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            • 1.

              图示方案为人们获得生物新品种的过程,请回答下列问题:

              方案Ⅰ:抗冻蛋白基因烟草细胞―→抗冻烟草

              方案Ⅱ:A基因免疫过的B细胞―→体外培养―→单克隆抗体

              方案Ⅲ:人的生长激素基因牛的受精卵―→早期胚胎受体母牛―→转基因牛

              (1)基因工程的核心步骤是________________。农杆菌转化法中,根据农杆菌的特点,如果将抗冻蛋白基因插入________上,通过农杆菌的转化作用,就可以使目的基因进入植物细胞,并将其插入植物细胞中________上。

              (2)推测方案Ⅱ中A基因所起的作用是________,请写出该方案获得的细胞中遗传信息传递时所遵循的法则____________________________。

              (3)方案Ⅲ中的转基因牛可以通过分泌乳汁来生产人的生长激素。这需要将人的生长激素基因与________的启动子等调控组件重组在一起。该方案中的早期胚胎在移植入受体母牛子宫之前,必须进行性别鉴定,一般是取处于________时期的________细胞进行检测。

            • 2.

              为了给水牛体外胚胎产业化生产中合理使用亚麻酸提供理论依据,科研人员研究了不同浓度的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟、早期胚胎发育的影响,分析回答:

              ①卵母细胞的收集和体外培养:从屠宰场水牛的卵巢中收集并处理卵母细胞,随机分成5组,分别置于不同浓度亚麻酸的培养液中,在恒温的培养箱中培养22-24h。

              ②卵母细胞成熟判断:在显微镜下观察卵母细胞,判断其是否成熟,统计结果如表。

              ③体外受精:在受精溶液中进行体外受精后,用显微镜观察判断是否完成受精。

              ④早期胚胎培养:将受精卵移入胚胎培养液中培养44-48h后检查分裂情况,每隔48h更换一次培养液,第5-9天观察囊胚发育情况。

              如表亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟的影响

              ALA浓度/μmol·L-l

              卵母细胞数

              核成熟卵子数

              0

              229

              137

              10

              201

              133

              50

              227

              166

              100

              215

              137

              200

              215

              135


              (1)步骤①中,细胞培养箱中加5%CO2的作用是____________。

              (2)步骤②中,卵母细胞发育到____________时期才能与获能的精子受精;步骤③中,判断是否受精的依据是____________。

              (3)步骤④中,受精卵经过卵裂期、____________(时期)发育成囊胚,培养过程定期更换培养液的目的是____________。

              (4)根据实验数据分析,亚麻酸溶液为200μmol·L-1时,对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育起____________作用(填“促进”、“抑制”)。

              (5)将囊胚移植到受体(代孕母牛)子宫内,最终生出的犊牛和受体遗传上有无亲缘关系?____________原因是___________

              ____________。

            • 3.

              用医学手段培育“三亲婴儿”可以解决遗传基因带来的缺陷,其培养过程如图所示.请据图回答有关问题:

              (1)由于女性的自然周期产生的卵子太少,捐献者在取卵前需要注射________激素,促使一次有更多的卵泡发育。重组细胞体外培养所需的气体主要是O2和CO2,CO2的主要作用是___________________。

              (2)从受精卵到三亲婴儿的培养还需要______和______等技术。三亲婴儿的培育方式属于____________生殖.

              (3)三亲婴儿的培育技术______(填“能”或“不能”)避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代。三亲婴儿的染色体______(填比例)来自母亲提供的细胞核.设计试管婴儿技术与为解决不孕夫妇的生育问题而出现的试管婴儿技术主要区别是植入前对胚胎进行_____________________。

            • 4.

              胚胎工程技术包含的内容很丰富,下图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况,其中供体1是良种荷斯坦高产奶牛,供体2是黄牛,请据图回答下列问题:

              (1)应用1中获得的小牛,其遗传物质来源于__________,细胞B的名称是___________。

              (2)应用2中牛完成体内受精的场所是_________,此时卵子需要达到________期,才具备与精子受精的能力。

              (3)获得更多基因型完全相同的牛,可采用图中的应用______(填数字)的培养技术。

              (4)胚胎干细胞可以从细胞C__________或细胞D__________中分离出来。相同的胚胎干细胞,“克隆”的结果各种各样,如有的是神经细胞,有的是血细胞,有的是肌肉细胞,究其本质原因是____________的结果。

            • 5.

              人的血清白蛋白(HSA)在临床上需求量很大,通常从人血中提取。但艾滋病病毒(HIV)等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增,使人们对血液制品顾虑重重。如果应用基因工程和克隆技术,将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中,那么利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白就成为可能。其大致过程如下:

              Ⅰ.采集良种供体奶牛的卵母细胞和精子,通过体外受精,形成受精卵;

              Ⅱ.将人血清白蛋白基因导入奶牛受精卵,形成重组细胞;

              Ⅲ.电脉冲刺激重组细胞,促使其形成早期胚胎;

              Ⅳ.将胚胎移植到受体母牛的子宫中,最终发育成转基因小牛。

              请回答下列问题:

              (1)实验步骤Ⅰ中,在体外受精前,需要对奶牛的精子进行________处理。受精时,往往一个卵母细胞只能和一个精子结合,受精过程中防止多精入卵的生理反应包括________________________________________________________________________。

              (2)实验步骤Ⅱ中,将人的血清白蛋白基因导入奶牛受精卵最为有效的方法是________。导入基因前,需要将血清白蛋白基因与奶牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起,这一步骤的目的是__________________________________________________________________________________。

              (3)实验步骤Ⅲ中,进行动物早期胚胎的体外培养时,培养液中除了含有各种无机盐和有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外,还要添加_____和动物血清。

              (4)实验步骤Ⅳ中,应选择性别为________的奶牛胚胎进行移植。

            • 6.

