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            • 1.

              用医学手段培育“三亲婴儿”可以解决遗传基因带来的缺陷,其培养过程如图所示.请据图回答有关问题:

              (1)由于女性的自然周期产生的卵子太少,捐献者在取卵前需要注射________激素,促使一次有更多的卵泡发育。重组细胞体外培养所需的气体主要是O2和CO2,CO2的主要作用是___________________。

              (2)从受精卵到三亲婴儿的培养还需要______和______等技术。三亲婴儿的培育方式属于____________生殖.

              (3)三亲婴儿的培育技术______(填“能”或“不能”)避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代。三亲婴儿的染色体______(填比例)来自母亲提供的细胞核.设计试管婴儿技术与为解决不孕夫妇的生育问题而出现的试管婴儿技术主要区别是植入前对胚胎进行_____________________。

            • 2.

              胚胎工程技术包含的内容很丰富,下图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况,其中供体1是良种荷斯坦高产奶牛,供体2是黄牛,请据图回答下列问题:

              (1)应用1中获得的小牛,其遗传物质来源于__________,细胞B的名称是___________。

              (2)应用2中牛完成体内受精的场所是_________,此时卵子需要达到________期,才具备与精子受精的能力。

              (3)获得更多基因型完全相同的牛,可采用图中的应用______(填数字)的培养技术。

              (4)胚胎干细胞可以从细胞C__________或细胞D__________中分离出来。相同的胚胎干细胞,“克隆”的结果各种各样,如有的是神经细胞,有的是血细胞,有的是肌肉细胞,究其本质原因是____________的结果。

            • 3.

              人的血清白蛋白(HSA)在临床上需求量很大,通常从人血中提取。但艾滋病病毒(HIV)等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增,使人们对血液制品顾虑重重。如果应用基因工程和克隆技术,将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中,那么利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白就成为可能。其大致过程如下:

              Ⅰ.采集良种供体奶牛的卵母细胞和精子,通过体外受精,形成受精卵;

              Ⅱ.将人血清白蛋白基因导入奶牛受精卵,形成重组细胞;

              Ⅲ.电脉冲刺激重组细胞,促使其形成早期胚胎;

              Ⅳ.将胚胎移植到受体母牛的子宫中,最终发育成转基因小牛。

              请回答下列问题:

              (1)实验步骤Ⅰ中,在体外受精前,需要对奶牛的精子进行________处理。受精时,往往一个卵母细胞只能和一个精子结合,受精过程中防止多精入卵的生理反应包括________________________________________________________________________。

              (2)实验步骤Ⅱ中,将人的血清白蛋白基因导入奶牛受精卵最为有效的方法是________。导入基因前,需要将血清白蛋白基因与奶牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起,这一步骤的目的是__________________________________________________________________________________。

              (3)实验步骤Ⅲ中,进行动物早期胚胎的体外培养时,培养液中除了含有各种无机盐和有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外,还要添加_____和动物血清。

              (4)实验步骤Ⅳ中,应选择性别为________的奶牛胚胎进行移植。

            • 4.

              下图为吉林大学农学部奶牛繁育基地成功培育出的一头携带转入赖氨酸基因的克隆牛“织女”的大致过程,请据图回答问题:

              (1)若我们已知赖氨酸基因的碱基序列,一般采用 ________法获取该目的基因。
              (2)克隆牛“织女”的诞生过程中涉及到的细胞水平的现代生物技术主要有: ____________________________________________(至少写出两点)。
              (3)从④到⑤的过程可获得较多的遗传物质相同的早期胚胎,常采用的方法是进行 ______________________________
              (4)对移植前的胚胎进行性别鉴定时,一般采用SRY—PCR方法,选择出现阴性反应的_ _______________________________(性别)胚胎进行移植。
              (5)为提高经济效益,某养猪场引进了一头肉质优良的花猪,运用 _____________(填“核移植”或”胚胎分割”)技术可实现利用当地品种生产花猪的设想。
            • 5. 下图1是某科研小组设计的转绿色荧光蛋白基因(GFP基因)猕猴(2n)的培育过程示意图,请据图回答下列问题:

              图1

              (1) 过程②中常用____技术将目的基因导入受精卵,受精过程中精子头部接触卵细胞膜时产生____反应,以防止多精入卵。 

              (2) 过程⑤在精核与卵核融合之前,用微型吸管吸除雄核,再用细胞松弛素B处理(作用类似于用秋水仙素处理植物细胞),处理后的受精卵可发育成猕猴。这种方法在动物新品种选育中的显著优点是_________________。 

              (3) ⑦过程通过____技术实现,在个体水平上检测GFP基因是否表达的方法是______________。 

              (4) 胚胎工程中通常需要鉴定胚胎性别,如利用SRY—PCR技术鉴定,鉴定时需以Y染色体上的SRY基因(性别决定基因)的一段序列设计引物,用被测胚胎DNA作模板进行PCR扩增。根据SRY基因序列设计的引物长度一般为20~24个核苷酸,其不宜过短的原因主要是_。 

              (5) 过程①的基因表达载体的构建如下图2所示。若图中GFP基因的M端伸出的核苷酸的碱基序列是—TCGA,N端伸出的核苷酸的碱基序列是—TGCA,则在构建含该GFP基因的重组质粒A时,应选用的限制酶是______。若对符合设计要求的重组质粒A进行酶切,假设所用的酶均可将识别位点完全切开,则采用BamHⅠ和PstⅠ酶切,可得到____种DNA片段。 

