为了给水牛体外胚胎产业化生产中合理使用亚麻酸提供理论依据，科研人员研究了不同浓度的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟、早期胚胎发育的影响，分析回答：

①卵母细胞的收集和体外培养：从屠宰场水牛的卵巢中收集并处理卵母细胞，随机分成5组，分别置于不同浓度亚麻酸的培养液中，在恒温的培养箱中培养22-24h。

②卵母细胞成熟判断：在显微镜下观察卵母细胞，判断其是否成熟，统计结果如表。

③体外受精：在受精溶液中进行体外受精后，用显微镜观察判断是否完成受精。

④早期胚胎培养：将受精卵移入胚胎培养液中培养44-48h后检查分裂情况，每隔48h更换一次培养液，第5-9天观察囊胚发育情况。

如表亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟的影响

（1）步骤①中，细胞培养箱中加5%CO₂的作用是____________。

（2）步骤②中，卵母细胞发育到____________时期才能与获能的精子受精；步骤③中，判断是否受精的依据是____________。

（3）步骤④中，受精卵经过卵裂期、____________（时期）发育成囊胚，培养过程定期更换培养液的目的是____________。

（4）根据实验数据分析，亚麻酸溶液为200μmol·L^-1时，对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育起____________作用（填“促进”、“抑制”）。

（5）将囊胚移植到受体（代孕母牛）子宫内，最终生出的犊牛和受体遗传上有无亲缘关系？____________原因是___________

____________。

有关现代生物科技技术，请回答下列问题。

（1）动物体内，精细胞经变形后，高尔基体发育形成精子的顶体，顶体内含有的__________能协助精子穿过卵母细胞的放射冠和透明带。经过______的精子才能与达到 ________期的卵子受精。受精时，先后有__________和 ___________两道屏障防止多精入卵。若在卵黄膜和透明带之间看到_____________，这是判断卵子是否受精的重要标准。_______________ 

（2）试管动物的培育主要包括________、早期胚胎培养和胚胎移植三个环节。胚胎移植时，为了给移入的外来胚胎提供相同的生理环境，需要对供、受体母牛进行_______处理。

（3）为了提高胚胎利用率，可以采用____________方法对早期胚胎进行切割，切割时，通常选择发育良好、形态正常的____________胚，特别注意将________均等分割，否则会影响分割后的胚胎恢复和进一步发育，选择______________细胞进行性别鉴定。

(4) 通常胚胎干细胞可以从_____________________________________(写出两种方法)中分离得到。

现代生物工程技术推动了医药学、免疫学和生态学的发展，如科学家将人的血清蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳汁生产出人的血清蛋白等。

（1）从牛的组织获得单个细胞，通常需要用______________酶处理。

（2）将人血清蛋白基因导入牛的常用的方法是_______________。在导入之前，要用_____________酶构建基因表达载体，导入后再将受精卵送入母体的输卵管，受精卵即在输卵管内进行___________，开始发育。

（3）上述胚胎发育早期是在____________内进行的，这个时期称为卵裂期。在胚胎发育过程中，囊胚的___________将发育成转基因牛的各种组织。

（4）为了要泌乳，必须保证移植的胚胎为______性，一般的做法是取样_________做DNA分析性别鉴定。当转基因动物进入泌乳期时，可通过分泌的乳汁来生产人血清蛋白，因而称为_______________。

（5）单克隆抗体的制备中，将经抗原免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合，再用特定的___________培养基进行筛选，获得杂交瘤细胞后，还需进行___________培养和抗体检测，经过多次筛选，就能获得能分泌单一抗体的杂交瘤细胞。最后获得的杂交瘤细胞只能产生一种单一抗体的原因是___________。

（6）为建设美丽乡村，积极推进生态农业建设，依据生态工程___________的原理，合理设计食物链，使生态系统中的物质和能量得到分层次多级利用，使废弃物资源化，提高了能量的___________，减少了环境污染。

某课题组为解决本地奶牛产奶量低的问题，引进了具高产奶基因但对本地适应性差的 纯种公牛。

（1）拟进行如下杂交。

♂A（具高产奶基因的纯种）╳♀B（具适宜本地生长基因的纯种）→C

若C中的母牛表现为适宜本地生长，但产奶量并不提高，说明高产奶是______性状。为获得产奶量高且适宜本地生长的母牛，根据现有类型，最佳杂交组合是________，后代中出现这种母牛的概率是______（假设两对基因分别位于不同对常染色体上）。

