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            • 1. 2014年,上映了《超凡蜘蛛侠2》.电影中,“蜘蛛侠”能产生高强度的蜘蛛丝,现实中的基因工程也创造出了“蜘蛛羊”,该羊的乳汁中含有蛛丝蛋白,高强度的蛛丝蛋白可用于许多重要的特种工业领域.请回答:
              (1)基因工程操作的关键步骤是    ;如果是将目的基因导入植物细胞,
              采用最多的方法是    ,其次还有    和花粉管通道法等.
              (2)如果是将目的基因导入动物细胞,最常用的方法是    .此方法的受体细胞多是    
              (3)重组DNA导入受体细胞后,筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是    
              (4)胚胎移植时,通常将早期胚胎移植到同种且    与供体相同的动物体内,受体对外来胚胎基本上不发生    .若需要一次产生两头转基因“蜘蛛羊”,可将    阶段的胚胎进行分割,具体操作时要保证    
              (5)科学家为保证乳汁中有蛛丝蛋白,应该先用    技术,检测蛛丝蛋白基因是否整合到了染色体上.
            • 2. 2013年,全球首批全基因组测序的PGD/PGS试管婴儿在长沙诞生.新技术的突破意味着通过设计试管婴儿解决部分不孕不育问题的同时,部分肿瘤疾病、遗传性疾病的家族性遗传也将有望避免.
              (1)设计试管婴儿时为了提高受孕率,胚胎移植时多采用多胚胎移植,因此需要用    处理,促进母亲排出更多的卵子.胚胎发育的卵裂期在    (填“透明带”或“放射冠”)内进行.受精卵经72小时体外培养发育成有32个细胞左右的胚胎,叫    ,可用于胚胎移植.
              (2)目前SRY-PCR法是对胚胎的性别进行鉴定最有效最准确的方法.操作的基本程序是:从被测的囊胚中取出几个    (填“部位”)细胞,提取DNA;然后用位于Y染色体上的性别决定基因(即SRY基因)的一段碱基作    ,以    为模板进行PCR扩增;最后与SRY特异性探针出现阳性反应者,胚胎为    性.
              (3)治疗性克隆,即可利用人体细胞核移植等技术治疗人类疾病,在去除卵母细胞的细胞核时,可用微型吸管把位于        之间的第一极体一并吸出.
            • 3. 人们利用转基因、核移植等技术获得动物胚胎,移植给受体获得后代?请回答:
              (1)在转基因过程中,构建基因表达载体常用的工具酶是    .日的基因导入动物细胞最常用的技术是    
              (2)在核移植过程中,从供体内获得体细胞后,对其进行的初次培养称为    ,其细胞数量达到一定程度后出现    现象而使细胞停止分裂,需用酶处理使其分散成单个细胞继续培养.
              (3)用于核移植的供体细胞一般选用传代10代以内的细胞,原因是    ;所刚的去核卵母细胞一般处于    期;用于培养供体细胞的培养基中通常含有等天然成分.
              (4)胚胎移植时,胚胎在受体内存活的生理学基础是受体对移人子宫的外米胚胎基本上不发生     反应;欲获得遗传物质完全相同的两个后代,可选择发育良好、形态正常的    进行胚胎分割,因为该时期的细胞具有    
            • 4. 图示方案为人们获得生物新品种的过程,请回答下列问题:
              方案Ⅰ:抗冻蛋白基因
              导入
              烟草细胞→抗冻烟草
              方案Ⅱ:A基因
              导入
              免疫过的B细胞→体外培养→单克隆抗体
              方案Ⅲ:人的生长激素基因
              导入
              牛的受精卵→早期胚胎
              移植
              受体母牛→转生长激素牛
              (1)基因工程的核心步骤是    .方案Ⅰ中,将抗冻蛋白基因导入烟草受体细胞常用的方法是    .从分子水平检测抗冻烟草是否培育成功的方法是:    
              (2)推测方案Ⅱ中A基因所起的作用是    
              (3)方案Ⅲ中的转基因牛可以通过分泌乳汁来生产人的生长激素.人的生长激素基因在导入受体细胞前,基因的首段必须含有使其仅能在山羊    细胞中特异性表达的    
              (4)方案Ⅲ中的早期胚胎在移植入受体母羊子宫之前,必须对胚胎进行性别鉴定,一般是取处于    时期的    细胞进行检测.
            • 5. 为了加快优良种牛的繁殖速度,科学家采用了以下两种方法,请根据图示信息回答下列问题.

