[生物——选修1：生物技术实践]

橙子的皮可用于提取精油，果肉可供食用或制作果酒或橙汁等。请回答下列问题：

（1）利用橙子的果肉制作果酒时，发酵菌能将葡萄糖等糖类在________条件下转化成酒精，另外发酵装置应定时________。

（2）利用橙子的果肉制作橙汁时，为提高出汁率，需向装置内加入________酶。

（3）研究发现橙皮精油和乳酸菌素（小分子蛋白质）均有抑菌作用，下面是提取橙皮精油和乳酸菌素及抑菌实验的示意图：

（1）橙皮易焦糊，不适用于提取橙皮精油的方法是________。

②筛选乳酸菌A时，所用培养基需经________法进行灭菌。

③进行抑菌实验时，接种乳酸菌A的方法最可能是________，最终可通过________来比较橙皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。

1．下图为果酒和果醋的制作流程，回答问题：

（1）从自然菌样中分离较理想的醋酸杆菌进行纯化培养，通常采用 　   方法分离，接种之前要对接种工具进行     ，避免接种工具上可能存在的微生物污染培养基。

（2）果酒的制作离不开酵母菌，在酵母菌的酒精发酵过程中，通常将温度控制在      。由果酒转变成果醋的制作时，需要改变的环境条件是  ▲    和温度控制住30～35℃。

（3）若在果汁中含有醋酸菌，在果酒发酵旺盛时，醋酸菌    (填“能”或“不能”)将果汁中的糖发酵为醋酸。

(4)在用果汁制果酒的过程中，发酵瓶溶液中pH的变化是          。

A．增大   B．不变    C．减小    D．先碱小后增大

2、下图为科学家利用转基因技术培育抗病番茄植株过程的示意图，请回答以下问题

（5）图中所选的Ti质粒中往往需含有      （A.抗虫  B.胰岛素  C.抗生素抗性  D.抗冻）基因，有利于重组质粒的筛选。A过程中常用的酶有                  。  

（6）E过程需要借助              技术，在含有营养物质、         等成分的培养基中，番茄细胞经过脱分化形成             ，该类单细胞具有细胞质丰富、        （A.液泡大、细胞核大    B.液泡小、细胞核大   C.液泡小、细胞核大   D.液泡小、细胞核小）等特征。

    苹果醋具有营养丰富，增强机体免疫力，护肤养肝等多种功效，以鲜苹果汁为原料利用发酵瓶制作果酒和果醋的过程如下图1，请分析回答：

(1)图1甲过程中使用的微生物是________，它是的代谢类型属于________。发酵温度控制在18℃～25℃，经过10—12天后，若检测样液中是否产生酒精，可以用________来检验。请写出该过程的化学反应式________。

(2)图1乙过程需在________(填“有氧”或“无氧”)条件下进行，请写出该过程的化学反应式________。使用的醋酸菌可以从食醋中分离纯化获得，如图3操作是分离纯化过程中的利用________法进行接种。

(3)为了保持菌种的纯净，对于长期需要保存的菌种，可以采用________的方法。

(4)某同学尝试自己利用图2装置制果酒，制作过程中进气口应________，排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，这样做的原因是________。

41.下面是某同学自己制作果酒、果醋的实验流程示意图。(7分)

(1)发酵罐1和发酵罐2中的微生物在结构上的主要区别是前者                   ，要保证酒精发酵和醋酸发酵的正常进行，除了满足适宜的温度、pH等条件外，还必须             。

(2)根据发酵罐1中微生物形态、数量可以判断哪种类型是优势菌种，最简单的方法是              ，此种方法获得的优势菌种的数量      （大于、等于、小于）发酵罐1优势菌种活菌的数量。

（3）在果酒、果醋的制作过程中葡萄糖汁装入发酵瓶时，要留出大约       的空间。制作过程需严格控制温度，其中果醋制作的温度是                  。

(4)如果用葡萄酒来制葡萄醋，请写出反应式：__________________________             。

下图为樱桃果酒果醋生产工艺流程简图，请据图回答下列问题。

挑选优质樱桃→冲洗→压榨过滤→灭菌→接种→酒精发酵→接种→醋酸发酵

（1）冲洗的目的是________。樱桃榨汁前需要除去果柄，此操作应在冲洗之______(填“前”或“后”)进行。

（2）制作果酒时，可在酸性条件下，用__________________来检测是否有果酒产生。若樱桃果酒出现变酸现象，原因之一是发酵液中混有______________菌，发酵产生了乳酸。

（3）若要进一步获得醋酸，接种的菌种应为__________，控制的气体条件是______________。

 （4）若要检测发酵液中菌种数目，常用下图中的_____(填字母)接种方法，该方法统计的菌落数往往比实际活菌数要_________。

（1）海藻酸钠能作为固定载体的特点是   ▲   ，在联合固定果胶酶和酵母菌之前，对海藻酸钠所作的操作是   ▲   。

（2）果胶酶在果汁生产中具有重要的作用，把果胶酶和酵母菌固定在一起生产红葡萄酒的重要意义在于   ▲   。

（3）果胶酶通常先与戊二醛交联，然后与活化的酵母菌一起用海藻酸钠包埋固定，这是因为   ▲   。

（4）在初级发酵时一般温度控制在   ▲   ，在发酵过程中，尤其要随时监控和调整发酵罐中的温度和pH，使其在适宜的范围内波动，其主要目的是   ▲   。

(1)在果酒果醋的自然发酵过程中，发酵装置内加入果汁后要留出约1／3的空间，目的是有利于酵母菌________进行快速繁殖，且可以防止发酵过程中产生二氧化碳造成发酵液溢出。酒精发酵后转入醋酸发酵前，除改变温度外，还需调整的发酵条件是________。