（2）用以上最佳组合，按以下流程可加速获得优良个体。

①  动物细胞培养是动物细胞工程最基础的技术。在此技术中单细胞的获取通常需要用________进行处理，动物细胞在培养过程中培养箱所需的气体环境为___________。在培养过程中，应定期更换培养液，其目的是__________。

② 精子要具有受精能力，需对其进行_________处理；卵子的成熟在过程______（填图中序号）中完成。胚胎发育过程中胚胎从透明带中伸展出来的过程叫做__________。

③ 为了提高已有胚胎的利用率，可采取_________技术。④～⑤过程需要用到________技术，在畜牧生产中采用这种技术的优势是_______________。

[生物——选修3：现代生物科技专题]

胚胎移植可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力，使供体生产的后代数是自然繁殖的十几倍到几十倍。回答有关培育高产奶牛的胚胎移植的相关问题：

（1）胚胎移植时供体母牛要选用________和生产性能优秀的个体，用促性腺激素处理使其超数排卵，牛排出的卵子实际上是________（填“初级卵母细胞”“次级卵母细胞”或“卵细胞”）。

（2）若移植的胚胎来自体内受精，则受精的场所是________。如果要在移植前确定胚胎的性别，则在囊胚期取________细胞做________分析性别鉴定，这是因为该部位细胞与将来发育成新个体的________都来自于同一个受精卵，它们所含的________相同。

（3）在胚胎移植过程中需要对供体和受体母牛进行同期发情处理的原因是同期发情处理后________。的信息进行________后再将兴奋传给效应器，图中显示的效应器有________。

[生物——选修3现代生物技术专题]

   基因疫苗是指编码外源性抗原的基因导入人和动物体内，让其在宿主细胞中表达抗原蛋白，诱导机体产生免疫应答。某科研所计划利用基因疫苗，通过基因工程和胚胎工程技术培育具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛。请回答下列问题：

（1）基因工程的核心步骤是________________________，这一过程需要的酶是___________________________________________。

（2）一个完整的基因表达载体至少包括目的基因，________，________，标记基因等。通常用________________________技术将目的基因导入动物细胞。

（3）欲检测高产奶牛体内是否出现口蹄疫病毒的抗原蛋白，在分子水平上检测的方法及结果是从基因牛中提取________________，用________________________杂交，如果出现杂交带，表明奶牛中出现了抗原蛋白，反之，表明奶牛中未出现抗原蛋白。

（4）胚胎工程最后一道工序是胚胎移植，其实质是_________________________________。

（5）为提高胚胎的利用率，可以采用胚胎分割技术，应该选用___________________分割。在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将____________________均等分割。

请回答下列与哺乳动物精子和卵子发生有关的问题：

（1）精细胞经变形后，高尔基体发育形成精子的顶体，顶体内含有的顶体酶能协助精子穿过             和透明带。

（2）某动物排卵时，卵母细胞尚未成熟，当该细胞发育至           期时，才具备受精能力。若在                                        ，则表明已发生受精。

（3）防止多精入卵的屏障有                         和                   。

（4）胚胎移植常时用____________激素对供体进行超数排卵处理，经人工授精后可得到早期胚胎。

（5）哺乳动物的早期胚胎在一定时间内不会与母体子宫建立组织联系，而是处于      状态，这就为              提供了可能。

[生物——选修3：现代生物科技专题]

α-抗胰蛋白酶是一种重要的药用蛋白，可在转基因母羊的乳汁中获得。流程如图：

（1）目的基因与表达载体用________切割后，通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体。

（2）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其________。采集的精子需要经过________，才具备受精能力。

（3）将重组表达载体导入受精卵常用的方法是________。为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行________。利用________和胚胎移植技术可获得多个转基因个体。

（4）检测目的基因是否已转录出了mRNA，可采用________技术。若要检测羊乳汁中是否含α-抗胰蛋白酶，需用________法，若有杂交带出现，表明目的基因已形成蛋白质产品。