出的必需元件还有 ______ ，过程③中需先用 ______ 处理根瘤农杆菌以便将基因表达载体导入细胞．
（3）过程④中，科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后，先通过过程获得DNA，再进行PCR扩增，若最终未能检测出干扰素基因，其可能原因是 ______ ．
（4）科研人员认为，将转干扰素基因的人参愈伤组织加工成的药物比单纯干扰素的疗效要好，其依据是 ______ ．

难度：较易

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6．
如图为利用生物技术获得生物新品种的过程示意图．据图回答：

（1）在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含 ______ 的细胞才能在卡那霉素培养基上生长．上图为获得抗虫棉技术的流程．A过程需要的酶有 ______ 、 ______ ．图中将目的基因导入植物受体细胞采用的方法是 ______ ．C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入 ______ ．
（2）离体棉花叶片组织经C、D、E成功地培育出了转基因抗虫植株，此过程涉及的细胞工程技术是 ______ ，该技术的原理是 ______ ．
（3）检测目的基因是否转录出mRNA的具体方法是使用 ______ 与提取出的 ______ 做分子杂交．
（4）科学家将植株细胞培养到 ______ 阶段，再包上 ______ ，制成了神奇的人工种子，以便更好地大面积推广培养．

难度：较易

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7．

iPS细胞是利用病毒将四个基因（Oct₄、Sox₂、Klf₄和c-Myc）导入动物体细胞使其转化为类似胚胎干细胞的一种细胞．在iPS细胞培育过程中（　　）

A．运用了基因工程、动物细胞培养等现代生物技术

B．病毒的作用只是通过侵染将基因导入体细胞

C．使用的工具酶主要有DNA聚合酶和DNA连接酶

D．仅有Oct₄、Sox₂、Klf₄和c-Myc能够转录、翻译

难度：中等

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8．
科研人员通过基因工程实现了β-甘露聚糖酶基因在猪肠道野生酵母菌中的表达，使原来不能被猪利用的粗纤维在猪肠道内被分解成可直接吸收的单糖．如图为构建工程菌的部分过程，其中介导序列能引导载体整合到酵母菌的染色体DNA上．请回答：

（1）①过程中需要的工具酶是 ______ ，②③过程中需要的工具酶是 ______ ．
（2）同尾酶是指切割DNA分子后能产生相同黏性末端的限制酶，图中4种限制酶中属于同尾酶的是 ______ ．
（3）重组表达载体中的介导序列引导目的基因整合到酵母菌的染色体DNA上，其意义在于 ______ ．
（4）①过程从野生酵母菌染色体DNA中PCR扩增介导序列时，科研人员设计了如下一对引物：GAATTC GACCTCAAATCAGGTAGG和 TTGCATTGACTTACACCTAGG，其中下划线部分序列的设计依据是 ______ ，方框部分序列的设计目的是 ______ ．
（5）对重组表达载体进行酶切鉴定，假设所用的酶均可将识别位点完全切开．若使用EcoRⅠ和SalⅠ酶切，得到 ______ 种DNA片断．若使用EcoRⅠ和BamHⅠ酶切，得到 ______ 种DNA片断．

难度：较易

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9．
pET表达系统是原核蛋白表达引用最多的系统，其自身基础表达水平很低，并能实现目的基因的高效表达。pET载体上的目的基因被转移到大肠杆菌后，大肠杆菌RNA聚合酶不能直接与T7启动子结合，需通过T7RNA聚合酶间接调控。另外IPTG（乳糖类似物）可实现图1功能外，还可以使lac抑制子失活，激活lac启动子。请结合图示分析回答下列问题：

（1）大肠杆菌时刻感知培养基的营养信息并传递到细胞内启动相应的应答机制，据图l分析，不含乳糖的条件下结构基因Z将 ______ 。
（2）Z基因广泛用于基因表达调控的研究。当目的基因插入Z基因，用蓝白斑来筛选工程菌非常方便。Xgal（某种指示剂，无色）是β半乳糖苷酶的底物，水解后呈蓝色，据此原理，应从图2的 ______ 菌落中挑选工程菌。
（3）pET表达载体在构建时用限制酶EcoRⅠ和SmaⅠ同时切割，与单用限制酶EcoRⅠ相比，采用EcoRⅠ和SmaⅠ双酶切的优点能减少质粒自身环化的几率，并 ______ 。
（4）根据图3信息，大肠杆菌RNA聚合酶不能直接与T7启动子结合，说明酶具有 ______ 。从图中可看出， ______ 基因能够抑制自身基因的基础表达水平，而 ______ 可将更多的细胞资源用于目的基因表达，因此可以 ______ 以控制靶基因的过度表达。

难度：较易

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10．

将 ada（腺苷酸脱氨酶基因）通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶．下列叙述错误的是（　　）

A．每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒

B．每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点

C．每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada

D．每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子

难度：中等

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