人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值。科研人员通过生物工程技术获得转HSA基因母牛，以便通过乳腺生物反应器生产HSA，其主要技术流程如下图所示。回答下列问题：

(1)如上图所示，将牛胎儿成纤维细胞核移入去核卵母细胞中，该技术称为_______________技术；供核的牛胎儿成纤维细胞通常选用传代10代以内的细胞，其原因是____________________________________________________。

(2)胚胎移植时，为使代孕母牛能处于适合的生理状态，需要用激素对其进行_______处理。

(3)SRY～PCR法性别鉴定的基本程序是：提取牛胎儿成纤维细胞的DNA，经PCR反应体系扩增SRY基因(Y染色体上特有的性别决定基因)片段，然后对扩增产物进行检测。

①PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP(包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP)、引物以外，还应含有______________；其中，dNTP的作用是___________________，引物应选用下图中的_________(填图中标号)。

②若扩增产物含大量SRY基因片段，则该种牛胎儿成纤维细胞________(选填“能”或“不能”)用作技术流程中转化过程的受体细胞。

(4)从细胞水平鉴定早期胚胎性别的方法是_______________。

    (一)要获得遗传特性单一的大肠杆菌菌种，一般必须对原有的大肠杆菌菌种进行扩大培养、并利用纯化技术得到单菌落的菌种。请回答下列有关大肠杆菌的培养和分离实验的相关问题：

    (1)对买回来的大肠杆菌菌种进行扩大培养，一般用LB培养基，在培养基中为微生物提供碳源、氮源和能源的物质主要是__________，为调节渗透压，要加入一定量的___________。为进行大肠杆菌的分离，还要加入琼脂配制成固体培养基，并进行倒平板的操作。

    (2)获得纯净微生物培养物的关键是_____________________，为此，必须对培养器皿、接种用具和培养基进行严格灭菌。培养器皿和培养基一般采用_____________________法灭菌，接种环采用灼烧法灭菌。同时在接种或倒平板操作时，除了在超净台上进行操作并对实验者的衣着、手和实验空间进行严格清洁和消毒外，还必须_________________________，以防止空气中的杂菌污染。

    (3)大肠杆菌菌种的扩大培养一般采用液体培养基，接种后将培养基置于37℃摇床振荡条件下培养12小时。菌种的分离时一般在固体培养基上采用____________法，并将培养皿_______________状态。

    (二)科学家将蜘蛛的蛛丝基因导入山羊体内，创造出转基因山羊，使羊奶中含有一种独特的蛛丝蛋白。生产原理如下图。请回答：

    (1)将蛛丝蛋白基因和质粒通过甲过程形成的X物质为_____________。如果选取的受体细胞为体细胞，当在培养过程中出现接触抑制现象时，需要进行____________培养。要使重组细胞具有发育的全能性，乙过程需要的技术操作是____________。

    (2)下列关于丙过程的叙述，正确的是______。

    A．该过程为动物细胞培养，目的是获得更多的重组细胞

    B．该过程所用培养液的成分往往是相同的

    C．该过程在无菌条件下进行，需要提供CO₂来调节pH

    D．通过现代生物技术可以将重组细胞在体外培养成山羊个体

    (3)为了快速繁殖转基因山羊，还可在丁过程前对早期胚胎进行____________，经培养后再分别移植到____________________的代孕母羊的相应部位。

有关现代生物科技技术，请回答下列问题。

（1）动物体内，精细胞经变形后，高尔基体发育形成精子的顶体，顶体内含有的__________能协助精子穿过卵母细胞的放射冠和透明带。经过______的精子才能与达到 ________期的卵子受精。受精时，先后有__________和 ___________两道屏障防止多精入卵。若在卵黄膜和透明带之间看到_____________，这是判断卵子是否受精的重要标准。_______________ 

（2）试管动物的培育主要包括________、早期胚胎培养和胚胎移植三个环节。胚胎移植时，为了给移入的外来胚胎提供相同的生理环境，需要对供、受体母牛进行_______处理。

（3）为了提高胚胎利用率，可以采用____________方法对早期胚胎进行切割，切割时，通常选择发育良好、形态正常的____________胚，特别注意将________均等分割，否则会影响分割后的胚胎恢复和进一步发育，选择______________细胞进行性别鉴定。

(4) 通常胚胎干细胞可以从_____________________________________(写出两种方法)中分离得到。

科学家利用转基因技术将人的高血压相关基因导入大鼠受精卵，培育遗传性高血压转基因模型大鼠，以研究遗传性高血压的致病机理及筛选有效的治疗药物。请回答：

(1)获得目的基因后，常利用_________技术在体外将其大量扩增。在构建基因表达载体的过程中，除了目的基因外，还必须有启动子、终止子、复制原点和__________。

