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            • 1. 柯斯质粒是一种人工建构的含有λ噬菌体DNA的cos位点(指互补的黏性末端结合形成的双链DNA区域)和质粒复制子(ori)的新型载体,它同时兼具两者特性,长度一般为57 kb。λ噬菌体的末端酶能识别并切割两端由cos位点包围着的噬菌体基因组长度(3852 kb)的DNA片段,凡具有cos位点的任何DNA分子只要在长度上相当于噬菌体的基因组,就可以被识别并包装成类似噬菌体感染大肠杆菌。下图1为应用柯斯质粒进行某一真核基因克隆的方案图,下图2为不同的限制酶及相应切割位点。请据图分析回答:

              图1图2

              (1) 柯斯质粒可以作为基因工程载体的理由是具备____、________和启动子、终止子等。 

              (2) 如图1所示柯斯克隆方案,宜采用________酶对真核基因进行酶切,采用_______酶对柯斯质粒进行酶切,经连接后图中____(选填“a”或“b”)将会被重新包装进入λ噬菌体;柯斯质粒作为载体可携带的真核基因长度范围为_。 

              (3) 检测是否成功实现转化的实验思路是:将新包装的类似噬菌体去感染大肠杆菌,后者能够在含______的培养基上生长即为转化成功。 

              (4) 从图中信息可知上述柯斯克隆方案存在的缺点是________________________________。 

            • 2.

              利用外源基因在受体细胞中表达,可生产人类所需要的产品.下列选项中说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是( )

              A.棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因
              B.大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNA
              C.山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列
              D.酵母菌细胞中提取到人干扰素
            • 3.

              利用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂的流程如下图所示,有关叙述正确的是

              A.过程①需使用反转录酶

              B.过程②利用PCR扩增CarE基因需使用解旋酶和耐高温的DNA聚合酶

              C.过程③可用NaCl溶液处理大肠杆菌,使之成为感受态细胞

              D.过程④可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞
            • 4.

              下图表示生物实验中通过研磨提取有关物质的操作过程,请回答下列问题:

              (1) 若图示为“DNA的粗提取与鉴定”的实验操作:

              ① 图中实验材料A可以是________(填字母)。

              a. 花菜    b. 香蕉    c. 猪肝    d. 猪血

              ② 若选用植物组织,研磨前加入的B一般为____________,作用分别是____________。

              ③ 实验中,将含有一定杂质的DNA丝状物分别放入2 mL下表所示的3种溶液中,经搅拌后过滤,获得相应的3种滤液,含DNA最少的是滤液________。


               

              溶液种类

              滤液

              1

              2 mol/L的NaCl溶液

              e

              2

              0.014 mol/L的NaCl溶液

              f

              3

              体积分数为95%的冷酒精溶液

              g

              (2) 若图示为“检测生物组织中的还原糖”的实验操作:

              在检测滤液C中是否含有还原糖时,向C中加入的是________色的斐林试剂,欲得到实验结果,还需要进行的步骤是______________________。

              (3) 若图示为“叶绿体色素的提取和分离”的实验操作:

              ① 研磨前加入的B应包括________________。

              ② 将研磨液进行过滤时,需要在漏斗基部放上____________。

            • 5. 下图表示生物实验中通过研磨提取有关物质的操作过程,请回答下列问题:

              (1) 若图示为“DNA的粗提取与鉴定”的实验操作:

              ①图中实验材料A可以是下面的____(填字母)。

              a. 花菜     b. 香蕉     c. 猪肝      d. 猪血

              ②若选用植物组织,研磨前加入的B一般为________,作用分别是_。 

              ③实验中,将含有一定杂质的DNA丝状物分别放入2 mL下表所示的3种溶液中,经搅拌后过滤,获得相应的3种滤液,含DNA最少的是滤液____。 

               

              溶液种类

              滤液

              1

              物质的量浓度为2 mol·L-1的NaCl溶液

              e

              2

              物质的量浓度为0.14 mol·L-1的NaCl溶液

              f

              3

              体积分数为95%的冷酒精溶液

              g


              (2) 若图示为“检测生物组织中的还原性糖”的实验操作:

