在微生物连续培养时，一部分旧的液体培养基以一定的速度流出，同时不断有等量的新鲜液体培养基流入以保证微生物对营养物质的需求。研究人员将大肠杆菌JA122菌株接种到葡萄糖含量受到限制的液体培养基中，连续培养多代，然后取样分析其中存在的新菌株。请回答下列问题：

    （1）液体培养基中除了把葡萄糖作为____________外，还应该含有________________________。

    （2）样品中还发现了CV101、CV103新品种，对其菌株的代谢差异进行分析发现，CV103对葡萄糖吸收率最高，代谢终产物是醋酸盐。进一步研究表明，CV101可以在过滤的培养过CV103的培养基中生长，据此作出的推测是：_______________。请设计并完成下列实验，来验证你的观点。

    ①配制______________________的固体培养基（A组）和不含碳源的固体培养基（B组）；

    ②将等量且适量稀释的CV101菌液分别接种到A、B培养基中培养一段时间，并观察记录菌株的生长情况。实验过程应在____________条件下进行。

    ③预期实验结果：___________________________________________________________。

    （1）配制的细菌培养基除了含有水、碳源、氮源和无机盐等主要营养成分外，还应加入适量的____________和琼脂。在培养基各成分溶化与灭菌之间，要进行的操作是__________。

    （2）接种微生物的方法有很多，图1中过程①②③所示的方法为___________________。用该方法统计样本菌落数后，所得数据需要乘10ⁿ后，才可表示乳酸菌的数量（单位：个/mL），这里的n＝________________。用该方法统计样本菌落数时，同时需要做A、B、C三个培养皿，原因是_______________________。

    （3）为了检测乳酸菌对抗生素的敏感性，取该单菌落适当稀释，接种于固体培养基表面，在37℃培养箱中培养24 h，使其均匀生长，布满平板。将分别含有A、B、C三种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含抗生素A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A___________（填“敏感”或“不敏感”）；含抗生素C滤纸片周围的透明圈比含抗生素A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是____________。

幽门螺杆菌感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下，请回答：

    （1）幽门螺杆菌能够以尿素为唯一氮源，是因为含有_______，培养基中加入酚红指示剂，若有幽门螺杆菌，则菌落周围会出现_________环带。

    （2）上述培养过程中，能够“浓缩”幽门螺杆菌的步骤是____________________。

    （3）采用稀释涂布平板法，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌，其原因是__________________________________________。

    （4）上述实验结果统计的菌落数，_________（填“是”或“不是”）原患者样品中含有的幽门螺杆菌活菌数。

为研究“某品牌酸奶中乳酸菌数量及其对抗生素耐药性情况”某同学进行了如下实验:

请分析回答下列问题：

(1)配制的乳酸菌培养基除了含有水、碳源、氮源和无机盐等主要营养成分外，还应加人适量的_______和琼脂。在培养基各成分溶化与灭菌之间，要进行的操作是_________。

(2)接种微生物的方法有很多，图中过程①②③所示的方法为__________。用该方法统计样本菌落数时，同时需要做A、B、C三个培养皿，原因是__________。用该方法统计样本菌落数后，所得数据需要乘以10ⁿ后，才可表示乳酸菌的数量（单位：个/ml)，据图分析，这里的n=___________。

(3)请完善“检测乳酸菌对青霉素、四环素耐药性”的实验操作步骤：

步骤1:分别取等量且适量的_______________________分别加入三组无菌培养皿中，再加入灭菌并冷却到 _________℃左右的培养基，立即混匀，静置凝固成平板。

步骤2:向三组培养基中分别接种待检测的乳酸菌菌种。

步骤3:将接种后的三组培养基和一个__________________都倒置于适宜温度的恒温箱中培养一定时间，观察比较培养基中菌落生长情况。

(3)该实验小组对乳酸菌接种所采用的方法是___________________。根据酸奶样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的__________；根据三个平板中菌落数，可推测原酸奶中乳酸菌的浓度为_________个／mL，该方法测定的乳酸菌的含量和实际值相比，一般________(填“偏大”或“偏小”)。

(4)为了使测量结果更加准确，该实验对照组的设置是______________________________。

科研人员发现，工业污水中有一种极难降解的含氮有机物NS（无色的NS与碘作用可形成蓝色反应），但可被NS分解菌高效降解。请分析回答下列问题：

（1）在筛选NS分解菌的过程中，以NS为唯一氮源的培养基按用途属于_________培养基，NS可为NS分解菌提供生长所需的______________等营养物质。若要对NS分解菌加以纯化并计数，可采用______________法接种。

（2）NS分解菌培养过程中，获得纯净培养物的关键是___________________；为排除杂菌污染，应设置的对照实验是___________________。 

