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            • 1. 根据生物科学技术有关知识,回答下列问题:
              (1)动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础.动物细胞培养需要提供无菌、无毒环境,因此除了要对培养液和培养用具进行灭菌外,通常还要在培养液中添加一定量的    ,以防培养过程中的污染;采用    方法,防止代谢产物积累对细胞造成危害.
              (2)在基因工程构建基因表达载体时,需要把来自cDNA文库的目的基因片段正确插入到表达载体的        之间.检测目的基因在受体细胞中是否表达,可采用的方法是    杂交.
              (3)应用胚胎工程技术培育“试管牛”,需要经过体外受精、        以及在母体中发育和分娩过程.若在卵细胞膜和透明带之间看到两个极体,则表明    过程已完成.
            • 2. 白血病是由于造血干细胞增殖分化异常而引起的恶性增殖性疾病.目前治疗白血病的主要方法是骨髓移植,但骨髓配型的成功率较低,大大限制了白血病的治疗.随着基因工程的日渐兴起,迎来了基因治疗白血病的曙光.请回答下列相关问题:
              (1)骨髓移植必须进行骨髓配型实验,原因是    .目前,临床上通常通过使用    来提高造血干细胞移植的成活率.
              (2)造血干细胞移植之前先要进行培养.动物细胞培养一般分为        两个阶段.对于培养的环境条件,除需要适宜的温度、无菌无毒等以外,还要向培养液中通人氧气和二氧化碳,通人氧气的目的是    ,通人二氧化碳的目的是    ;对子所用的培养液,应定期更换,其目的是    
              (3)在进行细胞移植前,有时需对移植的细胞进行基因改造.要了解基因改造是否成功,可在分子水平上检测是否翻译成了相应的蛋白质,常用的方法是    
              (4)上述使用的正常细胞,通常为    代以内,以保持细胞正常的二倍体核型.
              (5)哺乳动物的胚胎干细胞是从    中分离出来的一类细胞,可以在体外被诱导    形成新的组织细胞,这使科学家进一步培育人造骨髓成为可能.
            • 3. 欲进行小鼠肝细胞在不同浓度NaCl溶液中发生体积和数量变化的实验,请根据以下提供的实验材料与用具,提出实验思路,预测实验结果并进行分析.
              材料与用具:小鼠肝细胞悬液(用质量分数为0.9%NaCI溶液配制)、质量分数为1.3% NaCl溶液、蒸馏水、试管若干支、血细胞计数板、显微镜(具有测距功能)等.
              (要求与说明:对NaCl溶液的具体稀释过程、细胞计数的具体操作过程不作要求.不考虑细胞体积变化对计数的影响.绘制曲线时的细胞体积指细胞的平均体积.) 请回答:
              (1)实验思路:
              (2)预测实验结果(在以下坐标系中,绘制细胞体积和细胞数量变化示意曲线):
                  
              (3)分析与讨论:
              ①当NaCl溶液浓度大于0.9%时,细胞体积与数量发生的变化及其原因是什么?    
              ②基于上述实验,怎样才能用肝细胞分离得到纯度较高的细胞膜?    
            • 4. 读图,回答下列有关哺乳动物细胞培养的问题:

              (1)培养中的细胞其数目的增加和培养时间的关系如图1.据图读出该细胞完成一个细胞周期所需要的时间是    小时.
              (2)从图1的A点取出6 000个细胞,测定每个细胞的DNA含量,结果如图2.已知S期是DNA复制期,G2期为DNA合成后期,G1期为DNA合成前期,M期为分裂期,则图2的B、C、D中,表示处于S期的是    ,表示处于G2和M期的是    ,表示处于G1期的是    
              (3)若取样的6 000个细胞中,处于M期(分裂期)细胞的数目是300个,则处于S期和G2期的细胞数分别是    个和    个.
              (4)细胞周期中,完成各期所需时间的计算公式是t=T×
              n
              N
              (N是取样的总细胞数,n是各期的细胞数,T是一个细胞周期),则该细胞完成分裂期和间期的时间分别是        小时.
            • 5. 随着科学技术的发展,人们可以根据人类的需求来改造生物的性状,在许多领域取得了可喜的成果,图中是利用奶牛乳汁生产血清白蛋白的图解,根据下图回答:

              (1)在此过程中涉及的动物细胞工程技术有        
              (2)在基因工程中,我们称②为    
              (3)图中①一般经    处理可以得到③,从③到④的过程中一般用未受精的卵细胞去核后作为受体,不用普通的体细胞.
              (4)要实现⑦批量生产血清白蛋白,则要求③的性染色体是,利用该方法得到的动物叫做    
            • 6. 科学家利用基因工程技术可以使哺乳动物本身变成“批量生产药物的工厂”.目前科学家已在牛和羊等动物的乳腺生物反应器中表达出了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素等重要药品.请回答有关问题:
              (1)将药用蛋白基因和乳腺蛋白基因的启动子、终止子和    等重组在一起,就可构建基因表达载体,再通过    技术导入受精卵中.基因表达载体上的启动子的作用是    
              (2)制备乳腺生物反应器的过程中,目的基因的受体细胞为    ,性染色体组成为    
              (3)为确定受体细胞中染色体的DNA上是否插入了目的基因,可利用    技术进行检测,一般是用放射性同位素标记    作探针.
              (4)转化成功的受精卵发育成胚胎需要进行体外培养,在培养液中要加入    等天然成分.
            • 7. 阅读如下材料,回答问题:
              材料1:某研究小组对小鼠的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行培养.
              材料2:基因敲除是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术.
              (1)材料1属于    工程范畴.制备肝细胞悬浮液时剪碎肝组织,再用    处理,肝细胞培养过程中通常在培养液中通入5%的CO2中,其主要作用是    .为了防止细胞培养过程中细菌的污染,可向培养液中加入适量的    
              (2)材料2属于基因工程的范畴.将某基因插入到基因表达载体的目的基因中,使目的基因    ,通过    技术导入ES细胞中.观察基因敲除前后生物体性状的变化,可以研究目的基因(敲除基因)的    ;敲除抗原决定基因,还可获得适合人体移植的其他动物器官,减弱或消除    
            • 8. 下面是单克隆抗体制备过程示意图,请据图回答:

              (1)图中过程②诱导细胞融合的生物因素是    ,细胞融合后还需要用    筛选获得杂交瘤细胞.
              (2)经过③过程可获得足够数量的能分泌所需抗体的D细胞,过程3包括        等.
              (3)培养D细胞时培养液的配方与植物细胞培养基有所不同的是除含有葡萄糖、氨基酸、无机盐等之外,还要含有    ,培养过程需在CO2培养箱中进行,目的是    
              (4)生产单克隆抗体一般不直接培养浆细胞,主要原因是    .在制备过程中之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞,是因为让其融合后培养的D细胞具有        的特性.
            • 9. (2016春•临沂校级期中)自然界中有一种含有叶绿体的原生动物--眼虫,这说明植物的细胞器同样可以在某些动物细胞中存活.某同学提出问题:“动物细胞与植物细胞之间可以实现杂交吗?”他尝试设计出下列具体的实验方案.
              结合实验方案回答:
              实验原理:根据眼虫的特点,动物细胞和植物细胞在理论上是可以实现杂交的.实验步骤如下:
              (1)①中选的植物材料细胞中,必须有的细胞器是    
              (2)③过程所用的酶是    
              (3)④过程除了用电激之外,还可以用    等作为诱导因素.
              (4)⑤过程动物细胞体外培养需要满足的条件是    .(至少答两点)
              (5)在⑤⑥过程中,通常要添加血清,原因是    
            • 10. 如图为人类对克隆羊技术的拓展及应用的设想.请据图回答问题:

              (1)图中所涉及的现代生物技术有 等(至少写三个).
              (2)若利用图中过程最终获得婴儿说明 具有全能性,两个婴儿性状与 基本相同.
              (3)使用培养基进行重组细胞培养时,通常要加入 等天然成分,为防止培养过程中杂菌污染,通常要在细胞培养液中添加一定量的 .培养过程中通常采用 ,将其置于含 的混合气体的培养箱中进行培养.
              (4)图中从“内细胞团到胚胎干细胞”的培养过程中,必须用 处理内细胞团,使之分散成单个细胞.
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