为了调查某城市自来水的水质情况，某研究小组对自来水水样中的大肠杆菌进行了分离和含量测定，请回答下列问题：

（1）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌，操作时，每次划线之前都要对接种环进行灭菌目的是_____________。在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，这样做的目的是____________________。

（2）在接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，结果发现空白对照组的平板上出现了5个菌落，请分析说明可能的原因（写出两点）：①________；②_______。

（3）检测自来水中大肠杆菌的数量，可采用稀释涂布平板法，选用__________鉴别培养基。该研究小组在统计菌落数目时，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止因___________而遗漏菌落的数目。

（4）稀释涂布平板法测定细菌数量，实际活菌数量要比测得的数量______，因为________。

某些土壤细菌可将尿素分解成CO₂和NH₃，供植物吸收和利用。回答下列问题：

（1）有些细菌能分解尿素，有些细菌则不能，原因是前者能产生________。能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO₂作为碳源，原因是________，但可用葡萄糖作为碳源，进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是_______________________。

（2）为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时，应选择____________________（填“尿素”“NH₄NO₃”或“尿素+NH₄NO₃”）作为氮源，不选择其他两组的原因是________________________。

（3）用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH₂PO₄和Na₂ HPO₄，其中KH₂PO₄和Na₂HPO₄即可构成缓冲液，维持培养基的_________相对稳定；又能为微生物生长提供______________。

（4）筛选出的能分解尿素的细菌可用含有____________指示剂的培养基鉴定，从功能上划分该培养基属于______培养基。这是由于尿素被分解产生的 ______使pH升高，指示剂将____________，且变色区域越大，表明该菌株分解利用尿素的能力 _______。

关于传统发酵技术在生产生活中的广泛的应用，请回答下列问题：

（1）苹果醋是以苹果汁为原料经发酵而成的。酵母菌的呼吸代谢途径如下图所示。

①图中过程①和②是苹果醋生产的第一阶段，在酵母菌细胞的_______中进行，其产物乙醇与________反应呈现灰绿色，这一反应可用于乙醇的检验；过程③在酵母菌细胞的_________中进行。与无氧条件相比，在有氧条件下，酵母菌的增殖速度________。

②第二阶段是在醋酸杆菌的作用下将第一阶段产生的乙醇转变为醋酸的过程，根据醋酸杆菌的呼吸作用类型，该过程需要在_________条件下才能完成。

（2）豆豉是大豆经过发酵制成的一种食品。为了研究影响豆豉发酵效果的因素，某小组将等量的甲、乙两菌种分别接入等量的A、B两桶煮熟大豆中并混匀，再将两者置于适宜条件下进行发酵，并在32 h内定期取样观测发酵效果。回答下列问题：
①该实验的自变量是_________________、____________________。
②若发酵容器内上层大豆的发酵效果比底层的好，说明该发酵菌的代谢类型是_____。
③如果在实验后，发现32 h内的发酵效果越来越好，且随发酵时间呈直线上升关系，则无法确定发酵的最佳时间；若要确定最佳发酵时间，还需要做的事情是___________。

④从大豆到豆豉，大豆中的成分会发生一定的变化，其中，蛋白质转变为___________，脂肪转变为_____________。

（3）回答下列有关泡菜制作的问题：

①制作泡菜时，所用盐水需煮沸，其主要目的是____________。

②泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有食盐用量、________和________等。

③从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是______________。

研究人员分别成功地从土壤中筛选到分解纤维素和尿素的微生物，请就从土壤中获得该两种分解菌的过程，回答以下问题。

(1)对于筛选土壤细菌所用的培养基，常用的灭菌方法是__________。

(1)纤维素酶是纤维素分解菌中的一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C₁酶、C_X酶和______酶。细菌可以分解尿素是因为其细胞中能产生__________酶。

(2)纤维素分解菌分离过程中，完成土壤取样和选择培养后，需经__________，再将样品涂布到用以__________纤维素解菌的培养基上。涂布所用涂布器使用前要进行灼烧以达到__________(消毒/灭菌)的目的。

(3)为了进一步鉴定尿素分解菌，可在以尿素为唯一__________的培养基中加入__________指示剂，如果指示剂变红，就可以准确鉴定。

泡菜是很多人喜爱的美食，泡菜的制作过程离不开乳酸菌。请回答以下相关问题。

(1)制作泡菜时可用陈年泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。首先用________对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是________。制作泡菜时常用比色法对亚硝酸盐含量进行测定，因为亚硝酸盐与对氨基苯磺酸的反应产物能与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成________色化合物。

(2)分离纯化所用的固体培养基中往往加入碳酸钙，推测其作用有___________和中和产生的乳酸(或酸)。分离纯化时应挑选出________的菌落作为候选菌。

(3) 要测定泡菜液中乳酸菌的数量，可以用抽样检测法或________法，用后一种方法接种培养后可得到下图中_______（A / B）所示的结果。

为了得到普洱茶中产蛋白酶的微生物，研究人员进行了一系列筛选、检测。

（1）研究人员称取普洱茶1g，加入_____________________，制备稀释10²倍的茶叶水。再将茶叶水进行梯度稀释，获得10³、10⁴、10⁵倍的稀释茶叶水。取100μL稀释茶叶水，用_______________________法接种到奶粉培养基，37℃条件下培养4—5天，在培养基中选择菌落周围的__________________较大的菌株作为目的菌株。

（2）将获得的多个目的菌株接种于液体茶汤培养基中培养。已知氨基酸都能够和茚三酮反应生成蓝紫色物质，因此可以利用分光光度计测定茶汤中游离氨基酸的量。先用__________________________绘制标准曲线，再分别测定培养每个菌株的液体茶汤培养基的吸光值，与标准曲线比较，计算出该茶汤中游离氨基酸的量，氨基酸含量高的，即为____________________的菌株。该实验中应测定_________________的液体茶汤培养基的游离氨基酸含量，作为对照组的数据。