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            • 1. 某研究者用抗原(A)分别免疫3只同种小鼠(X、Y和Z),每只小鼠免疫5次,每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数),结果如图所示.

              若要制备杂交瘤细胞,需取免疫后小鼠的B淋巴细胞(染色体数目为40条),并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞(染色体数目为60条)按一定比例加入试管中,再加入聚乙二醇诱导细胞融合,经筛选培养及抗体检测,得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞.
              回答下列问题:
              (1)制备融合所需的B淋巴细胞时,所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上,则小鼠最少需要经过 ______  次免疫后才能有符合要求的.达到要求的X、Y、Z这3只免疫小鼠中,最适合用于制备B淋巴细胞的是 ______  小鼠.
              (2)细胞融合实验完成后,融合体系中除含有未融合的细胞和杂交廇细胞外,可能还有 ______
              (3)杂交瘤细胞的特点是 ______ ,细胞中有 ______ 个细胞核,染色体数目是 ______ 条.
            • 2. 疫苗和抗体已被广泛应用于预防与诊疗传染性疾病的过程,已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原.疫苗的生产和抗体的制备流程如图所示,请回答下列问题:

              (1)过程①代表的是 ______ ,过程③构建A基因重组载体时,启动子和终止子是重新构建的,它们应该能被受体细胞的 ______ 所识别,以便于其催化转录过程.
              (2)右图为A基因的结构示意图,已知Ⅱ区的碱基数是2 000个,其中阴影区域碱基数是800个,空白区域中G和C的总数共有400个,则由该区域能指导蛋白质合成的片段转录产生的mRNA中A和U总数是 ______ 个.

              (3)在给小鼠皮下注射A蛋白时,要重复注射几次的目的是通过二次免疫,增加小鼠体内的 ______ 数目.过程⑥的实质为 ______
              (4)在将X进行扩大培养前,至少需要经过 ______ 次筛选,扩大培养的原理是 ______
              (5)对健康人进行该传染病免疫预防时,可选用图中基因工程生产的 ______ 来制备疫苗.对该传染病疑似患者确诊时,可以从疑似患者体内分离出病毒与已知病毒进行核酸序列比较,或用图中的 ______ 与分离出的病毒进行特异性检测.
            • 3. 单克隆抗体技术在生物工程中占有重要地位.请回答相关问题:
              (1)英国科学家米尔斯坦和柯勒提出单克隆抗体制备技术的实验方案是:把一种 ______ 细胞与能在体外大量增殖的 ______ 细胞进行诱导融合,使融合细胞既能大量增殖,又能产生足够数量的特定抗体.
              (2)在技术操作中,需要将融合细胞用 ______ 培养基进行筛选,并进行克隆化培养和 ______ ,以得到足够数量的符合要求的 ______ (填“单”、“双”、“多”)核杂交瘤细胞.
              (3)若将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养,可从 ______ 中提取出大量的单克隆抗体.
              (4)临床使用的小鼠免疫后制备的鼠源性单抗,存在一些弊端,其中之一是会引起人体抗鼠源抗体反应.某病人连续隔周注射某种鼠源性单抗治疗一种病毒感染性疾病,开始病毒量明显减少,一段时间后,这种病毒量又开始上升,排除病毒变异的因素,上升原因还可能是人体产生 ______ ,使鼠源抗体不能发挥抗病毒的作用.
              (5)研究人员应用 ______ ,改造了鼠源性抗体分子的结构,降低了鼠源性抗体的人体反应.
            • 4. 请回答杂交瘤技术和单克隆抗体制备的有关问题.
              (1)杂交瘤技术制备单克隆抗体时,利用一定的物质,如生物诱导剂 ______ 作介导,使经免疫的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,筛选出融合的细胞再进行细胞的 ______ 培养,获得纯系细胞,同时还要进行 ______ 检验,以保证获得的是所需的特定杂交瘤细胞.
              (2)获得杂交瘤细胞后,在体外培养时需要特别加入的天然成分是 ______
              (3)有关杂交瘤细胞体外培养的叙述,正确的是 ______
              A.用固体培养基培养          B.用滋养层细胞支持生长
              C.能进行传代培养            D.需要对细胞进行研磨破碎获得产物
              (4)现在欲利用基因工程技术生产单克隆抗体,科研小组将与抗体形成有关的关键基因通过噬菌体导人到受体细胞,该技术的核心步骤是 ______ ,噬菌体是这些关键基因的 ______
            • 5. 回答下列有关单克隆抗体的制备和转基因动物培养的问题.
              (1)某H蛋白质是一种抗原蛋白,该蛋白也是一种跨膜蛋白,其结构如图所示(抗原特性由胞外区决定).
              ①制备免疫小鼠用的H蛋白(抗原)时,应构建 ______ 区基因,转入原核细胞表达并提纯.
              ②B淋巴细胞成熟于 ______ (填“器官名称”)中.
              ③若要制备抗H蛋白单克隆抗体,所培养的杂交瘤细胞是由骨髓瘤细胞和接受过 ______ 刺激的B淋巴细胞的融合而成的杂交瘤细胞.培养过程中应保持培养箱中含有5%的CO2的目的是维持培养液的 ______ .除了含有各种营养成分,满足适宜的温度和酸碱性外,通常还要在细胞培养液中添加一定量的 ______ ,以防止培养过程中的污染.此外,应定期 ______ ,以便清除代谢产物,防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成伤害.
              (2)胚胎干细胞(ES)可由囊胚的 ______ 分离培养获得,导入外源基因的干细胞经扩大培养诱导分化为早期胚胎,随后即可植入经 ______ 处理的代孕雌性动物体内,获得转基因动物.
            • 6. 甲型流感在世界各地大面积蔓延,有些国家还出现了死亡病例,科学家已分离出H1N1病毒(一种RNA病毒).某制药厂根据下面流程图生产预防和治疗甲型流感的抗体,请据图回答有关问题:

