牛奶富含矿物质和满足人体生长发育所需的全部氨基酸，消化率高达98％。长期饮用牛奶有利于增强体质，但牛奶也是多种病菌的传播载体。下图是牛奶消毒及细菌检测实验的过程图。请回答下列相关问题：

（1）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的基本步骤是___________________________________，

（2）培养基中的蛋白胨为细菌的生长提供的营养物质主要有________（填两个），对培养基常采用________法进行灭菌。

（3）步骤①称为________消毒法，步骤②是________。

（4）步骤③纯化细菌的接种方法是________。除此方法外还有一种纯化的方法是______________，微生物培养过程中，为防止冷凝水影响细菌的生长，需将培养皿________培养。

（5）将接种后的培养基放入________中培养，36h后取出，统计3个平板上的菌落数分别是87、83和85。经过消毒后的牛奶中，细菌数大约是________个／mL。

实验原理：固体培养基中难溶性磷酸盐在微生物的作用下溶解，会在菌落周围形成透明圈（如图），透明圈直径（D）与菌落直径（d）的比值（D/d）代表微生物溶解磷的能力大小。

实验步骤：

步骤1&; 取某地区土样 5g制得土壤溶液后稀释，取稀释液1mL接种到基础培养基A上，在适宜温度下培养72h。

步骤2  在基础培养基A上用接种环挑取代表性菌落再次接种，培养3～4d后观察菌落特征和透明圈的大小，初步筛选出三种优良解磷菌株（如下表）。

分析回答：

（1）从物理形态看，培养基A属于      培养基。培养基中磷源应该是      。

（2）步骤1中接种方法是      ，步骤2中接种环的灭菌方法是      。

（3）根据实验结果可以确定溶解磷能力最强的菌株是      。

 （4）为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力，研究人员将它们接种到基础培养基B中，并在 37 ℃、200 r·min^-1 摇床培养，定期取上清液，测定溶液中可溶性磷含量，得到下图所示曲线。

①用摇床进行培养的好处是      。

②结果表明最优良的解磷菌株是      。

东湖绿道二期已向市民开放，我市某中学学生模拟公司课外兴趣小组为了调查东湖的水质状况，在东湖白马驿站区域取样后测定了水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。请回答下列问题：

（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时问，这样做的目的是__________；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37，据此可得出每升水样中的活菌数为________。如果该小组实验组平板上菌落平均数为39个／平板，而空白对照组的一个平板上出现了2个菌落，这种结果说明在此次调查中培养基出现了________现象。如果将37（即39－2）个／平板作为本组菌落数的平均值，你觉得该做法_____（填“可行”或“不可行”）。

（2）若想确定平板上的菌落是否有大肠杆菌，一般在培养基中加入伊红美蓝，该培养基从功能上划分属于________________培养基。

（3）该小组经讨论决定采用平板划线法分离水样中的细菌，在第二次及以后的划线操作时，应从______开始划线，这样做的目的是________。

（4）如下图A和B中,_____表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。采用该计数方法结果往往较实际值偏_______（填“高”或“低”）原因是________________。

（5）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养，结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中________________的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高________________的利用率。

图1表示微生物实验室培养中的部分操作。请分析回答：

                                                 图1                                                                                        图2

（1）步骤①的后一步的正确操作应是将平板____________________，这样可以防止_____________________________。

（2）步骤②→③之间需要进行的正确操作应是__________________________________。

（3）甲同学按步骤④进行操作，据图分析，采用的接种方法称为________________，其操作的两处不当之处分别是__________、_________。在老师的指导下，该同学按正确的方法重新操作，则经培养后菌落的分布情况最可能是下图中的_____________________。

（4）乙同学尝试采用不同于甲同学的接种方法进行实验，其中一个平板经培养后的菌落分布如图2所示，推测该同学接种时可能的操作失误是_________________________。

I．为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：

(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是____________________；然后，将1 mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为________。

(2)在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是_____________________________。

(3)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、______、_______四类，该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是_________________________。

（4)纯化菌株时，通常使用的划线工具是________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌

落。造成划线无菌落可能的操作失误有________________________________。

（5）为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是________________________，该实验设计是否合理？为什么？___________。

（6）若要统计培养液中活菌的数目，则应采用_______________法进行接种。

胡萝卜素是一种常用的食用色素，可从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取获得，流程如下：

（1）筛选酵母菌R时，需要用到___________（功能）培养基。若该培养基属于固体培养基，则通常含有的凝固剂是___________。

（2）培养酵母菌R时，温度一般控制在_____________。采用_____________法接种时需先灼烧接种环，接种过程需要在酒精灯火焰附近进行。

（3）从胡萝卜中提取胡萝卜素过程中，干燥时应控制好__________________，以防止胡萝卜素分解；萃取液浓缩前需进行过滤，其目的是________________。

（4）提取的胡萝卜素可通过_____________法进行鉴定。

胡萝卜素用途广泛，价格不菲。请回答下列有关胡萝卜素的问题：

①孢布拉霉负菌与细菌共同具有的细胞器是________。过程①的原理是____________。

②培养基中的葡萄糖含量对菌体生长影响最大。葡萄糖为菌体生长提供           。为选出高产突变菌种，还应在培养基中添加_________________，该培养基按用途分是________培养基。

③进行③过程时，应选取________色的菌落接种至液体培养基。为_______________β━胡萝卜素产量高的菌种，⑤中采取重复________过程（填过程中的数字）。

④某同学进行过程甲的正确操作，平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是_________________；只有少数菌能生长形成菌落的原因是_____________________。

⑤另一同学为了获得高产菌株的单个菌落，接种时可用接种环在固体培养基上进行            操作，为了使聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，进行该操作时应该特别注意两点，一是________，二是________。

⑥让高产菌株大量繁殖的过程叫菌种培养，大量产生胡萝卜素的过程叫发酵培养。这两个过程中，               的培养基中碳／氮比例更高，原因是              。

（3）胡萝卜的肉质根富含胡萝卜素，可作为提取胡萝卜素的良好原料。

①完成提取胡萝卜素的实验流程示意图：

胡萝卜→粉碎→干燥→萃取→过滤→       →胡萝卜素

②萃取剂不能选用无水乙醇的最主要原因是            。

③如图为提取胡萝卜素的装置:

a、在烧瓶瓶口安装了                  装置，其目的是                 。

b、过滤步骤是为了除去萃取液中的        。

（4）甲乙两同学将各自提取的胡萝卜素粗品用纸层析法进行鉴定，结果如图所示，据图分析回答：

图中①代表的物质是         ，甲同学实验结果的可能原因有                。

某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难于降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如下图所示。请分析完成下列问题：

（1）培养基中加入化合物A的目的是筛选            ，这种培养基属于      培养基。

（2）“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的       ，实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是             。

（3）在上述实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是                    。

（4）转为固体培养时，常采用平板划线的方法进行接种，此过程所用的接种工具是      ，操作时采用          灭菌的方法。

（5）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，这样做的目的是                  。

（1）实验步骤：

①配制以_____________ 为碳源的固体培养基，为了使培养基凝固成固体，应该向培养基中加入的物质是 _____________ 。

②将土壤样品接种到已灭菌的培养基上，在恒温培养箱中培养一段时间后，培养基上出现 _____________ 。

③将接种针用 _____________ 法灭菌后，从②中的培养基上挑取一定量细菌，接种入_____________（固体、半固体、液体）培养基，在恒温摇床上培养24h，使细菌大量繁殖。

④配制与①相同的培养基，并加入少量碘液，使培养基呈蓝紫色。用 _____________ 法将上一步大量繁殖后的细菌接种到已灭菌的培养基上。

⑤培养一段时间后，观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小。周围出现较大__________  现象的菌落即为初选菌落，经进一步分离、纯化后即可达到实验目的。

（2）上述所有倒平板和接种操作，都应在超净台上酒精灯 _____________   附近进行。

（3）上述实验步骤中，从用途看，①所用培养基属于 _______培养基，⑤所用培养基属于_______培养基。