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            • 1. Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞.下图为科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗的技术流程图,据图回答有关问题:

              (1)步骤①中,在核移植之前应该采集卵母细胞,采用的主要方法是用    处理,使其排出更多的卵子,然后从    中冲取.
              (2)步骤②中,重组细胞培养到囊胚期,可从其    中分离出ES细胞,该细胞在形态上表现为体积小、细胞核大、核仁明显;在功能上具有发育的    
              (3)步骤③中,将含有Rag2基因的表达载体导入ES细胞,常采用    法.为检测Rag2基因是否表达出相应的蛋白质,通常采用    的方法.
              (4)转基因和细胞核移植(克隆)等生物技术存在安全性和伦理问题,如科学家赋予转基因生物某些特殊性状,它们有可能成为“入侵的外来物种”,威胁生态系统中其他生物的生存,这属于转基因生物的    (“食品安全”、“生物安全”或“环境安全”)问题;我国政府对待克隆人的态度是    ,不反对治疗性克隆.
            • 2. 如图是体外受精技术培育试管动物的大致流程,请回答下列问题:

              (1)精子的顶体内含有    能协助精子穿过卵母细胞的    
              (2)体外培养受精卵时,除给予一定量的O2以维持细胞呼吸外,还提供    气体以维持    相对稳定.
              (3)动物的早期胚胎需移植到同种且    与供体相同的动物体内,被移植的胚胎之所以能存活是因为受体对    
              (4)如果将某种目的基因导入动物细胞,以期获得新性状,最常用的方法是用显微注射技术将    导入受精卵中,目的基因能够导入到受体细胞内,并且在受体细胞中稳定表达的过程称为    
            • 3. 羊绒是生长在山羊外表皮层的绒毛,属于稀有的特种动物纤维.绒山羊的毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIFⅡ)基因与其所产的羊绒质量密切相关.用生物工程技术能获得转KIFII基因的高绒质绒山羊,其简单流程如图所示.请回答有关问题:

              (1)在基因表达载体构建过程中,其组成除KIFⅡ基因外,还必须有标记基因.标记基因的作用是    .过程②中常用    的方法将目的基因导人受精卵.
              (2)过程⑥中,除了给予一定量的O2维持细胞呼吸外,还需要提供CO2气体以维持培养液的    
              (3)过程⑦中胚胎在受体内存活的生理基础是受体对移人子宫的外来胚胎不发生    反应.为使代孕母羊与供体母羊生殖器官的生理状态相同,需用相关激素对代孕母羊作    处理,进行过程⑦的最佳时期是    
              (4)若要同时获得多只与此转基因母羊相同的羊,可对早期胚胎进行    ,操作若选用囊胚期的胚胎,操作过程中要特别注意    
            • 4. 逆转录病毒载体是目前应用较多的动物基因工程载体之一.研究发现逆转录病毒基因组(RNA)的核心部分包括三个基因:gag基因(编码病毒的核心蛋白)、pol基因(编码逆转录酶)、env基因(编码病毒的表面糖蛋白).位于这些基因的两端有LTR序列(含有启动子、调节基因等),控制着逆转录基因组核心基因的表达及转移.下图是构建逆转录病毒载体及用于培育转基因小鼠的过程.回答下列问题:

              (1)催化过程①的酶是    ,过程①原料是    
              (2)过程②的工具酶有        .过程②中,外源基因一定要插入到病毒DNA的LTR序列中的启动子后,其主要目的是    
              (3)过程③中,导入病毒蛋白编码基因(gag、pol和env)的目的是    
              (4)过程④中,逆转录病毒载体感染的细胞一般选择内细胞团细胞,因为这类细胞能    .此时,早期胚胎处于    期.
              (5)在胚胎移植前,需要对代孕母鼠进行     处理,才能使其生殖器官(子宫)适于早期胚胎的植入和正常发育. 研究中必须对嵌合小鼠进行筛选,只有能产生    的嵌合小鼠才能将获得的新性状遗传给子代.
            • 5. 以下是科学家采用不同方法培育种牛的过程,a-h为操作过程,请据图冋答有关问题:

              (1)图中c的操作名称是    ,d、f操作名称是    
              (2)图中用到的激素是    ,其目的是获得更多的卵母细胞,经受精后可得到早期胚胎.其受精后发育可得到早期胚胎;图中早期胚胎属于发育的    期,其中胚胎干细胞来源于    (填数字标号).
              (3)过程h常用的方法是    .采用    技术来检测转基因牛D的DNA上是否插入目的基因.
            • 6. 2015年2月3日,英国议会下院通过一项历史性法案,允许以医学手段培育“三亲婴儿”.三亲婴儿的培育过程可选用如下技术路线.