              (1)若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞,则B细胞是取自感染病毒的人体内的 ______ 细胞,促进d过程的常用诱导剂是 ______
              (2)假设仅考虑某两个细胞的融合,则可形成 ______ 种类型的C细胞,因此需用培养基筛选出 ______ (填特点)的D细胞用于培养,D细胞的名称是 ______
              (3)理论上,注射了该抗体的人群不能长期对甲型流感免疫,试分析原因 ______
              (4)不同种动物的体细胞融合,相比诱变育种和杂交育种方法,具有 ______ 等突出的优点.
              (5)请说明单克隆抗体的主要作用 ______
            • 7. 目前,科学家可以应用生物技术进行一些疾病的治疗,如器官移植、单抗诊断、基因治疗等.请回答下列问题.
              I、人体器官移植面临的主要问题有供体器官短缺和免疫排斥.
              (1)为了解决器官短缺的问题,科学家将目光集中在某种小型猪身上,但实现这一目标的最大难题是免疫排斥.同时,科学家发现人体内有一种DAF 蛋白,可以抑制免疫系统对外来细胞的攻击,于是有人提出用基因工程的方法对猪的器官进行改造从而减少排斥.在改造中,目的基因是 ______ ,受体细胞一般选用 ______ ,导入方法常用的是 ______
              (2)免疫排斥主要是由 ______ 细胞引起的,该细胞是在 ______ (器官)发育成熟的.临床上通常通过使用免疫抑制药物来抑制该细胞的增殖从而提高器官移植的成活率.
              (3)自体器官移植可以避免免疫排斥,目前有些自体器官可以通过对患者的胚胎干细胞进行体外诱导分化形成.胚胎干细胞来源于 ______ 或原始性腺,也可以通过 ______ 技术得到重组细胞后再进行相应处理获得.
              Ⅱ、人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胚盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,制备抗HCG 单克隆抗体可用于早孕的诊断.下图是抗HCG 单克隆抗体制备流程示意图,请分析回答.