              图2            

            • 6. 回答下列(一)、(二)小题:

                  (一)要获得遗传特性单一的大肠杆菌菌种,一般必须对原有的大肠杆菌菌种进行扩大培养、并利用纯化技术得到单菌落的菌种。请回答下列有关大肠杆菌的培养和分离实验的相关问题:

                  (1)对买回来的大肠杆菌菌种进行扩大培养,一般用LB培养基,在培养基中为微生物提供碳源、氮源和能源的物质主要是__________,为调节渗透压,要加入一定量的___________。为进行大肠杆菌的分离,还要加入琼脂配制成固体培养基,并进行倒平板的操作。

                  (2)获得纯净微生物培养物的关键是_____________________,为此,必须对培养器皿、接种用具和培养基进行严格灭菌。培养器皿和培养基一般采用_____________________法灭菌,接种环采用灼烧法灭菌。同时在接种或倒平板操作时,除了在超净台上进行操作并对实验者的衣着、手和实验空间进行严格清洁和消毒外,还必须_________________________,以防止空气中的杂菌污染。

                  (3)大肠杆菌菌种的扩大培养一般采用液体培养基,接种后将培养基置于37℃摇床振荡条件下培养12小时。菌种的分离时一般在固体培养基上采用____________法,并将培养皿_______________状态。

                  (二)科学家将蜘蛛的蛛丝基因导入山羊体内,创造出转基因山羊,使羊奶中含有一种独特的蛛丝蛋白。生产原理如下图。请回答:

                  (1)将蛛丝蛋白基因和质粒通过甲过程形成的X物质为_____________。如果选取的受体细胞为体细胞,当在培养过程中出现接触抑制现象时,需要进行____________培养。要使重组细胞具有发育的全能性,乙过程需要的技术操作是____________。

                  (2)下列关于丙过程的叙述,正确的是______。

                  A.该过程为动物细胞培养,目的是获得更多的重组细胞

                  B.该过程所用培养液的成分往往是相同的

                  C.该过程在无菌条件下进行,需要提供CO2来调节pH

                  D.通过现代生物技术可以将重组细胞在体外培养成山羊个体

                  (3)为了快速繁殖转基因山羊,还可在丁过程前对早期胚胎进行____________,经培养后再分别移植到____________________的代孕母羊的相应部位。

            • 7.

              下图表示科学家采用不同方法培育良种牛的过程, a~h为操作过程,请据图回答有关问题:


              (1)“试管牛”技术的操作流程是 (填字母)。

              (2)d操作的名称是________,受体子宫内胚胎发育的过程中,细胞不断分裂,其分裂方式为________ 

              (3)图中所示的过程中用到的激素是________,其目的是获得更多的卵母细胞,经受精后可得到早期胚胎;图中早期胚胎属于胚胎发育的________阶段,其中胚胎干细胞来源于________(填数字标号)。

              (4)过程h常用的方法是________

            • 8.

              请回答下列与哺乳动物精子和卵子发生有关的问题:

              (1)精细胞经变形后,高尔基体发育形成精子的顶体,顶体内含有的顶体酶能协助精子穿过             和透明带。

              (2)某动物排卵时,卵母细胞尚未成熟,当该细胞发育至           期时,才具备受精能力。若在                                        ,则表明已发生受精。

              (3)防止多精入卵的屏障有                         和                   。

              (4)胚胎移植常时用____________激素对供体进行超数排卵处理,经人工授精后可得到早期胚胎。

              (5)哺乳动物的早期胚胎在一定时间内不会与母体子宫建立组织联系,而是处于      状态,这就为              提供了可能。

            • 9. Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞.科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗.其技术流程如图:

              (1)实验过程中需要对卵母细胞进行_______________处理.培养细胞过程中,要置于CO2培养箱中,CO2的主要作用是___________________________.
              (2)用HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段.为将该片段直接连接到表达载体,所选择的表达载体上应具有_________酶的酶切位点.
              (3)基因治疗是治疗_________最有效的手段,该病很难用一般药物进行治疗.
            • 10.

              人的血清蛋白在临床上需求量很大,通常从血中提取。由于艾滋病等人类传染病造成的威胁与日俱增,使人们对血液制品心存疑虑。生物技术的发展与应用使利用动物生产人的血清蛋白成为可能,如图是上海某研究所培育生产出血清蛋白奶牛的流程。根据下图回答:

              (1)雌性奶牛胚胎细胞是(   )

              A.雌性奶牛产生的卵细胞

              B.雌性奶牛体内的受精卵

              C.能发育成雌性奶牛的受精卵

              D.从奶牛胚胎上取出的细胞,这个奶牛胚胎将发育成雌性奶牛

              (2)将人的血清蛋白基因导入奶牛胚胎受体细胞时,常用方法是                

              (3)小牛1、2、3的性别是              性,性状              

              (4)人体血清蛋白基因的表达要经历                            两个过程,该基因能够在小牛体内表达产生人的血清蛋白,说明生物共用一套            

              (5)此操作流程涉及的现代生物技术有动物细胞培养、                            等。

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