              (1)试管牛的培育属于    (“有性繁殖”或“无性繁殖”);试管牛和克隆牛的培育过程中均用到的工程技术有早期胚胎培养、    等;克隆牛的培育依据的原理是    
              (2)促使B牛多排卵的激素一般是    .对B牛和D牛要进行    处理.
              (3)在受精的过程中,判断卵子是否受精的标志是    
              (4)要培育高产奶率的转基因牛,如建立生产生长激素的乳腺生物反应器,即科学家将    和乳腺蛋白基因的        等调控组件重组在一起,该过程需要用到的酶是    ,再通过    法导入牛的    中.
            • 6. 胚胎工程和基因工程目前在生物技术中发展较快,回答下列问题:
              (1)在哺乳动物的核移植实验中,一般通过[    ](物理方法)将受体细胞激活,使其进行细胞分裂并发育,当胚胎发育到[    ]阶段时,将胚胎植入另一雌性(代孕)动物体内.
              (2)在“试管牛”的培育过程中,要使精子和卵母细胞在体外成功结合,需要对精子进行[    ]处理.另外,培养的卵母细胞需要发育至[    ],该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和第一极体.
              (3)利用体细胞进行核移植技术的难度明显高于利用胚胎细胞进行核移植的原因是[    ].
              (4)若要使获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素,则所构建的基因表达载体必须包括:某种牛乳腺分泌蛋白基因及其启动子、[    ]、终止子、标记基因和复制原点等.目前常用的措施是将该基因表达载体导入牛的[    ](填“受精卵”或“乳腺细胞”),导入方法是[    ].
            • 7. 人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白,可在转htPA基因母羊的羊乳中获得.流程如下:

              (1)htPA基因与载体用    切割后,通过DNA连接酶连接,以构建重组表达载体.
              (2)为获取更多的卵(母)细胞,要对供体    母羊注射    ,使其超数排卵.采集的精子需要经过    ,才具备受精能力.
              (3)将重组表达载体导入受精卵常用    的方法是    .为了获得母羊,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行性别鉴定.利用        技术可获得多个转基因个体,这体现了早期胚胎细胞的    
              (4)若在转ht-PA基因母羊的羊乳中检测到    ,说明目的基因成功表达.
            • 8. 自然条件下,哺乳动物不发生孤雌生殖.2014年云南农大科研所利用先进的生物技术培育出世界上第一批成活的孤雌生殖克隆猪,其与体细胞克隆猪的培育流程比较如图.请回答:

              (1)图中过程    (填序号)是获得孤雌生殖克隆猪的技术流程,其原理是    
              (2)图中过程③④⑤⑥是运用    技术获得体细胞克隆猪的流程,获得的后代更多表现出    的优良性状.
              (3)若要获得单个成纤维细胞进行培养,需用    处理猪胚胎的部分组织.若要获得大量的卵母细胞需用    激素处理良种母猪.
              (4)过程⑤的名称是    ,所选择的胚胎一般处于    时期较合适.进行⑤过程之前,需要对代孕母猪进行    处理,为早期胚胎发育提供相同的生理环境.
            • 9. 美国威斯康星州的一个奶牛场有一头奶牛,年产奶量达30.8t,我国奶牛产奶量年平均水平仅为3t~4t.某人用该高产奶牛的耳朵细胞,采用核移植技术获得高产奶牛(如图)
               
              (1)③过程中选择去核卵母细胞作为受体细胞的原因是    
              (2)④过程利用的技术是    ,其原理是    
              (3)该实验的成功说明已分化的耳朵细胞的细胞核中含有与    一样的全套基因,这种繁殖方式属于    
              (4)若研究发现该高产奶牛线粒体发达,故而它的产奶量高,则小牛d成年后具有这一优良性状吗?    .你的依据是    
            • 10. (2016春•清河县校级期中)世界上第一只克隆绵羊“多利”的培育程序如图所示.请看图后回答:
              (1)写出图中 a、b 所指的细胞工程名称:a    ,b    
              (2)实施细胞工程a 时,所需的受体细胞大多采用动物卵细胞的原因是:    
              (3)“多利”面部的毛色是    ,性别是    ,请根据遗传学原理说明判断的原因是:    
              (4)继植物组织培养之后,克隆绵羊的培育成功,证明动物细胞也具有    
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