（一）下列问题是有关大肠杆菌的培养实验，请回答：

(1)配制培养大肠杆菌的培养基时，根据“细菌喜荤，霉菌喜素”的规律，通常在培养基中加入蛋白胨和__________作为营养物质，为维持一定的渗透压，常需加入一定量的_______。

(2)大肠杆菌培养和分离的实验中，在____________中进行扩大培养，培养液经________后，在LB固体培养基上进行_______，并将培养皿_______放在恒温培养箱中培养，可以获得如图效果。为了检测接种、培养过程是否受杂菌污染以及________________，应同时将未接种的培养基放入恒温培养箱培养。

（二）现代人吃什么都讲究天然，所以目前市场上果汁饮料、果酒、果醋越来越受到人们的青睐。请回答：

(1)果汁中的果胶不仅影响______率，还使果汁浑浊，制备时常加入来自________等微生物的果胶酶。为便于工业化使用，常对酶采用___________技术，常用方法有吸附法、包埋法等。

(2)苹果醋是最受欢迎的饮料之一，其②生产过程中利用了__________的发酵作用，①过程需将温度控制在__________。

(3)若要提高果醋的产量，发酵过程中关键要提供___________、_________等条件。

下图表示微生物接种、分离实验中的一些步骤，请回答：

(1)实验步骤A称为_________。进行步骤A之前，要对培养基进行灭菌，常采用的方法是_________________。

(2)实验步骤B的目的是_____________，步骤C在沾取菌液前应将接种环_______________。

(3)上图所示接种微生物的方法是_______,操作过程中,在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线,这样做的目的是________________________。

（1）按细胞结构分类，金黄色葡萄球菌属于______生物，从培养过程分析，金黄色葡萄球菌可进行_______呼吸。

（2）7.5％NaCl肉汤培养基可为微生物提供的营养成分包括________________，用7.5％NaCl肉汤培养基进行选择培养的主要目的是______________________。

（3）操作中在血平板上的接种方法是____________，接种操作前后需要对接种工具进行___________灭菌。

（4）在制备血平板时需将pH调节至________（“微酸性”或“微碱性”）后灭菌，待培养基冷却后，再加入适量血液。经多次规范操作、重复实验，血平板上均出现_____________________的菌落，初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌，但鲜牛奶供应商仍认为此菌并非鲜牛奶所携带，因此要对本操作进行完善，完善的方案是_______________________________。

土壤中含有大量的难溶性磷酸盐，为了从土壤中筛选出能够将难溶性磷酸盐转化为植物能吸收的可溶性磷的优良解磷菌株，以便将其添加到有机肥中，改善植物磷元素供应。科研人员进行如下实验：

                               图1                                                               图2

实验原理：固体培养基中难溶性磷酸盐在微生物的作用下溶解，会在菌落周围形成透明圈(如图)，透明圈直径(D)与菌落直径(d)的比值(D/d)代表微生物溶解磷的能力大小。实验步骤：

    步骤1　取某地区土样5 g制得土壤溶液后稀释，取稀释液1 mL接种到基础培养基A上，在适宜温度下培养72 h。                  

    步骤2　在基础培养基A上用接种环挑取代表性菌落再次接种，培养3～4 d后观察菌落特征和透明圈的大小。

(1)从物理形态看，培养基A属于________培养基。培养基中磷源应该是_____________。

(2)步骤1中接种方法是________，步骤2中接种环的灭菌方法是________。

(3)根据实验结果可以确定溶解磷能力最强的菌株是________。

(4)为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力，研究人员将它们接种到基础培养基B中，并在37 ℃、200 r·min－1摇床培养，定期取上清液，测定溶液中可溶性磷含量，得到图2所示曲线。

①用摇床进行培养的好处是____________________、___________________。

②结果表明最优良的解磷菌株是________________________________________。

人和哺乳动物的尿中含有尿素，大量尿素的存在会对环境造成污染．土壤中有些细菌含有脲酶，可通过降解尿素作为其生长的氮源。现对土壤中的这类细菌进行分离实验，请回答下列问题：

（1）分离培养细菌时必须进行无菌操作，包括培养基和各种器皿都必须是无菌的，常用的灭菌方法有 ____________、_____________ 和灼烧灭菌。

（2）将样液进行一系列的梯度稀释，然后接种培养．在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在__________附近进行操作．接种后的培养皿倒置于37℃的恒温培养箱中培养。

（3）用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌，从功能上划分该培养基属于_______培养基．若培养基中存在有分解尿素的细菌，其菌落周围会出现红色环带，这是由于尿素被分解产生的______使pH升高，酚红指示剂产生的颜色变化，从而证明这一菌株可以尿素为氮源．变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力_______。

（4）实验室筛选微生物通常须人为提供有利于目的菌生长的________、________、pH等条件，抑制或阻止其他微生物的生长，能达到此目的的培养基称为________。

（5）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶．其中的葡萄糖苷酶可将__________分解成____________。

（6）在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时，CR可与纤维素形成___________色复合物．用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的___________。

土壤中的纤维素分解菌能合成纤维素酶，从土壤中分离纤维素分解菌的实验流程如下

(1)纤维素酶包括_____________________。

(2)题干中第二个步骤是______________，目的是_______________。该步骤要使用液体培养基进行振荡培养, 振荡培养的作用是            （答出1点）

