胚胎工程技术包含的内容很丰富，下图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，其中供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是黄牛，请据图回答下列问题：

(1)应用1中获得的小牛，其遗传物质来源于__________，细胞B的名称是___________。

(2)应用2中牛完成体内受精的场所是_________，此时卵子需要达到________期，才具备与精子受精的能力。

(3)获得更多基因型完全相同的牛，可采用图中的应用______（填数字）的培养技术。

(4)胚胎干细胞可以从细胞C__________或细胞D__________中分离出来。相同的胚胎干细胞，“克隆”的结果各种各样，如有的是神经细胞，有的是血细胞，有的是肌肉细胞，究其本质原因是____________的结果。

（1）若分离以尿素为氮源的细菌。在含有___酶的细菌菌落周围会出现，这是由于尿素被分解产生的氨气使PH升高，______指示剂产生颜色变化。采用______法将发酵菌株固定在锯末上制成固定化菌株，可大幅缩短生产周期,降低生产成本和提高生产效率。

(2)亚硝酸盐测定原理:亚硝酸盐可与________________发生重氮化反应.这一产物再与____________________偶联,形成__________色产物。

（3）获得目的基因，获取已知目的基因序列用化学方法合成或_________________

基因工程的核心:通常用_________________分别切割目的基因和载体DNA，然后用________将目的基因和载体DNA连接在一起,形成重组DNA分子。

（4）卵巢经超数排卵处理后，要使用__________________确定卵泡的位置。     

 科研人员单独培养胚胎干细胞，首先需要在培养皿底部制备一层______细胞，称为饲养层。 利用动物细胞培养技术中的细胞具有________________和__________________的特点可用烧伤患者自身的健康皮肤细胞培养出大量自身薄层皮肤细胞，用于移植。

（5）植物克隆和动物克隆共有的培养方法是_______

A.原生质体培养、传代培养     B.贴壁培养、传代培养 

C.器官培养、愈伤组织培养     D.悬浮培养、器官培

有关现代生物科技技术，请回答下列问题。

（1）动物体内，精细胞经变形后，高尔基体发育形成精子的顶体，顶体内含有的__________能协助精子穿过卵母细胞的放射冠和透明带。经过______的精子才能与达到 ________期的卵子受精。受精时，先后有__________和 ___________两道屏障防止多精入卵。若在卵黄膜和透明带之间看到_____________，这是判断卵子是否受精的重要标准。_______________ 

（2）试管动物的培育主要包括________、早期胚胎培养和胚胎移植三个环节。胚胎移植时，为了给移入的外来胚胎提供相同的生理环境，需要对供、受体母牛进行_______处理。

（3）为了提高胚胎利用率，可以采用____________方法对早期胚胎进行切割，切割时，通常选择发育良好、形态正常的____________胚，特别注意将________均等分割，否则会影响分割后的胚胎恢复和进一步发育，选择______________细胞进行性别鉴定。

(4) 通常胚胎干细胞可以从_____________________________________(写出两种方法)中分离得到。

（一）[生物——选修1：生物技术实践]

为了调查饮用水的水质状况，某实验小组测定了饮用水样中的大肠杆菌含量，并进行细菌分离等丁作。回答下列问题：

（1）检测饮用水中大肠杆菌的含量需将水样进行________，再以涂布器分别涂布到固体培养基表面培养、计数，这种方法是________。

（2）实验小组人员培养大肠杆菌时，使用的允许大肠杆菌生长同时抑制或阻止其他微生物生长的培养基称为________；实验小组人员为使实验结果更加准确，使用强烈的理化因素杀死用于培养微生物的器皿、接种用具等内外所有微生物（包括芽孢和孢子），该过程称为________。

（3）将1mL水样稀释100倍，在3个平板上分别加入0.1mL的稀释液；经适当培养后，3个平板的菌落数分别为62、64和66。据此可得出每升水样中的活菌数为________。通常运用该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是________。

（4）实验小组将得到的大肠杆菌接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现，振荡培养的大肠杆菌比静置培养的生长速度快，其可能原因是振荡培养能提高培养液中________的含量，同时可使大肠杆菌与培养液充分接触，提高________的利用率。

（二）[生物——选修3：现代生物科技专题]

下图是利用现代生物丁程技术治疗遗传性糖尿病（基因缺陷导致胰岛B细胞不能正常合成胰岛素）的过程设计图解。回答下列问题：

（1）图中①、②所示的结构分别是________、________。

（2）图中③、④所涉及的生物工程技术分别是________、________。

（3）过程③通常用去核卵细胞作受体细胞的原因除了它体积大、易操作，含有营养物质丰富外，还因其________。

（4）过程④通常采用的方法是________。

（5）过程④的完成需要用到的基因操作工具有________。

（6）图示方法与一般的异体移植相比最大的优点是________。

A[选修l：生物技术实践]

请回答下列问题：

(1)从土壤中筛选纤维素分解菌时，需要在培养基中加入的特殊染料是________。某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是___________________________________________________________。

(2)制作泡菜时，为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是___________。从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是______________。

(3)腐乳制作有多种微生物参与，其中起主要作用的是______ __。豆腐发酵主要利用了微生物产生的_____________，通过发酵，豆腐中营养物质的种类增多，且更易于消化和吸收。

(4)有人想提取橘皮精油获取利润，一般提取橘皮精油的方法是_______法，为了提高出油率，需将柑橘皮干燥去水，并用______浸泡，浸泡时间为10h以上，这样压榨时不会滑脱。

(5)某橘农发现自家有一株橘树具有抗虫性状，欲利用花药离体培养技术大量繁殖，则应选择花粉发育至_______期的花药培养成功率最高。

B[选修3：现代生物科技专题]

