(1) 由杂种细胞D培育成白菜—甘蓝植株,采用的技术手段是______,该过程说明植物细胞具有____。 

(2) 在d过程培养中,培养基的成分通常包括水、____、有机营养和____等,同时,在培养过程中,除必要的温度、光照和氧气等外界条件外,成功的另一个关键是操作过程中必须保证____。 

(3) 要获得图中白菜和甘蓝的原生质体,首先需要分别除去白菜和甘蓝细胞的细胞壁。现提供以下材料和用具:紫色洋葱鳞片叶、适宜浓度的蔗糖溶液、纤维素酶和果胶酶、蒸馏水、镊子、显微镜、载玻片等。请从中选择合适的材料,完成下面检验是否已除去细胞壁实验的方法步骤,并预测和解释实验结果。

主要实验步骤:

① 选取适宜浓度的蔗糖溶液,加入适量纤维素酶和果胶酶配制成的细胞壁分解液。其中选取适宜浓度的蔗糖溶液而不用蒸馏水的理由是:适宜浓度的蔗糖溶液____。 

② 检验细胞壁分解液除去细胞壁的方法。

第一步:用镊子撕取一小块紫色洋葱鳞片叶放在载玻片中央,滴加适量细胞壁分解液,制成临时装片,得到实验组装片。

第二步:__________。 

第三步:__________。 

结果预测和分析:__________。 

在进行植物体细胞杂交时，首先需要去除细胞壁。现提供以下材料和用具：白色洋葱鳞片叶、紫色洋葱鳞片叶、适宜浓度的盐酸、适宜浓度的蔗糖溶液、纤维素酶、果胶酶、蒸馏水、镊子、显微镜、载玻片、盖玻片等。请你从中选取合适的材料配制成合理的细胞壁分解液，设计实验检验其除去细胞壁的效果，并预测和解释实验结果：

（1）实验步骤：

①首先选取________，配制成细胞壁分解液。这样选取的理由是______________________________________________________。

②检验细胞壁分解液除去细胞壁效果的步骤：（注意对照组的设置）

第一步：______________________________________________；

第二步：______________________________________________；

第三步：______________________________________________。

（2）实验结果的预测和解释：________________________________________________。

　　　表　亲本及融合子细胞体积和DNA含量的比较

(1) 步骤一:制备原生质体。培养C1、M1单倍体亲株,加入一定量的0.5%的蜗牛酶液,保温处理一段时间,在一定浓度的高渗缓冲液洗涤,以确保获得更多的原生质体。

①本实验中,蜗牛酶液的作用是_。 

②在无菌条件下,用____(A:高渗缓冲液、B:低渗缓冲液、C:生理盐水)洗涤,以确保获得更多的原生质体。 

③改变蜗牛酶液浓度进行多组实验,结果见图1,分别计算酶浓度为1和1.5时的形成率与再生率,相比较酶浓度为____时更适宜。 

(2) 步骤二:诱导原生质体融合。取C1、M1原生质体悬浮液等量混合,离心去除上清液,加入一定量40%的____溶液,30 ℃保温20 min,镜检并观察融合情况。 

(3) 步骤三:融合子的鉴定。测定细胞体积及DNA含量,结果见表1,从中挑选出融合子Z13、Z15、Z19、Z29,理由是__________________。 

图3　融合子Z29与亲株总酸降解能力的比较

细胞融合技术有着广泛应用。下图为细胞融合的简略过程，据图回答相关问题

（1）若a、b分别是基因型为yyRr和YYrr两个玉米品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。科学家分别将它们的花粉除去细胞壁，然后诱导其融合，再把这些融合细胞进行培养，培育出了玉米新品种。

 ①这两个品种的花粉可用化学诱导剂诱导融合，共可产生___________种基因型的融合细胞（仅考虑两两融合），这些融合细胞经过____________技术可以得到玉米新品种。

 ②若想培育出基因型为yyRR的玉米植株，也可直接用yyRr植株的花粉培养得到__________幼苗，再经过__________处理并筛选获得，这种方法叫做________。

（2）若a、b表示番茄和马铃薯两种植物的体细胞，a、b细胞融合之前，要纤维素酶和果胶酶酶处理后得到_________________；诱导植物细胞融合的化学方法是_________________。

（3）若a、b分别为骨髓瘤细胞和已免疫的B淋巴细胞，请据图回答：

  ①为了能充分发挥上述两种细胞各自的特点，经特殊处理，在促细胞融合因子的作用下，使两种细胞发生融合，形成图中的d细胞，其特点是_________。由d细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较，具有_______________________等特点。

   ②下列各图表示单隆抗体制备过程的各阶段图解，请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来_______________。

甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物，甲含有效成分A，乙含有效成分B。某研究小组拟培育同时含有A和B的新型药用植物， 回答下列问题：

（1)为了培养该新型药用植物，可取甲和乙的叶片，先用       酶和       酶去除细胞壁，获得具有活力的       ，再用化学诱导剂       诱导二者融合。形成的融合细胞进一步培养形成       组织，然后经过       形成完整的杂种植株。这种培养技术称为        。