              (1)制备单克隆抗体过程中,给小鼠注射的HCG相当于 ______ .它能使小鼠产生分泌相应抗体的淋巴细胞,此过程属于特异性免疫中的 ______ 免疫.
              (2)在细胞内DNA 合成一般有两条途径,主要途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸,进而合成DNA,而氨基瞟岭可以阻断此途径.另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下,经过酶的催化作用合成DNA,而骨髓瘤细胞的DNA 合成没有此辅助途径.利用DNA 合成途径不同的特点配制的HAT 培养基含有多种成分.若用a 表示骨髓瘤细胞,b表示效应B细胞,其中在培养基中添加的 ______ 成分筛选出 ______ (a、aa、ab、bb、b)细胞进行培养,然后再筛选出 ______ 细胞进行大规模培养.
              (3)此过程生产的单克隆抗体可以与 ______ 特异性结合,从而诊断早孕.
            • 8. 有性生殖的生物产生后代需进行受精作用,植物体细胞杂交过程中要进行原生质体的融合,单克隆抗体的制备需进行动物细胞融合,可见细胞的融合技术有着广泛的应用.下列为细胞融合的简略过程,据图回答相关问题:

              (1)若a、b分别是基因型为Hhrr、hhRr两个烟草品种的花粉,且这两对基因分别位于两对同源染色体上.具有一对隐性纯合基因(rr或hh)的个体,在光照强度大于800lx时都不能生长.要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细胞,较为简便的筛选方法是 ______
              (2)若a、b表示两种植物体细胞,则由d细胞形成杂种植株的原理是 ______ ,这种育种方法的优点是 ______
              (3)若a、b分别为骨髓瘤细胞和已免疫的B淋巴细胞,则d细胞特点是 ______ .由d细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较,具有 ______ 的特点.生产上一般不能通过直接培养浆细胞的方法生产单克隆抗体的主要原因是 ______
              (4)下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解.请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来. ______
            • 9. 应用现代生物技术可以大量获得针对甲型H1N1病毒的抗体,并可用于临床治疗,如图表示制备该抗体的设想,请据图回答下列问题:

              (1)转甲型H1N1病毒抗体基因牛可通过分泌乳汁来生产甲型H1N1病毒抗体,在基因表达中,甲型H1N1病毒抗体基因的首端必须含有 ______ ,它是 ______ 识别和结合的位点.③过程培养到桑椹胚或囊胚阶段,可以采用 ______ 技术,培养出多头相同的转基因牛.
              (2)prG能激发细胞不断分裂,通过基因工程导入该调控基因可制备单克隆抗体,Ⅰ最可能是 ______ 细胞,Ⅱ代表的细胞具有 ______ 的特点.
              (3)制备单克隆抗体也可以用动物细胞融合技术,与动物细胞融合过程不同,植物体细胞杂交在细胞融合之前要用 ______ 对细胞进行处理,作用是除去 ______
            • 10. 请据图回答下列问题:

              (1)在培育转基因牛过程中,②过程常用的方法是 ______ .转基因牛可通过分泌乳汁来产生人生长激素,在基因表达载体中,人生长激素基因的首端必须含有 ______ ,其作用是能够被 ______ 识别并结合从而启动转录过程.
              (2)prG能激发细胞不断分裂,通过基因工程导人该调控基因来制备单克隆抗体,Ⅱ最可能是 ______ 细胞,Ⅲ代表的细胞具有 ______ ______ 的特点.
              (3)在抗虫棉培育过程中,需将抗虫基因(Bt毒蛋白基因)插入到Ti质粒的 ______ 上,通过农杆菌的转化作用就可以使抗虫基因进入棉细胞.要检测抗虫基因是否翻译成Bt毒蛋白,应从抗虫棉中提取蛋白质,并用 ______ 方法进行检测.
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