              下图为吉林大学农学部奶牛繁育基地成功培育出的一头携带转入赖氨酸基因的克隆牛“织女”的大致过程,请据图回答问题:

              (1)若我们已知赖氨酸基因的碱基序列,一般采用 ________法获取该目的基因。
              (2)克隆牛“织女”的诞生过程中涉及到的细胞水平的现代生物技术主要有: ____________________________________________(至少写出两点)。
              (3)从④到⑤的过程可获得较多的遗传物质相同的早期胚胎,常采用的方法是进行 ______________________________
              (4)对移植前的胚胎进行性别鉴定时,一般采用SRY—PCR方法,选择出现阴性反应的_ _______________________________(性别)胚胎进行移植。
              (5)为提高经济效益,某养猪场引进了一头肉质优良的花猪,运用 _____________(填“核移植”或”胚胎分割”)技术可实现利用当地品种生产花猪的设想。
            • 7. 下图1是某科研小组设计的转绿色荧光蛋白基因(GFP基因)猕猴(2n)的培育过程示意图,请据图回答下列问题:

              图1

              (1) 过程②中常用____技术将目的基因导入受精卵,受精过程中精子头部接触卵细胞膜时产生____反应,以防止多精入卵。 

              (2) 过程⑤在精核与卵核融合之前,用微型吸管吸除雄核,再用细胞松弛素B处理(作用类似于用秋水仙素处理植物细胞),处理后的受精卵可发育成猕猴。这种方法在动物新品种选育中的显著优点是_________________。 

              (3) ⑦过程通过____技术实现,在个体水平上检测GFP基因是否表达的方法是______________。 

              (4) 胚胎工程中通常需要鉴定胚胎性别,如利用SRY—PCR技术鉴定,鉴定时需以Y染色体上的SRY基因(性别决定基因)的一段序列设计引物,用被测胚胎DNA作模板进行PCR扩增。根据SRY基因序列设计的引物长度一般为20~24个核苷酸,其不宜过短的原因主要是_。 

              (5) 过程①的基因表达载体的构建如下图2所示。若图中GFP基因的M端伸出的核苷酸的碱基序列是—TCGA,N端伸出的核苷酸的碱基序列是—TGCA,则在构建含该GFP基因的重组质粒A时,应选用的限制酶是______。若对符合设计要求的重组质粒A进行酶切,假设所用的酶均可将识别位点完全切开,则采用BamHⅠ和PstⅠ酶切,可得到____种DNA片段。 

              图2            

            • 8.
              人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值.科研人员通过生物工程技术获得转HSA基因母牛,以便通过乳腺生物反应器生产HSA,其主要技术流程如图1所示:
              (1)如图1所示,将牛胎儿成纤维细胞核移入去核卵母细胞中,该技术称为 ______ 技术;供核的牛胎儿成纤维细胞通常选用传代10代以内的细胞,其原因是 ______ .
              (2)胚胎移植时,为使代孕母牛能处于适合的生理状态,需要用激素对其进行 ______ 处理.
              (3)SPY-PCR法性别鉴定的基本程序是:提取牛胎儿成纤维细胞的DNA,经PCR反应体系扩增SRY基因(Y染色体上特有的性别决定基因)片段,然后对扩增产物进行检测.
              ①PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP(包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP)、引物以外,还应含有 ______ ;其中,dNTP的作用是 ______ ,引物应选用如图2中的 ______ (填图中标号).
              ②若扩增产物含大量SPY基因片段,则该种牛胎儿成纤维细胞 ______ (填“能”或“不能”)用作技术流程中转化过程的受体细胞.  
              (4)从细胞水平鉴定早期胚胎性别的方法是 ______ .
            • 9.

              下图表示科学家采用不同方法培育良种牛的过程, a~h为操作过程,请据图回答有关问题:


              (1)“试管牛”技术的操作流程是 (填字母)。

              (2)d操作的名称是________,受体子宫内胚胎发育的过程中,细胞不断分裂,其分裂方式为________ 

              (3)图中所示的过程中用到的激素是________,其目的是获得更多的卵母细胞,经受精后可得到早期胚胎;图中早期胚胎属于胚胎发育的________阶段,其中胚胎干细胞来源于________(填数字标号)。

              (4)过程h常用的方法是________

            • 10.

              请回答下列与哺乳动物精子和卵子发生有关的问题:

              (1)精细胞经变形后,高尔基体发育形成精子的顶体,顶体内含有的顶体酶能协助精子穿过             和透明带。

              (2)某动物排卵时,卵母细胞尚未成熟,当该细胞发育至           期时,才具备受精能力。若在                                        ,则表明已发生受精。

              (3)防止多精入卵的屏障有                         和                   。

              (4)胚胎移植常时用____________激素对供体进行超数排卵处理,经人工授精后可得到早期胚胎。

              (5)哺乳动物的早期胚胎在一定时间内不会与母体子宫建立组织联系,而是处于      状态,这就为              提供了可能。

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