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          50条信息

            • 1.

              苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中,对环境有严重危害。某同学准备依据如图操作步骤,从处理废水的活性污泥中分离筛选苯酚降解高效菌株。请回答下列问题:

              (1)苯酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作为碳源的有___________。

              (2)将采集到的样品接种培养,苯酚用量应随转接次数增加而逐渐_______,以达到富集酚降解菌的目的。若上图平板中菌落过于密集,应进一步__________,以便于菌落计数与分离。制备平板培养基时除了需要水、营养物质外,还必须添加_________。

              (3)下图为连续划线法示意图,在图中________(填图中序号)区域更易获得单菌落。

              (4)采用比色测定法(使用苯酚显色剂)检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应,下表中1~5号比色管的苯酚浓度应分别为______。

              试管号

              1

              2

              3

              4

              5

              6

              苯酚浓度(mg/L)

               

               

               

               

               

              1

              如果废水为50 mg/L苯酚溶液,降解后约有21%的苯酚残留,则需将残留液稀释_____(填序号:①5 ②10 ③20)倍后,再进行比色。

            • 2.

              下表是筛选异养型细菌的培养基配方。回答下列问题:

              KH2PO

              1.4 g

              Na2HPO4

              2.1 g

              MgSO4·7H2O

              0.2 g

              FeCl3

              0.1 g

              X

              1 g

              维生素

              微量

              琼脂

              15 g

              将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL

              (1)苯胺是致癌物质,土壤中有分解苯胺的异养型细菌,若要筛选此异养型细菌,则此培养基中的成分X除了为目的菌提供能源外,还能提供_________,该培养基从物理性质看属于________培养基。中学实验室中对培养基进行灭菌的常用方法是____________。接种前,用灭菌后未接种的培养基培养一段时间,观察是否形成菌落,目的是________________________________________________________________________。

              (2)如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图,获得图A效果的接种方法是____________________。运用获得图B效果的方法接种时,操作上应注意每次划线前要灼烧________。

              (3)在以尿素为唯一氮源的培养基中加______________可初步鉴定该种细菌能否分解尿素;在筛选能够分解纤维素的微生物过程中,常用到________染色法。

            • 3.

              LB液体培养基和LB固体培养基是微生物实验室中较常用的一种培养基,其配方为10 g/L蛋白胨、10 g/L酵母提取物、5 g/L氯化钠等,主要用于培养细菌、扩增菌种数量。某研究组开展了氧气对微生物生长、繁殖的影响实验,请回答下列问题:

              (1)要配制供微生物生长、繁殖的培养基,其中一般都含有______________和无机盐等。有些微生物对某些特殊营养物质及______________等条件有特殊要求。

              (2)将各类微生物用______________从斜面培养基接种于灭菌过的LB液体培养基中,进行扩大化培养。

              (3)将含有LB固体培养基(LB液体培养基中加15 g琼脂粉,刚配好,尚未凝固)的锥形瓶放入______________中进行灭菌。灭菌完成后将锥形瓶取出,待温度下降到60 ℃(不烫手的温度)时,用______________擦拭桌面和双手,在超净工作台中的______________旁将锥形瓶中的LB培养基分装到一系列试管中,并做标记。

              (4)当试管温度下降到40 ℃(培养基还是液态)时,用灭菌过的移液器吸取0.1 mL的各类微生物悬液加入相应试管中并封口,双手快速搓动试管,使菌种均匀分布于培养基内后迅速将封口的试管放置在________条件下使培养基凝固。

              (5)将上述试管放置于常温条件下培养48小时后观察实验结果,下图中可表示制作果酒的菌种的分布图的是______________。

            • 4. 烧伤病人容易感染绿脓杆菌,引起化脓性感染,比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素都是非常经典的抗绿脓杆菌的药物。临床使用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验。实验时,从病人身上获取少量样本,按照一定的实验步骤操作,以确定该病人体内的绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性。

              (1)获取绿脓杆菌单菌落:

                  配制适于绿脓杆菌生长的培养基,培养基中的营养成分一般含有______、氮源、生长因子、水和无机盐,调节pH至7,灭菌处理,待培养基冷却至50℃时,在_________附近倒平板。经过选择培养、鉴别等步骤获得单菌落。

              (2)检测绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性:

                  取该单菌落适当稀释,用___________法接种于固体培养基表面,使其均匀生长,布满平板。将分别含等剂量的比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素的相同大小的小滤纸圆片均匀置于该平板上的不同位置,适宜条件培养一段时间,结果是含不同抗生素的滤纸片周围均出现透明圈(如上图),这说明绿脓杆菌对上述抗生素________(填“敏感”或“不敏感”);含头孢菌素的滤纸片周围的透明圈比含美罗培南的小,这说明绿脓杆菌对头孢菌素的敏感性比美罗培南________(填“强”或“弱”);含比阿培南、碳青霉烯类的滤纸片周围的透明圈也比含美罗培南的小,且比阿培南透明圈中出现了一个菌落,请推测此菌落产生的可能原因:一是________________,二是_________________。

              (3)根据上述实验结果,为达到抗绿脓杆菌的目的,对于该患者来说最好应选用抗生素_____________。

            • 5. 植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解,回答下列问题

              (1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶,该酶是由3种组分组成的复合酶,其中葡萄糖苷酶可将___________。纤维素分解菌的筛选方法叫_________法。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的_________。

              (2)为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落,某同学设计了甲,乙两种培养(成分见下表);培养基甲______(填"能"或"不能")用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是______________。



              (3)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养,结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是:振荡培养能提高培养液中________的含量,同时可使菌体与培养液充分接触,提高________的利用率。