(3)第三步骤梯度稀释后，用________________（接种工具）将菌种接种到培养基的表面。

(4)将适量的_________染料滴加在平板中的菌落周围，如果菌落周围出现__________则说明此种菌能够分解纤维素，从平板中挑取实验效果明显的目的菌株。

(5)如果我们要长期保存纤维素分解菌，可以采用____________方法保存。

幽门螺杆菌感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下，请回答：

（1）幽门螺杆菌能够以尿素为唯一氮源，是因为能够合成______________________，培养基中加入酚红指示剂，若有幽门螺杆菌，则菌落周围会出现___________环带。

（2）上述培养过程中，能够“浓缩”幽门螺杆菌的步骤是_____________________。

（3）采用稀释涂布平板法，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌，其原因是_____________________________________________。

（4）上述实验统计结果往往比原患者样品中含有的幽门螺杆菌活菌数_______________（偏大、偏小、相同）。

回答下列(一)、(二)小题：

    (一)牛奶是微生物生长的良好培养基。生鲜牛奶中的微生物情况反映了奶牛的健康状况，也影响奶制品的运输和贮藏；牛奶在饮用前都要经过巴氏消毒，以杀死有害微生物。

    (1)为检测消毒前后牛奶中细菌含量变化情况，做如图操作。用无菌吸管从三角烧瓶中吸取1 mL生牛奶稀释液至盛有9 mL无菌水的试管中，如此重复3次，将10 mL生牛奶稀释到10^－4浓度后，取0.1 mL滴在培养基上。

    ①将牛奶稀释液滴加在培养基上进行涂布，应选择的涂布工具是_______________。

    ②该涂布工具最合适的灭菌方法是_______________________。

    (2)图中所示方法为稀释培养法，按此方法培养得到的3个培养皿中菌落数分别为25个、23个、24个，则生牛奶中每毫升含细菌数为______个。

    (3)消毒后牛奶中绝大部分细菌被杀死，若用稀释平板法检测消毒后牛奶是否含有细菌，则在操作步骤上应作什么改动?______________________。

    (4)涂布结束后将培养皿______，在37℃______________中培养。

    (5)细菌种群进化过程中，起主要作用的变异是______。

    A．环境条件    B．基因重组    C．基因突变    D．染色体变异

    (二)兔肝细胞中的基因E编码代谢甲醛的酶，拟利用基因工程技术将基因E转移入矮牵牛中，以提高矮牵牛对甲醛的代谢能力，请回答：

    (1)从兔肝细胞中提取mRNA，在_________酶的作用下形成互补DNA。然后以此DNA为模板在体外利用____________反应大量扩增，得到基因E。在相关酶的作用下，将基因E与Ti质粒连接在一起，形成___________，再导入用氯化钙处理的_______________，侵染矮牵牛叶片。将被侵染的叶片除菌后进行培养，最终得到转基因矮牵牛。其中培养过程正确的是________________(A．叶片在含合适浓度生长素的培养基上分化形成愈伤组织  B．愈伤组织在含细胞分裂素和生长素配比较高的培养基上形成芽  C．再生的芽在细胞分裂素含量高的培养基上生根  D．愈伤组织在含合适浓度植物生长调节剂的培养基上脱分化形成再生植株)。

    (2)取转基因矮牵牛叶片，放入含MS液体培养基和适量浓度甲醛且密封的试管中，将试管置于__________上，进行液体悬浮培养。一段时间后测定培养基中甲醛的含量，以判断基因E是否在转基因矮牵牛中正常表达。培养过程中液体培养基的作用：一是提供营养；二是__________，从而使叶片保持正常形态。

回答下列(一)、(二)小题。

(一)请回答下列有关微生物培养、发酵过程中的相关问题。

(1)在“分离以尿素为氮源的微生物”的实验中，配制好的尿素固体培养基加上封口膜后用高压蒸汽灭菌方法灭菌，冷却后加入用_________漏斗过滤的尿素溶液。漏斗用后需用适宜浓度的___浸泡，再用蒸馏水冲洗，干燥后保存。 

(2)在“果汁中的果胶和果胶酶”实验中，可以用___(A.50%乙醇　B.70%乙醇　C.90%乙醇　D.95%乙醇)鉴别果胶。果胶酶可以从黑曲霉或______中提取，配制这些微生物的培养基时需要将pH调至____。

(3)果酒制作果醋过程中，通入空气需要经过_____过滤。果醋发酵结束的标志是pH_____。 

(二)下图表示动物细胞克隆和制备单克隆抗体的相关过程，请回答相关问题：

(1)过程①常应用____方法导入重组诱导基因后得到干细胞；部分干细胞经过诱导可分化成全身的不同组织或器官，说明这些细胞具有____性。在动物细胞培养过程中培养液中必须通入O₂和CO₂，通入CO₂的目的是__________。

(2)该过程中甲和乙细胞可经过生物诱导剂______的作用形成丙细胞。取一个丙细胞，放在含大量失去____的小鼠成纤维细胞的特定培养体系中培养，最后产生大量的细胞群，这种方法为____法。 

(3)下列关于经③和④过程得到单克隆抗体的叙述，错误的是_____。

A.该过程应用了细胞膜具有流动性的原理    B.该过程应用了动物细胞融合和动物细胞培养技术

C.丙细胞要具有分泌多种抗体的能力   D.丙细胞的形成先通过筛选得到杂交瘤细胞，再进行抗体检验

牛奶富含蛋白质长期饮用有助于增强体质，但牛奶同时也是多种疾病的传播载体。国家标准是每毫升牛奶中细菌数小于30000个。以下是牛奶消毒及细菌检测实验。

（1）图中步骤①称为_______消毒法。步骤②是_______________。

（2）培养基中的蛋白胨可以为微生物提供_________________。进行步骤③操作时，应选用下列中的哪种工具？______。为了避免杂菌污染，此步骤应在____________附近进行。