图示方案为人们获得生物新品种的过程，请回答下列问题：

方案I、抗冻蛋白基因烟草细胞→抗冻烟草

方案Ⅱ、A基因全免疫过的B细胞→体外培养→单克隆抗体

方案III、人的生长激素基因牛的受精卵→早期胚胎受体母牛→转基因牛

(1)基因工程的核心步骤是_________。农杆菌上转化法中，根据农杆菌的特点，如果将抗冻蛋白基因插入到_________上，通过农杆菌的转化作用，就可以使目的基因进入植物细胞，并将其插入到植物细胞中____________上。

(2)推测方案Ⅱ中A基因所起的作用是________，请写出该方案获得的细胞中遗传信息传递时所遵循的法则_____________。   

(3)方案III中的转基因牛可以通过分泌乳汁来生产人的生长激素。这需要将人的生长激素基因与________的启动子等调控组件重组在一起。该方案中的早期胚胎在移植入受体母牛子宫之前，必须对胚胎进行性别鉴定一般是取处于______时期的______细胞进行检测。

人的血清蛋白在临床上需求量很大，通常从血中提取。由于艾滋病等人类传染病造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品心存疑虑。生物技术的发展与应用使利用动物生产人的血清蛋白成为可能，如图是上海某研究所培育生产出血清蛋白奶牛的流程。根据下图回答：

（1）雌性奶牛胚胎细胞是（   ）

A．雌性奶牛产生的卵细胞

B．雌性奶牛体内的受精卵

C．能发育成雌性奶牛的受精卵

D．从奶牛胚胎上取出的细胞，这个奶牛胚胎将发育成雌性奶牛

（2）将人的血清蛋白基因导入奶牛胚胎受体细胞时，常用方法是                ；

（3）小牛1、2、3的性别是              性，性状              。

（4）人体血清蛋白基因的表达要经历              和              两个过程，该基因能够在小牛体内表达产生人的血清蛋白，说明生物共用一套            

（5）此操作流程涉及的现代生物技术有动物细胞培养、              、              等。

利用建立的诱导体系能够高效地诱导胚胎干细胞 。据此回答有关该研究工作的问题：

（1）实验用的胚胎干细胞通常取自小鼠的          或          ，取出的胚胎干细胞进行动物细胞培养，这个过程需要向培养液中加入诱导物。两周后，镜检发现培养的细胞呈胰岛样细胞的变化，这一过程称为             。随后，又进行了一系列实验，以检测该细胞是否具有胰岛B细胞的生理功能，依据下图回答相关问题:

（2）胰岛素释放实验：控制培养液中葡萄糖的浓度，一定时间内检测细胞分泌的胰岛素的量，图甲表示所得实验结果，据此分析干细胞诱导成功，得到此结论的依据是在糖浓度高时                     ，在糖浓度低时                       。

（3）体内移植实验：将细胞移植到患糖尿病的小鼠体内，测小鼠血糖，结果如图乙所示。体内移植实验是否支持胰岛素释放实验的结论？              。在细胞移植时，需用同一品系的小鼠进行移植，其目的是降低                                  。

下表是4组生物学实验培养基。请回答下列问题

（1）进行动物细胞培养应选用培养基      （填组别）。在进行细胞培养时，首先，将动物体内的一部分组织取出，经过机械消化或         消化，使其分散成单个的细胞。如果是培养胚胎干细胞，则首先需要在培养皿底部制备一层胚胎成纤维细胞，称为        ，这层细胞具有                    点胚胎干细胞是一种未分化细胞，具有         性和           核型。

（2）分离以尿素为氮源的细菌应选用培养基b。在含有       酶的细菌菌落周围会出现               ，这是由于尿素被分解产生的         使PH升高，酚红指示剂产生颜色变化。变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力          。该实验用的分离方法是             。

（3）用培养基a进行植物组织培养，则培养基还需要加入               。

（4）下表对应关系中，错误的是             

回答下列（一）、（二）小题：

(一）请回答与“固定化酶”实验有关的问题：

（1）—淀粉酶可以通过培养枯草杆菌来生产，         是筛选高表达量菌株的最简便方法之一。筛选出的菌株在发酵生产之前还需利用          培养基进行扩大培养。

(2)利用物理或化学的方法将—淀粉酶固定后，成为     且又有酶活性的制剂。若用吸附法固定时，在装柱后需要用     缓慢冲洗，直至流出液不使淀粉-碘混合液发生      为止。

(3)将淀粉溶液以一定流速从反应柱上端滴入，再在下端接取少量流出液进行KI-I₂颜色测试，结果不呈现红色。对此现象的解释错误的是        

  A.反应柱中没有—淀粉酶被固定      B.流速过快淀粉未被水解    

  C.接取的流出液是蒸馏水              D.流速过慢淀粉被水解成葡萄糖

(二）欲利用基因工程技术将人胰岛素基因转入到小鼠基因组中，以期利用小鼠生产出人胰岛素，请回答：

(1)若用逆转录的方法获得人胰岛素基因，则需要从人体相应的       细胞中提取mRNA，获得的人胰岛素基因经过相应处理后，再利用显微注射技术将其注入到受体细胞中，下列最不适合作为受体细胞的是        

 A.受精卵     B.胚胎干细胞     C.第一次卵裂形成的细胞    D.第三次卵裂形成的细胞

(2)为获得更多的受体细胞，可先对成年雌鼠注射激素进行         处理,将获得的卵母细胞培养成熟，与经        处理的精子结合形成受精卵后再进行后期操作。

(3)导入胰岛素基因的受体细胞还需借助        、        等技术才能成为转基因小鼠。