              在检测滤液C中是否含有还原性糖时,向C中加入的是____色的斐林试剂,欲得到实验结果,还需要进行的步骤是_________。 

              (3) 若图示为“叶绿体色素的提取和分离”的实验操作:

              ①研磨前加入的B应包括____________,为了防止有机溶剂的挥发,操作过程中除了加快研磨速度外,还需________________。 

              ②将研磨液进行过滤时,需要在漏斗基部放上________。 

            • 6. 蛋白质的分离与提纯技术是研究蛋白质的重要技术,DNA的提取和分离及PCR技术是研究DNA的重要技术.根据所学的知识回答下列问题.
              (1)样品处理,红细胞的洗涤要用_ __________反复冲洗、离心.血红蛋白粗分离阶段,若要尽快达到理想的透析效果,可以采用的方法是__________________________ 
              (2)分离蛋白质时,用凝胶色谱法将样品纯化的目的是_ ____________________________。

              (3)DNA粗提取时,常用鸡血作为实验材料,原因是______________________________。实验中有两次使用蒸馏水,第一次使用的目的是________________________________ 。

            • 7.

              物质鉴定时常会产生一些特殊的颜色反应,下列描述正确的是

              A.在沸水浴条件下二苯胺可将DNA染成蓝色

              B.二氧化碳可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变紫

              C.乙醇在酸性条件下能与灰绿色的重铬酸钾溶液反应变成橙色

              D.脂肪鉴定时用苏丹Ⅲ,可见红色的脂肪颗粒
            • 8.

              在DNA粗提取与鉴定实验中,将获得的含有DNA的黏稠物分别按下表处理3次,则DNA主要集中在标号( )

              操作

              黏稠物

              滤液

              2 mol·L-1的NaCl溶液搅拌过滤

              0.14 mol·L-1的NaCl溶液搅拌过滤

              95%的冷酒精搅拌过滤


              A.①③⑤    
              B.②③⑤    
              C.①④⑥    
              D.②④⑥
            • 9. 请回答胚胎工程和基因工程方面的问题: 


              (1)应用胚胎工程技术可以培育出“试管牛”。试管牛的培育需经过体外受精、                                     以及在母体中发育和产出等过程。
              (2)在“试管牛”的培育过程中,要使精子和卵母细胞在体外成功结合,需要对精子进行处理,使其            。另外,培养的卵母细胞需要发育至减数第二次分裂的中期,该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和              
              (3)利用基因工程可以获得转基因牛,从而改良奶牛的某些性状。基因工程的四个基本操作步骤是               、基因表达 载体的构建、                                        。若要获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素,则所构建的基因表达载体必须包括:某种牛乳腺分泌蛋白基因及其启动子、                                     和复制原点等。将该基因表达载体导入受体细胞所采用的方法是              (显微注射法、农杆菌转化法),为 获得能大量产生人干扰素的转基因牛,该基因表达载体应导入的受体细胞是           (受精卵、乳腺细胞)。

            • 10.

              I:下列是与芳香油提取相关的问题,请回答:

              (1)玫瑰精油适合用_________________法提取,其理由是玫瑰精油_________________________。蒸馏时收集的蒸馏液__________ (是、不是)纯的玫瑰精油。

              (2)蒸馏瓶中的水和原料量比例为_________,蒸馏过程中,影响精油提取量的主要因素有_________________和____________________。

              (3)如果蒸馏过程中不进行冷却,则精油提取量会__________,原因是_____________________。


              II:Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图:


              (1)步骤①中所选的卵母细胞应处于______________期。

              (2)步骤②中,重组胚胎培养到囊胚期时,可从其______________分离出ES细胞,ES细胞在形态上表现为____________________的特点。

              (3)步骤③中,需要构建含有Rag2基因的____________________。可以根据Rag2基因的核苷酸序列设计合成____________________,利用______________技术扩增Rag2基因片段。用HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在目的基因所在DNA片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体,所选择的表达载体上应具有_______________________酶的酶切位点。

              (4)为检测Rag2基因的表达情况,可提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质,用抗Rag2蛋白的抗体进行________________________________。

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