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          50条信息

            • 1. 某一质粒载体如图所示,外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因).有人将此质粒载体用BamHI酶切后,与用BamHI酶切获得的目的基因混合,加入DNA连接酶进行连接反应,用得到的混合物直接转化大肠杆菌,结果大肠杆菌有的未被转化,有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种,分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题:

              (1)限制性核酸内切酶作为基因工程的工具,其作用特点是 ______ 。
              (2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选,在上述四种大肠杆菌细胞中,未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的,其原因是 ______ ;并且 ______ 和 ______ 的细胞也是不能区分的,其原因是 ______ 。在上述筛选的基础上,若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落,还需使用含有 ______ 的固体培养基。
            • 2.

              转基因草莓中有能表达乙肝病毒表面抗原的基因,由此可获得用来预防乙肝的一种新型疫苗,其培育过程如图所示(①至④代表过程,A至C代表结构或细胞):

              (1)②过程常用________处理农杆菌,使之成为________细胞,利于完成转化过程。

              (2)图中③过程叫做________,④过程叫做________,将叶盘培养成草莓幼苗的技术是________,此技术是植物细胞工程的另一项技术:                 的基础。

              (3)在分子水平上,可采用______的方法来检测转基因草莓果实提取液中有无相应的抗原,之前的导入检测方法是:_______________技术。如果目的基因是植物的抗盐碱性基因,则需将植株种植在盐碱地中观察生长状况,这属于 ____________水平的检测。

              (4)从题中可以看出这种新型疫苗的化学本质是___________,在免疫学中属于________。

            • 3.

              人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值,只能从人血浆中制备。下图是以基因工程技术获取重组HSA(rHSA)的两条途径。

              (1)为获取HSA基因,首先需采集人的血液,提取mRNA合成_________,然后以此为模板,采用___________________扩增HSA基因。

              (2)启动子通常具有物种及组织特异性,构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体,需要选择的启动子是______________________。

              (3)利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中,需添加酚类物质,其目的是________________________________________________________________________。

              (4)人体合成的初始HSA多肽,需要经过膜系统加工形成正确的空间结构才能有活性。与途径Ⅱ相比,选择途径Ⅰ获取rHSA的优势是___________________________________。

              (5)为证明rHSA具有医用价值,须确认rHSA与________的生物学功能一致。

            • 4. 柯斯质粒是一种人工建构的含有λ噬菌体DNA的cos位点(指互补的黏性末端结合形成的双链DNA区域)和质粒复制子(ori)的新型载体,它同时兼具两者特性,长度一般为57 kb。λ噬菌体的末端酶能识别并切割两端由cos位点包围着的噬菌体基因组长度(3852 kb)的DNA片段,凡具有cos位点的任何DNA分子只要在长度上相当于噬菌体的基因组,就可以被识别并包装成类似噬菌体感染大肠杆菌。下图1为应用柯斯质粒进行某一真核基因克隆的方案图,下图2为不同的限制酶及相应切割位点。请据图分析回答:

              图1图2

              (1) 柯斯质粒可以作为基因工程载体的理由是具备____、________和启动子、终止子等。 

              (2) 如图1所示柯斯克隆方案,宜采用________酶对真核基因进行酶切,采用_______酶对柯斯质粒进行酶切,经连接后图中____(选填“a”或“b”)将会被重新包装进入λ噬菌体;柯斯质粒作为载体可携带的真核基因长度范围为_。 

              (3) 检测是否成功实现转化的实验思路是:将新包装的类似噬菌体去感染大肠杆菌,后者能够在含______的培养基上生长即为转化成功。 

              (4) 从图中信息可知上述柯斯克隆方案存在的缺点是________________________________。 

            • 5.

              PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术,它能以极少量的DNA为模板,在几小时内复制出上百万份的DNA拷贝。如图是PCR过程示意图,请回答下列问题。

              (1) PCR的中文全称是                    。在PCR过程中先用95℃高温处理的目的是                    ,而这一目的在细胞内是通过                    实现的。

              (2)引物是PCR过程中必须加入的物质,从化学本质上说,引物是一小段                    。若将1个DNA分子拷贝10次,则至少需要在缓冲液中加入                    个引物。

              (3)图中引物延伸需                    作为原料。DNA的合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸,这是由于                    

              (4)试列举PCR技术在现实生活中的应用。

            • 6. 下图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病的过程图解。请据图回答:
               
              (1)②所示的生物技术名称是____________ ,该项技术的供体细胞一般都选用____________代以内的细胞,这是因为____________ 。重组细胞A培养过程中所用培养液除一些无机盐和有机盐类外,还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等成分以及____________ 等物质,并且用一定的方法激活其完成细胞分裂和发育进程。该过程通常用去核的卵母细胞作为受体细胞的原因除了它体积大、易操作、营养物质丰富外,还因为它含有____________ 的物质。
              (2)④所示的生物技术名称是____________ ,若想得到大量健康的胰岛B细胞基因,可利用__________ 技术,该技术利用的工具酶是____________。
              (3)图示方法与一般的异体移植相比最大的优点是____________ 。该种基因治疗所属类型为____________ 。
            • 7.

              为培育出含β-胡萝卜素的“黄金大米”,科研人员提出以下两套培育方案。请分析回答下列问题:

              (1)甲方案中,β-胡萝卜素基因能在玉米和水稻体内出现相同表达结果的原因是_________。构建重组质粒时,常用Ti质粒作为载体,是因为Ti质粒上具有___________,它能把目的基因整合到水稻体细胞的________上。

              (2)乙方案中,在体细胞杂交前需要用纤维素酶和果胶酶除去细胞壁获得原生质体,诱导其融合的化学试剂常用______________。通过⑤获得“黄金大米”幼苗需要经过_______________两个过程,在培养过程中,除了在培养基中添加营养物质外还需要添加_______________。

              (3)与传统育种方法相比,甲、乙两套方案共同的优点是_________________________。

            • 8.

              下图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病(基因缺陷导致胰岛B 细胞不能正常合成胰岛素)的过程设计图解,请据图回答:


              (1)图中①、③所示的结构分别是______________ 、 内细胞团(或胚胎干细胞) 。

              (2)图中②所示的生物工程技术分别是_____________。

              (3)过程④的完成需要用到的基因操作工具有 __________________________。

              (4)图示方法与一般的异体移植相比最大的优点是_______________________。

            • 9.

              下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图,请根据图回答。

              (1)能否利用人的皮肤细胞来完成Ⅰ过程?        。为什么?                 

              (2)若图中B物质共有a个碱基对,其中鸟嘌呤有b个,则Ⅳ、Ⅴ过程连续进行4次,至少需要提供胸腺嘧啶               个。

              (3)B与C经切割产生相同的              ,再加入适量的              ,才可形成D。

              (4)为使过程Ⅷ更易进行,可用                         (药剂)处理E。

            • 10.

              禽流感病毒H7N9是一种RNA病毒, 下图是利用现代生物技术制备H7N9病毒单克隆抗体的流程,请据图回答问题。

              (1)①过程表示_____________,③过程用到的工具酶是______________。

              (2)构建基因表达载体时,目的基因的首端必须含有_____________,它的作用是与_____________结合,从分子水平上鉴定目的基因是否转录可采用____________技术。

              下面是蛋白质工程的基本途径,试回答下列有关问题:

              (3)图中③过程的主要依据是每种氨基酸都有其对应的            。通过③过程获得的脱氧核苷酸序列不是完整的基因,要使这一序列能够表达、发挥作用,还必须在序列上、下游加上启动子和                  

              (4)植物体细胞杂交技术,利用的主要原理有                                ,化学法一般是用          作为诱导剂来诱导细胞融合。组织培养时,细胞先经过       过程,才能再分化成各种组织。

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