(2)将人的高血压相关基因导入受精卵中的最有效方法是______________。

(3)在体外培养受精卵时，培养液中通常需加入________等一些天然成分，还需要提供CO₂以维持______________。

(4)胚胎移植前应保持供体和受体的_______相同，所以要对供、受体鼠进行________处理。

某课题组为解决本地奶牛产奶量低的问题，引进了具高产奶基因但对本地适应性差的 纯种公牛。

（1）拟进行如下杂交。

♂A（具高产奶基因的纯种）╳♀B（具适宜本地生长基因的纯种）→C

若C中的母牛表现为适宜本地生长，但产奶量并不提高，说明高产奶是______性状。为获得产奶量高且适宜本地生长的母牛，根据现有类型，最佳杂交组合是________，后代中出现这种母牛的概率是______（假设两对基因分别位于不同对常染色体上）。

（2）用以上最佳组合，按以下流程可加速获得优良个体。

①  动物细胞培养是动物细胞工程最基础的技术。在此技术中单细胞的获取通常需要用________进行处理，动物细胞在培养过程中培养箱所需的气体环境为___________。在培养过程中，应定期更换培养液，其目的是__________。

② 精子要具有受精能力，需对其进行_________处理；卵子的成熟在过程______（填图中序号）中完成。胚胎发育过程中胚胎从透明带中伸展出来的过程叫做__________。

③ 为了提高已有胚胎的利用率，可采取_________技术。④～⑤过程需要用到________技术，在畜牧生产中采用这种技术的优势是_______________。

[生物——选修3：现代生物科技专题]

请回答下列有关基因工程和胚胎工程的问题：

（1）在基因工程中，获取目的基因的方法包括：①从基因文库中获取目的基因，②利用________扩增目的基因，③________。

（2）在基因表达载体中，启动子是________识别并结合的部位。若采用原核生物作为基因表达载体的受体细胞，最常用的原核生物是________。

（3）将目的基因导入微生物常用________处理受体细胞，使之变成感受态细胞。我国科学家发明的将目的基因导入植物细胞的方法是________。

（4）研究还发现胚胎干细胞可以诱导分化为造血干细胞，这体现了胚胎干细胞具有________。临床上常用诱导干细胞定向分化的方法修补损伤或衰老的组织器官，从而解决了________问题。

[生物——选修3：现代生物科技专题]

研究发现，人体内的N基因是正常基因，无N基因的人会患严重肾病而早年夭折，科学家为治愈此病进行了相关探索。下图是对标记基因(绿色荧光蛋白基因，用GFP表示) 和N基因的酶切过程。请据图分析回答下列问题：

(1)切割基因时选用不同限制酶的目的是_______。切割完成后，需用DNA连接酶将两基因连接成GFP—N融合基因(以下称融合基因)，该融合基因的上游基因为______________。

(2)若用质粒做运载体，需用图中的______酶切割质粒。在构建的融合基因表达载体中，调控融合基因转录的结构为________。

(3)将融合基因表达载体包埋在由磷脂双分子层构成的脂质体内并转染ES细胞，融合基因表达载体进入ES细胞的方式为_______________。用激光激发ES细胞并用荧光显微镜观察，可确定细胞内有________现象的ES细胞转染了融合基因。

(4)ES细胞在功能上具有___________，当培养在________上时，细胞只分裂不分化。将整合了融合基因的ES细胞，在培养液中培养并加入相应的分化诱导因子后，ES细胞进行____________，最终形成正常的肾小球足突细胞，可用于该肾病的治疗。

下表是4组生物学实验培养基。请回答下列问题

（1）进行动物细胞培养应选用培养基            （填组别）。在进行细胞培养时，首先，将动物体内的一部分组织取出，经过机械消化或            消化，使其分散成单个的细胞。如果是培养胚胎干细胞，则首先需要在培养皿底部制备一层胚胎成纤维细胞，称为           ，这层细胞具有             特点。胚胎干细胞是一种未分化细胞，具有                性和                 核型。

（2）分离以尿素为氮源的细菌应选用培养基b。在含有              酶的细菌菌落周围会出现                 ，这是由于尿素被分解产生的                使PH升高，酚红指示剂产生颜色变化。变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力               。该实验用的分离方法是                     。

（3）用培养基a进行植物组织培养，则培养基还需要加入                    。

A.A        B.B                  C.C               D.D 

（1）免疫排斥主要是有______细胞引起的，临床上通常使用免疫抑制剂来抑制该细胞的增殖，从而提高器官移植的成功率。

（2）从新生儿脐带血分离出部分细胞保存，需要器官移植的时候进行自体移植，在这些细胞培养液中需加入___________因子，才能培育出需要的器官。但是这些细胞不同于ES细胞，因为ES细胞来源于早期胚胎或____    ____细胞，功能上具有发育的全能性。

（3）利用核移植技术获得器官：哺乳动物核移植分为__   ______核移植和体细胞核移植两种类型。