              (4)在用稀释涂布平板计数法对纤维素分解菌数目进行统计时,统计的菌落数往往比活菌的实际_______________________。如果探究温度对纤维素酶活性的影响,应该保持______________、______________等不变(至少答两项)

            • 6. 苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中,对环境有严重危害。小明同学准备依据下图操作步骤,从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题:

              (1) 酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作为碳源的有_______。 


              (2) 将采集到的样品接种培养,苯酚用量应随转接次数增加而逐渐______,以达到富集酚降解菌的目的。若上图平板中菌落过于密集,应进一步_____,以便于菌落计数与分离。制备平板培养基时除了需要水、营养物质外,还必须添加____。 

              (3) 图为连续划线法示意图,在图中____(填图中标号)区域更易获得单菌落。 


              (4) 采用比色测定法(使用苯酚显色剂)检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应,下表中15号比色管的苯酚浓度应分别为____________。 

              管号

              1

              2

              3

              4

              5

              6

              苯酚浓度/(mg·L-1)

               

               

               

               

               

              1


              如果废水为50 mg·L-1苯酚溶液,降解后约有21%的苯酚残留,则需将残留液稀释____(填标号:①5 ②10 ③20)倍后,再进行比色。 

            • 7.

              如下表所示为某微生物培养基的配方,请回答:


              成分

              含量

              成分

              含量

              NaNO3

              3 g

              FeSO4

              0.01 g

              K2HPO4

              1 g

              (CH2O)

              30 g

              琼脂

              15 g

              H2O

              1 000 ml

              MgSO4·7H2O

              0.5 g

              青霉素

              0.1万单位


              (1)依物理性质,该培养基属于__________培养基。依用途划分,则属于_________培养基。

              (2)根据培养基原料,所培养微生物的同化作用类型是______________,培养的微生物可能是_______________。

              (3)该培养基中的碳源是_____________。不论何种培养基,在各成分都溶化后分装前,要进行灭菌。

              (4)若用该培养基培养尿素分解菌,应除去的物质是________________,加入的物质是_____________。

              (5)为检测尿素分解菌的存在与否,还应加入________________,将呈___________反应。

            • 8.

              某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如下图所示。请分析回答下列问题。

              (1)培养基中加入化合物A的目的是筛选_  _______,这种培养基属于________培养基。

              (2)目的菌生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的____  ____,实验需要振荡培养,由此推测目的菌的代谢类型是异养________型。(填“需氧”或“厌氧”)

              (3)培养若干天后,应选择培养瓶中化合物A含量________的培养液,接入新的培养液中连续培养,使目的菌的数量________。(两空均填“增加”或“减少”)

              (4)在上述实验操作过程中,获得纯净目的菌的关键是防止____            ___。

              (5)转为固体培养基时,常采用                        进行接种,所用的接种工具分别是________________和               。

              (6)实验结束后,使用过的培养基应该进行__________处理才能倒掉,以防止微生物的扩散。

              (7)通常情况下,培养基用                  方法灭菌,培养皿用         灭菌。待培养基冷却到        ℃(填20、30、40、50)左右时,在                     附近倒平板,等平板冷却凝固后将平板倒置,可以防止                     ,以免造成污染。
            • 9. 腐乳是我国独特的传统发酵食品,是用豆腐发酵制成,民间老法生产腐乳均为自然发酵,现代腐乳生产多采用优良的毛霉菌种进行发酵。现代化生产流程如下:

              (1)毛霉的生长需要豆腐提供水、无机盐、________________四大类基本营养物质。此外,还需要一定的温度、湿度等环境条件。

              (2)民间制作腐乳时__________(填“需要”或“不需要”)灭菌,发酵好的豆腐上布满了菌落,这些菌落___________(填“属于”或“不属于”)同一物种。

              (3)流程中扩大培养时使用的培养基与毛霉菌种分离时使用的培养基最大的区别是后者培养基中加入了________________________。

              (4)当豆腐上长出毛霉后,对豆腐要进行____________________。腐乳制作的后期要加入酒精和多种香辛料配制的卤汤,酒精的浓度要控制在12%,原因是______________________________________________________________________。

            • 10.

              (一)酵母菌是来源于自然界的菌种,它种类繁多、分布很广、繁殖极快。如何筛选、纯化、诱导对葡萄酒发酵有利的酵母菌种,是酿酒师们长期研究的课题。

              (1)像其他微生物一样,酵母需要适当的营养和合适的环境条件,培养时培养液中的营养物质主要有_____________________等。(要求回答4种营养物质)

              (2)从含有酵母菌、醋酸菌、蓝藻的培养液中分离出酵母菌,最简单的培养方法是:在_______并且________条件下进行培养.

              (3)为筛选和纯化酵母菌,根据用途应选用________培养基,常用的接种方法____________和 ____________.扩大培养过程中需要对酵母菌进行计数,取0.2mL样品,用固体培养基对其培养,最后统计了三个平板,菌落数分别是200、180、220.则样品中微生物的数量为_________个/mL.该统计结果_______(低于、高于)实际值,原因是___________________________________________。

              (二)某植物园中种植的有菊花、玫瑰等花卉,还有葡萄、橘子等水果,其中玫瑰、橘子都可以作为植物芳香油提取的原料。请回答下列问题:

              (1)植物芳香油的提取方法有___________、压榨和___________等。

              (2)玫瑰精油适合用________法提取,其理由是玫瑰精油具有易挥发、难溶于水、化学性质稳定的特点。蒸馏时收集的蒸馏液不是纯的玫瑰精油,而是_______。

              (3)橘皮精油的提取原料是橘皮,但橘皮易焦糊,宜采用_____法提取橘皮精油,其中将柑橘皮干燥去水,并用石灰水浸泡,其目的是_________________。

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