人们希望能借助纤维素酶将地球上最丰富、最廉价的可再生资源纤维素转化为能直接利用的能源和资源。纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取．某同学设计了如下分离土壤中纤维素分解菌的实验流程：土壤取样→选择培养→（      ）→鉴别培养。

（1）请补充题干“（　）”中的实验流程：　　　　　　　　　　；找不到合适的取样环境，可采取的办法是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。

 （2）选择培养的目的是　　　　　　　　　　　　；研究人员用纤维素、硝酸盐、磷酸盐以及微量元素配制的培养基进行培养，其中加入的纤维素为微生物的生长提供　　　　　。

 （3）为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以培养基上加入刚果红染液，将筛选获得的菌液稀释后用　　　　　　　法接种到鉴别培养基上，然后挑选产生　　　　　　　　的菌落作为菌种进行扩大培养。

（４）扩大培养过程中需要对微生物进行计数。取0.2mL样品，用固体培养基对其培养，最后统计三个平板，菌落数分别是180、200、160。则样品中微生物的数量为　　　　　个/mL。该统计结果　　　　　 (低于、高于)实际值。

[生物——选修1生物技术实践]

   研究人员成功地从土壤中筛选到能产生纤维素酶的微生物。

（1）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C₁酶、Cx酶和________酶。

（2）如果要对土壤中的纤维素分解菌进行计数，常采用________法进行接种培养，接种工具采用________灭菌的方法。

（3）常用的刚果红染色法有两种：第一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应；第二种是在________时就加入刚果红。________（选答“第一种”或“第二种”）方法会使菌落之间发生混杂。

（4）如果观察到产生________的菌落，说明可能获得了纤维素分解菌。为了确定是纤维素分解菌，还需要进行________的实验。纤维素酶的测定方法一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的________进行定量的测定。

【生物—选修生物技术实践】

纤维素是自然界中分布最广、蕴藏最多的一种天然可再生聚合体。自然界纤维素年产量超过10¹¹ t，按能量换算约等于7×10¹¹ t石油，而且纤维素无污染可再生。纤维素酶对纤维素的开发利用具有特别重要的意义，已成为国内外研究的热点。白蚁是自然界中纤维素的主要降解者，年均消耗纤维素约7×10⁸ t。白蚁消化道特别是中、后肠共生的微生物包括原生动物、细菌和真菌能分泌纤维素酶，是白蚁能降解纤维素的主要原因。下图是某生物兴趣小组从白蚁肠道分离能降解纤维素的细菌的流程图，请回答相关问题。

（1）培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、              。本实验用以纤维素为唯一碳源的选择培养基进行选择培养的目的是                ；制备培养基过程中，各成分按一定比例配制好后将PH调至              ，然后采用        灭菌法灭菌15-30min，冷却备用。灭菌是指使用              ，包括芽孢和孢子。

（2）取适量后肠样液涂布到加入            染料的含有纤维素的培养基上，等培养基上长出菌落后，选择周围有明显          的菌落进一步研究。

（3）该兴趣小组分离得到高产纤维素酶的细菌，发酵提取得到一定量的纤维素酶，如果直接用于酶解纤维素，酶溶解后无法回收利用，造成很大浪费。可以使用            技术，这样就可以反复利用，大大降低生产成本。

回答下列与玉米秸杆的处理有关的问题。

（1）秸杆的主要成分是纤维素，牛一般没有分解其的酶，但其胃内有一种微生物可以帮助其分解，这种微生物与牛的种间关系为                 。尿素并不是牛马的必须营养，过多甚至对其有害，但有经验的农民常在其草料内喷少量尿素，据此题的信息你认为尿素的作用是                         。

（2）将秸杆粉碎后可以用来作为蘑菇的培养基质。对培养基和接种针进行灭菌处理。

（3）青贮加工技术。将成熟期玉米秸秆切碎、收集或人工收获后，将其铡碎装贮于窖、缸、塔、池及塑料袋中压实密封储藏。秸杆处理后，气味微酸（乳酸菌生活的产物）芳香。上述“压实密封”的目的是：人为造就一个                    环境，利于乳酸菌的             。用经这样处理后的秸杆饲喂牲畜的好处是：          。