              据图回答下列问题:
              (1)由于女性的自然周期产生的卵子太少,捐献者在取卵前通常需要注射    激素,促使一次有更多的卵泡发育.
              (2)重组细胞需培养到MⅡ中期的原因是该时期的卵母细胞才具备    ,重组细胞体外培养所需的气体主要是O2和CO2,CO2的主要作用是    
              (3)从受精卵到三亲婴儿的培育还需要        等技术.
              (4)三亲婴儿的培育技术能避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代,    (填“能”或“不能”)避免母亲的红绿色盲基因传递给后代.
              (5)胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞,在    细胞上或在添加抑制因子的培养液中培养可以增殖而不发生分化.
              (6)设计试管婴儿技术与为解决不孕夫妇的生育问题而出现的试管婴儿技术主要区别是植入前对胚胎进行    
            • 7. 为了提高良种牛的繁殖速度,科学家采用了以下两种方法,如图所示.

              (1)试管牛和克隆牛的培育过程中均用到的工程技术有    .培育克隆牛F时使用的不同于试管牛E的生物技术是    
              (2)产生F牛的理论依据是    ,F牛的性别由    牛决定,其生殖方式属于    
              (3)要培育高产奶率的转基因牛,则目的基因的受体细胞一般是    
              (4)对受精卵发育成的囊胚采用    技术,可获得更多基因型完全相同的E牛.
            • 8. 目前,精子载体法逐渐成为最具诱惑力的制备转基因动物方法之一,该方法以精子作为外源基因的载体,使精子携带外源基因进入卵细胞受精.下图表示利用该方法制备转基因鼠的基本流程.请据图回答:

              (1)获取外源基因常用到的工具酶是    .为了提高实验成功率,通常利用    技术获得大量标记的外源基因.
              (2)过程②采用的是    技术,该过程中应对已经    进行获能处理.
              (3)过程③需要在    (至少写出两点)等条件下培养.
              (4)为了获得更多的早期胚胎,常用    激素对供体进行处理,促使其    .从而获得更多的卵母细胞.
            • 9. 如图为利用生物技术生产单克隆抗体和经体外受精培育优质奶牛的过程.请回答下列问题:

              (1)细胞A的形成过程中最常用的诱导因素是    
              (2)在I图制备单克隆抗体的过程中,包括    两个过程.经选择性培养的杂交瘤细胞,还需进行    ,经多次筛选就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞,进行体内或体外培养.
              (3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比,其最大的优越性是    
              (4)Ⅱ过程优质奶牛的培育过程需要进行体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植,体外受精前,需要对奶牛的精子进行    处理.受精时,往往一个卵母细胞只能和一个精子结合,受精过程中防止多精入卵的生理反应包括透明带反应和    反应.进行早期胚胎的体外培养和进行胚胎移植,胚胎培养液中除了含有各种有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外,还要添加    和动物血清.胚胎移植后的胚胎能在受体子宫中存活,其生理基础是    
              (5)一般情况下,良种奶牛所产生的能用于体外受精的卵母细胞往往数量不足,请举出一种可以获得更多卵母细胞的方法    .若要同时获得多头与此优质奶牛相同的小牛,可对Ⅱ中囊胚进行,操作过程需要特别注意的问题是    
            • 10. 慢性肝病、慢性肾病、肿瘤等慢性病人常出现白蛋白值偏低的状况,缺乏白蛋白的人就容易出现浮肿.人体的白蛋白正常值为在每100mL 血液中含有3.8~4.8g,如果比正常值低很多时就需要注射人血白蛋白,所以临床上对白蛋白需求量很大.图是利用崂山奶山羊乳腺生物反应器制备药用白蛋白的流程图:

              请回答:
              (1)要实现①超数排卵,应在崂山奶山羊A 发情期的某一阶段注射    ,然后在恰当时期采集卵子.通过②采集的精子,不能直接使成熟的卵子受精,要对精子进行     处理.
              (2)要使人的白蛋白基因在奶山羊乳腺细胞中特异性表达,完整的基因表达载体要包括复制原点、目的基因、启动子、终止子、     等部分.
              (3)过程④需将重组质粒用     技术注入受精卵的雄原核内;在显微镜下判断是否受精的标志是在卵细胞膜和透明带的间隙能观察到    
              (4)对移植前的胚胎进行性别鉴定时,宜取囊胚期的     细胞进行鉴定,一般采用SRY-PCR方法,选择出现阴性反应的     (填“雌性”或“雄性”)胚胎进行移植.
              (5)为了使胚胎移植能成功,需要对代孕奶山羊C 进行     处理,使之与供体的生理状况保
              持相同.
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