（3）欲鉴定筛选得到的NS分解菌是否具有实用价值，在培养NS分解菌的培养基中除了加入必需的营养物质外，还需要加入______用于颜色反应鉴定NS分解菌。若用上述培养

基比较不同菌株降解NS能力的大小，可用相同NS浓度的上述培养基培养不同菌株，一定时间后，通过测定____________________来确定不同菌株降解NS能力的大小。

某兴趣小组对某蓄水池进行细菌数目测定，以了解池水是否符合饮用水卫生标准。回答下列问题：

（1）用无菌三角瓶取水样前，水龙头需使用酒精棉擦拭消毒后，再通过_________灭菌。取水前进行无菌操作的目的是______________。

（2）该小组通过滤膜法测定细菌总数，将10mL的水样进行过滤后，将滤膜放在牛肉膏蛋白胨培养基上培养，培养时应将平板倒置，其原因是__________（填2点原因）。所用培养基中的牛肉膏除为微生物提供碳源和氮源外，还能提供磷酸盐和__________。在培养过程中，不同时段观察到的平板上菌落特征的差异有__________（至少写出两点）。

​（3）该小组若想检测水样中大肠杆菌的数目，可将滤膜放在__________培养基上培养一段时间，然后计算培养基上__________（颜色）菌落的数目。

农业生产上有一种广泛使用的除草剂在土壤中不易被降解,长期使用会污染土壤。为修复被污染的土壤,可按图示程序选育出能降解该除草剂的细菌。已知该除草剂(含氮有机物)在水中溶解度低,含一定量该除草剂的培养基不透明。请回答下列问题:

(2) 在选育过程中,应将出壤浸出液接种于以____为唯一氮源的固体培养基上。为了筛选出高效的目的菌,可比较单菌落周围透明圈的大小。实验结果如图显示的A~E五种菌株中,____是最理想菌株。 

(3) 若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数,可采用的接种方法是___________。对分离的细菌数目统计时,统计的菌落数目往往比活菌的实际数目____。 

(4) 操作过程中有三种材料或用具需要消毒或灭菌:①培养细菌用的培养基与培养皿;②操作者的双手;③玻璃棒、试管、烧瓶和吸管。其中需要灭菌的是____(填序号)。 

从自然界微生物中筛选某菌种的一般步骤是:采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。

(1)不同微生物的生存环境不同,获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样,然后再按一定的方法分离、纯化。如培养噬盐菌的菌样应从___________环境中采集。

(2)富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件,使其群落中的数量大大增加,从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择___________的培养基,并在___________条件下培养。 

(3)接种前要对培养基进行相应的灭菌处理。在整个微生物的分离和培养中,一定要注意在_____________条件下进行。 

(4)如图是微生物纯化培养的两种接种方法接种后培养的效果图,请分析接种的具体方法。获得图A效果与图B效果的接种方法分别是_______。某同学在纯化土壤中的细菌时,发现培养基上的菌落连成一片,最可能的原因是___________。应当怎样操作才可避免此种现象?__________________。 

(5)如果探究温度对纤维素酶活性的影响,自变量是_______,应该保持____________等不变(至少答两项)。 

回答下列有关微生物培养的相关问题：

Ⅰ．已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可以用于生物柴油的生产。回答下列问题：

（1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用____________染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可用____________（填"萃取法"或"水蒸气蒸馏法"）从菌体中提取。

（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以_______为碳源的______（物理状态）培养基进行培养。培养的结果发现没有得到微生物B的菌落或者数量极少，可在此操作之前增加____________这一操作步骤。

（3）若要测定微生物B的菌体数，可在显微镜下用____________直接计数，若要测定活菌数量，可选用____________法进行计数。

Ⅱ．某医院有一个罕见的细菌感染患者，医生想通过抑菌实验，从常用的抗生素一青霉素（A），氨苄青霉素（B），庆大霉素（C），氯霉素（D），环丙沙星（E）中寻找对病人最有效的一种．部分实验步骤如下：

第一步：按下方所列配方配置培养基：

第二步：取单菌落适当稀释，用3支无菌滴管吸取从此病人体内分离到的细菌悬浮液2滴，滴于3个平板培养基表面，然后分别用3个无菌涂布棒涂匀，37℃恒温箱中培养，使细菌长满平板表面。

（4）上述培养基配方中作为蛋白胨为微生物的生长提供了____________________。

（5）如图圆环表示一个培养皿平面，用浸有不同抗生素的圆纸片间隔放到培养基土，如下图所示。

培养2d后，A滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对青霉素____________；B滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对氨苄青霉素____________；C滤纸片周围的透明圈比A滤纸片周围的透明圈小，说明____________；D滤纸片周围的透明圈比A滤纸片的也小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是氯霉素的____________。

（6）经测量透明圈大小，得到如下结果（单位mm）：

那么，你建议医生使用哪一种抗生素？____________．