（4）下面是分离分解纤维素的微生物的实验流程图。

步骤（三）中稀释的目的是：                     ________，步骤（四）中鉴别培养基中常加                    从而使其呈现均匀的红色，步骤（四）中应挑选产生           的菌落即为所需菌落。

（1）土壤中富含各种微生物，将其浸出液接种到特定的         培养基上，可得到目的菌。不同培养基的具体配方不同，但一般都含有                       等营养物质。

（2）要统计土壤样品中某活菌的数目，宜采用            法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的             就能大约推测出样品中的活菌数。

（3）自古酒就与人类生活息息相关。在下图所示两发酵瓶中装入等量的葡萄汁进行葡萄酒制作实验，若在A装置的通气口补充无菌空气，那么一段时间后，能获得葡萄酒的是______装置。工业生产中，当酿制好葡萄酒后还可利用其进一步酿制葡萄醋，该过程中需改变的发酵条件主要是                            。

[生物一选修1：生物技术实践】

图示为稀释涂布平板法的操作流程。请回答下列问题：

   (1)实验室获得纯净培养物的关键是________________________。

   (2)图示流程的主要操作包括________________和________________。

   (3)一般选择菌落数在__________的平板进行计数，结果比较准确。

   (4)当培养基中纤维素成为唯一碳源时，可筛选出________________。要证明其有选择作用，可以用______________________作对照，比较菌落目：还可以在培养基中加入刚果红染料，如果_____________________，也证明其选择作用。

[生物——选修1：生物技术实践]

（1）培养基中加入化合物A的目的是筛选________________，这种培养基属于________________培养基。

（2）“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的______________，实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是_____________。

（3）培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量__________________的培养液，接入新的培养液中连续培养。

（4）转为固体培养时，常采用________________________法接种，获得单菌落后继续筛选。

（5）若研究“目的菌”的生长规律，将单个菌落进行液体培养，可采用________________的方法进行计数，以时间为横坐标，以细菌数目的对数为纵坐标，绘制生长曲线。

（6）实验结束后，使用过的培养基应该进行_____________________________处理后，才能倒掉。

硅酸盐细菌可以将土壤中不溶性的含钾矿物(如长石、云母)以及磷灰石等分解转化，释放出水溶性的钾、磷，将土壤中的无效磷钾转化为速效养分。现代工业可将硅酸盐细菌制成细菌肥料，达到增产目的。硅酸盐细菌在无氮培养基、钾细菌培养基以及硅酸盐细菌培养基上均能生长，下表1是硅酸盐细菌培养基的一种配方。答下列问题：

（1）根据硅酸盐细菌培养基的配方可知，从功能上看，该培养基属于______培养基，原因是____________________________。

（2）培养硅酸盐细菌时必须进行无菌操作。培养基的灭菌一般采用__________法。配制培养基时，灭菌与调节pH的先后顺序是_________________。

（3）表2的名称是____________，在进行接种时，所有的操作都应在_________附近进行。在采用平板划线法分离硅酸盐细菌时，第二次及之后的划线，总是在上一次划线末端开始，这样做的目的是_______________。

（4）在进行表2所示实验的同时也设置了空白对照，空白对照的培养基中__________，说明培养基灭菌合格；根据表2数据可以得出，用__________培养基筛选硅酸盐细菌的效果最好。

(1)从自然 界获得纯种酿酒酵母菌的基本程序：配制培养基→接种→培养→观察记录→纯化培养。

①采用平板划线法接种，开始接种时要灼烧接种环，目的是_____________。

②若葡萄汁中含有醋酸菌，在葡萄酒发酵旺盛时，醋酸菌能否将酒精转变成醋酸？________，原因是______________________________________。

(2)在腐乳的制作过程中，有多种微生物参与了豆腐的发酵，其中起主要作用的是________。产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的________和         ，________可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。

(3)利用纤维素解决能源问题的关键是高性能纤维素酶的获取。科学家利用培养基从土壤中选择出能分解纤维素的细菌，经过大量培养后可以从中提取纤维素酶。土壤中富含各种微生物，将土壤浸出液接种到特定培养基上，可得到能分解纤维素的细菌，实验室中获取纯净菌的常用方法有__________和____________。虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、 __________。