(2)腐乳生产过程中多种微生物参与了该发酵过程．其中起主要作用的微生物是________。在制作腐乳过程中加盐的目的：一是抑制微生物生长，避免豆腐块变质，二是________。

(3)如图表示采用________法制备固定化酵母细胞的有关操作，图中X为________溶液，其的作用是________。

(4)若用洋葱提取DNA，在切碎的洋葱中需加入适量的________再进行充分的搅拌和研磨；对最后得到的DNA絮状物可用________试剂进行鉴定。

（一）下面的实验装置图（图甲、乙）和果酒的生产工艺流程简图（图丙）

（1）制作果酒时可选用图乙的装置。为适当提高果酒的生产速率，进气口应     ；排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，这样做的原因是               。

（2）为了提高樱桃的出汁率，在压榨前可加入一定量的__________         酶。

（3）若是从混杂的微生物中分离酵母菌，从功能上看，应使用________   培养基。从微生物培养的角度分析，樱桃果汁能够为酵母菌的生长提供水、无机盐和              。

（4）樱桃果酒制作是否成功，发酵后可在酸性条件下用________           溶液来鉴定。在酒精发酵旺盛时，醋酸菌________（能/否）将果汁中的糖发酵成醋酸，乳酸菌________ (能/否)将乳酸分解成CO₂和水。

（二）生物组织中存在多种有机物，不同的有机物提取和鉴定方法不相同。

（1）图甲所示装置可用于提取________（填“橘皮精油”、“玫瑰精油”或“胡萝卜素”）。

（2）若用萃取法提取胡萝卜素，对萃取剂的要求是      ，萃取的效率主要取决于萃取剂的       ，充分萃取后，对过滤得到的滤液通常采用蒸馏装置进行________，从而得到产品。

（3）如图为β­胡萝卜素的纸层析结果示意图，请据图回答问题：

在实验过程中，为了防止层析液挥发，应将滤纸放置在     中，并盖上玻璃盖。基线的AD两点是________，点样操作时应注意________，在图中的层析谱中，②代表的物质是________

Ⅰ．【现代生物科技专题】

   鼠源单克隆抗体用于疾病的治疗时，易发生不良反应，科学家通过对鼠和人控制抗体产生的基因进行拼接，实现了对鼠源单克隆抗体的改造，生产出对人体不良反应小、效果更好的单克隆抗体。请回答：

(1)鼠源单克隆抗体是将经过免疫的小鼠________细胞与骨髓瘤细胞融合，然后筛选出________的杂交瘤细胞，并通过体内或体外培养生产的抗体。

(2)动物细胞融合常用________诱导，细胞融合体现了细胞膜的________。在体外培养杂交瘤细胞时，培养液中通常加入________等天然成分，将其置于95％空气加5％CO₂的气体环境中，CO₂的作用是________。

(3)基因拼接用到的工具有________和________。

(4)单克隆抗体的优点是________。

Ⅱ．【生物技术实践】

    近年来，纪录片《舌尖上的中国》引发全民关注美食的热潮，其中多次讲述了利用不同微生物的发酵作用制作的美味食品。请回答：

(1)腐乳生产是在严格的无菌条件下，将优良的毛霉菌种接种到豆腐上，这样可以________。腐乳制作的过程中，加盐的作用是________和________。从微生物培养的角度来看，豆腐应该属于________。

(2)在果醋制作时，醋酸菌在________供应和糖源充足时，将糖分解成醋酸；在糖源不充足时，也可以利用________生成醋酸。

(3)制作泡菜的原理是________。

(4)胡萝卜素是重要的药物和食品添加剂，在胡萝卜素的萃取中，所用的有机萃取溶剂应该具有较高的________，以便胡萝卜素能充分溶解其中。对萃取的胡萝卜素样品和标准样品进行点样层析时，如果出现________现象，则说明胡萝卜素提取成功。

我国利用微生物的发酵来制作果酒、果醋、腐乳和酸奶等食品的历史悠久。根据传统发酵技术的相关知识，回答以下问题：

(1)果酒和果醋的制作：

①酵母菌是制作葡萄酒不可缺少的微生物，发酵过程中需要控制的温度为________℃。

②果酒发酵装置内要留1／3空间，在发酵期的用途一是初期提供有氧条件促进酵母菌的大量繁殖，二是________。

③喝剩的葡萄酒放置一段时间后变酸的原因是________。

(2)腐乳的制作：

①腐乳制作有多种微生物参与，其中起主要作用的是________。

②豆腐发酵主要利用微生物产生的________酶等，通过发酵使豆腐中的小分子有机营养物质增多，且更易于消化和吸收。

(3)乳酸发酵：

①含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶，原因是________。

②测定泡菜中亚硝酸盐含量的原理是在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N—1—萘基乙二胺盐酸盐结合形成________染料。