(2)假设甲和乙有性杂交的后代是不育的，而上述杂种植株是可育的，造成这种差异的原因是       。

(3)这种杂种植株可通过制作人工种子的方法来大量繁殖。经植物组织培养得到

的               等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子。

DHA对脑神经发育至关重要。以A、B两种单细胞真核藻为亲本，利用细胞融合技术选育高产DHA融合藻。两种藻特性如下表。

据表回答：

（1）选育的融合藻应具有A藻_______与B藻________的优点。

（2）诱导融合前需用纤维素酶处理两种藻，其目的是获得______。

（3）通过以下三步筛选融合藻，步骤________可淘汰B藻，步骤________可淘汰生长速率较慢的藻落，再通过步骤________获取生产所需的融合藻。

步骤a：观察藻落的大小

步骤b:用不含有机碳源（碳源——生物生长的碳素来源）的培养基进行光照培养

步骤c：测定DHA含量

(1)A、B的名称是              。由D形成F过程所依据的原理是__________，从本质上讲，“白菜—甘蓝”杂种植株具有的性状是_______的结果。

(2)若“白菜—甘蓝”杂种植株为四倍体，则该植株的花粉经离体培养得到的植株是________倍体。

(3)“白菜—甘蓝”杂种植株的食用部分是叶，但叶又易受昆虫危害而影响产量，科学家又利用基因工程培育出带有抗虫基因的“白菜—甘蓝”植株，请你设计实验，检测此植株的抗虫基因是否表达。

①取昆虫幼虫放到带有抗虫基因的“白菜—甘蓝”植株甲上，再取等量生活状态基本一致的昆虫幼虫放在________________植株乙上。

②适宜条件下培养一段时间后，分别观察_____________________的生活情况。

③若__________________________，说明甲植株的抗虫基因未得到表达；若___________________，说明甲植株的抗虫基因得到表达。

野生马铃薯品种的植株具有较强的抗病、抗虫、抗盐碱、抗寒能力，但块茎不能食用。俄、德、芬兰专家共同做实验研究，用野生马铃薯与马铃薯的体细胞进行杂交，培育出了生活能力强的杂交系马铃薯。据图分析回答问题：

(1)②过程常用的促融剂是______________，此过程依据的原理是_____________。

(2)一般在培养基上培养24～28小时后，大部分原生质体已再生出细胞壁。可以取样，通过___________________________实验来鉴别细胞壁是否已经再生。

(3)请用文字和箭头表示出④、⑤过程的实验流程_______________________ _________________________。

(4)若想制备人工种子，则需培养至____________ _______阶段，取出包裹上人工种皮。

（5）无菌技术也是成功诱导出再生植株的重要因素，请说明下列各项哪些需要消毒，哪些需要灭菌_________________________________________________。

①培养基 ②培养皿 ③接种环 ④实验操作者的双手 ⑤三角锥形瓶 ⑥植物材料

已知二倍体番茄红果(A)对黄果(a)为显性,双子房(B)对多子房(b)为显性,高蔓(C)对矮蔓(c)为显性。现有三个纯系品种:Ⅰ(黄色、多子房、高蔓),Ⅱ(黄色、双子房、矮蔓),Ⅲ(红色、双子房、高蔓),为了快速获取红色、多子房、矮蔓纯系新品种。

(1)请完善以下实验步骤。

第一步:Ⅰ×Ⅱ→获得植株Ⅳ,让Ⅳ自交,从子代中选取黄色、多子房、矮蔓植株Ⅴ。

第二步:____________________________　。

第三步: 取植株Ⅵ的花药进行离体培养,获得单倍体幼苗,用秋水仙素处理,即可筛选获得红色、多子房、矮蔓纯系新品种。

(2)将上述植株V的离体细胞与植株Ⅲ的离体细胞融合,形成杂种细胞。

①促进融合时常采用的化学诱导剂是_____________。

②请画出该融合细胞中控制红色与黄色这对性状的染色体组成图,并标明相关基因。

(3)据报道,番茄红素具有一定的防癌效果。科学家将含有酵母S-腺苷基蛋氨酸脱羧酶基因(简称S基因)cDNA片段导入普通番茄植株,培育了番茄红素高的新品种。

①获得cDNA片段的方法是_________。

②假设S基因的一条链中A和T的总量为2 400个,占该片段总碱基的60%,用PCR扩增该基因,该基因复制n次共要dGTP______个。

③为确保S基因在番茄中表达,在构建基因表达载体时应插入特定的_________。

④将基因表达载体导入番茄的方法有农杆菌转化法和_________等。

科学家利用细胞工程培育了“白菜—甘蓝”杂种植株，如图所示，请据图回答下列问题。

 （1）A、B的名称是_______________。由D形成F过程所依据的原理是______________，从本质上讲，“白菜—甘蓝”杂种植株具有的性状是__________________的结果。

（2）若“白菜—甘蓝”杂种植株为四倍体，则该植株的花粉经离体培养得到的植株是________倍体。

（3）“白菜—甘蓝”杂种植株的食用部分是叶，但叶又易受昆虫危害而影响产量，科学家又利用基因工程培育出带有抗虫基因的“白菜—甘蓝”植株，请设计实验，检测此植株的抗虫基因是否表达。

①取昆虫幼虫放到带有抗虫基因的“白菜—甘蓝”植株甲上，再取等量生活状态基本一致的昆虫幼虫放在______________________________植株乙上。

②适宜条件下培养一段时间后，分别观察_____________________的生活情况。

③若                                                ，说明甲植株的抗虫基因未得到表达。