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            • 1. 下列有关微生物培养的叙述,正确的是(  )
              A.测定土壤样品中的细菌数目,常用平板划线法进行计数
              B.在对微生物进行培养前,需要对微生物和培养基进行灭菌
              C.酵母菌发酵过程产生的酒精,对其生长没有影响
              D.鉴定能分解纤维素的细菌时,需要在培养基中加入刚果红染料
            • 2. 微生物培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等不同方法杀灭细菌,这些方法可依次适用于(  )
              A.接种环、手、培养基
              B.菌种试管、手、培养基
              C.培养基、手、接种环
              D.菌种试管、手、接种环
            • 3.

              在分离、纯化大肠杆菌实验中,划线接种(甲)、培养结果(乙)如下图。有关叙述错误的是


              A.接种前应对培养基进行高压蒸汽灭菌
              B.连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落
              C.接种过程中至少需要对接种环灼烧5次
              D.甲中a区域为划线的起始位置
            • 4. 微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法.下列关于这两种接种方法的叙述中,不正确的是(  )
              A.都只能用于固体培养基接种
              B.都能用于微生物的计数
              C.接种培养后均可获得单菌落
              D.接种工具使用后需要灭菌
            • 5. 选做题(15分,选修三和选修一任选一题做)

              (选修三)毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIFⅡ)基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。

              (1)过程①中最常用的运载工具是    ,所需要的酶是限制酶和    

              (2)在过程②中,用    处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养过程中,将成纤维细胞置于5% CO2的气体环境中,CO2的作用是     

              (3)在过程③中,用    处理以获取更多的卵(母)细胞。成熟卵(母)细胞在核移植前需要进行    处理。

              (4)从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是    。在胚胎移植前,通过    技术可获得较多胚胎。

              (选修一)从自然菌样筛选较理想的生产菌种的一般步骤是:采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。

              (1)不同微生物的生存环境不同,获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样,然后再按一定的方法分离、纯化。培养嗜盐菌的菌样应从       环境采集。

              (2)富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件,使其在群落中的数量大大增加,从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择     的培养基,并在       条件下培养。

              (3)下面两图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解,请分析接种的具体方法。 

              获得图A效果的接种方法是        ,获得图B效果的接种方法是        

              (4)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行     ,接种前要进行     ,在整个微生物的分离和培养中,一定要注意在       条件下进行。

            • 6. [生物——选修1:生物 技术实践](15分)酸菜,古称道,《周礼 》中就有其大名。制作酸菜的初衷是为了延长蔬菜保存期限。请回答:

              (1)酸菜制作过程中,起主要作用的微生物是___________。但是在发酵初期,很多杂菌会大量繁殖,其中导致泡菜水的表面长白膜的微生物是_____________。

              (2)实验室可采用__________法进行菌种纯化,在对该菌种进行培养时,与常规培养基相比,还需要额外在培养基中添加_________________。

              (3)为了保持所获得的菌种纯净,需要进行菌种的保藏。若采用临时保藏,需将菌种接种在___________上。放入4℃冰箱中可保藏3-6个月;若要长期保存,可将菌液与灭菌的_______ ___混匀,放在-20℃的冰箱中保存一年。

              (4)在市场上购买的真空包装酸菜,在没有发生漏气状态下发生了“胀袋”现象,A同学认为是杂菌污染导致的,B同学怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的,说出你支持谁的观点并说出理由。支持_______的观点,理由是______________。

            • 7. [生物——选修1:生物技术实践](15分)请考生从给出的3道物理题、3道化学题、2道生物题中每科任选一题作答

                  某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌,并统计每克土壤样品中活菌数目,培养基配方如下。将各种物质溶解后,用蒸馏水定容到1000mL,再经高温灭菌,制成固体培养基备用。

              (1)根据培养基的成分判断,该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌?_______(填“能”或“不能”),原因是___________________________。

                 (2)培养基用_________方法灭菌,培养皿用____________方法灭菌,待培养基冷却到________℃(填“20”、“30”、“40”或“50”)左右时,在________附近倒平板,等平板冷却凝固后,将平板倒过来放置,可以防止__________,以免造成污染。

                 (3)要统计每克土壤样品中活菌数目,宜采用__________法接种,根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积,统计平板上的___________就能大约推测出样品中活菌数。

                 (4)培养分解尿素的细菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_______________。

                 (5)实验中使用过的培养基及其培养物必须经过_________处理后才能丢弃,以防止微生物的扩散。

            • 8. 33、平板划线法和稀释涂布平板法是纯化微 生物的两种常用方法,下列描述正确的是
              A.都要将菌液进行一系列的梯度稀释
              B.平板划线法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基中进行培养
              C.稀释涂布法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基中进行培养
              D.都应在无菌环境中操作
            • 9. 回答下列有关微生物培养与应用的问题


              (1)某小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间,这样做的目的是             。

              (2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,接种环通过   灭菌,在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是               。 

              (3)某同学尝试接种的操作,其中一个平板经培养后的菌落分布如图所示。该同学的接种方法是__________________;推测该同学接种时可能的操作失误是               。

              (4) 为了检验某致病菌对于抗生素的敏感性,在该病菌菌落均匀生长的平板的不同位置,分别放置含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片,培养一段时间后,在四个滤纸片周围出现透明圈由大到小依次是A>C>D>B,由此推断,该病人目前适合使用的抗生素是______.含C的滤纸片周围透明圈比含A的小,说明                                ;若抗生素B的滤纸片周围没有出现透明圈,最可能的原因是                        导致的结果;含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小,且透明圈中出现一个菌落,这种菌落的出现可能是由于接种过程不严格导致的                ,也可能是由于                  产生的抗生素D的耐药菌。 

            • 10. 39、(选修1共15分)将大肠杆菌接种到适宜的细菌培养基上,加盖后,用不同的方式处理,并放置在不同的温度环境中,培养24 h后,观察所得结果,列表如下: 

              编号

              a

              b

              c

              d

              e

              f

              处理

              方法

              接种大肠杆菌

              接种大肠杆菌并在中央覆盖一吸有抗生素X的圆纸片

              接种大肠杆菌并在中央覆盖一吸有抗生素Y的圆纸片

              接种大肠杆菌,表面全被醋覆盖

              接种大肠杆菌

              无接种细菌

              温度(℃)

              40

              40

              40

              40

              0

              40

              观察结果

              全表面浑浊

              纸片周围呈现一片清晰区,其余部位表全表面

              全表面浑浊

              全表面
              清晰

              全表面清晰

              清晰

              根据上述实验结果,回答下列问题。

              (1) 将编号a和f比较可知,有____________的培养基表面会变浑浊。

              (2) 将编号e和a的结果比较可知,____________不适合大肠杆菌生长。

              (3) 将编号d和a的结果比较可知,____________不适合大肠杆菌生长。

              (4) b和c的结果说明______________________________________________________。

              (5) 假定在细菌的培养过程中,分离获得了不能合成某种维生素的营养缺陷型菌株。请设计一个实验以鉴定这种维生素的类型。 

              第一步:将变异菌株接种到________________培养基上扩大培养。 
              第二步:配制一系列培养基,每种培养基为只添加某一种维生素的“完全培养基”。 
              第三步:________________________________________________________________。 
              第四步:________________________________________________________________。 

              (6) 若已分离获得不能合成某种维生素的营养缺陷型菌株,可采用____________________方法进行短期保存,要想长期保存可采用____________________方法。

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