（1）.【生物——选修1生物技术实践】

  酸牛奶酒是在牛奶中加入乳酸菌和酵母菌混合发酵而成的一种乳饮料。回答下列有关问题：

（1）发酵所用牛奶在加入菌种前应进行_______（消毒、灭菌）。

（2）已知“改良MC琼脂培养基”中含有碳酸钙，遇酸溶解而使培养基变得透明；“孟加拉红琼脂培养基”含氯霉素，可抑制绝大多数细菌的生长。对乳酸菌进行计数时应选择上述_____________培养基，用_______________________方法接种，挑选出_________________的菌落进行计数。

（3）对乳酸菌、酵母菌双菌混合培养和各自单独培养过程中的活菌数进行定时检测，结果见下图。由图可知，双菌培养时两种菌的最大活菌数均高于其单独培养时，从代谢产物角度分析，其原因可能是__________________________________________。双菌培养过程中两种生物的种间关系是____________、____________。

（2）.【生物——选修3现代生物科技专题】

我国一科研团队将小麦液泡膜Na⁺/K⁺逆向转运蛋白基因（TaNHX2基因）转移到水稻细胞内，获得了转基因耐盐水稻新品种。回答下列有关问题：

（1）为保证目的基因在水稻细胞中能够表达，运载体上应含有特定的__________（复制原点、启动子、标记基因）

（2）水稻的转化过程为：将水稻幼胚接种到诱导培养基上，经过_______过程，培养出愈伤组织，然后用________________法，将目的基因和相关功能片段整合到愈伤组织细胞的染色体DNA上，最后诱导愈伤组织形成水稻植株。

（3）为验证外源基因整合到水稻基因组后是否转录，可从转基因植株的细胞中提取所有mRNA并反转录成_________，再以反转录产物为模板，利用TaNHX2基因特异引物，通过____________方法进行基因扩增。若以根细胞为材料扩增结果为阳性（有产物生成），以叶细胞为材料扩增结果为阴性（无产物生成），则说明__________________________________________________

（4）将生长至4叶期的转基因幼苗转入高浓度的NaCl溶液中培养，进行耐盐试验，用非转基因幼苗作为对照。培养30天后观察现象，若__________________________________则说明转基因植株获得了耐盐特性。

[生物——选修1：生物技术实践]

有机磷农药是用于防治植物病虫害的含磷有机化合物，广泛应用于农业生产中．有时会造成瓜果蔬菜等食品农药残留超标。不少品种对人、畜的毒性很强，人误食后如不及时医治就会危及生命，某班同学欲从土壤中分离高效降解有机磷农药的微生物。请回答下列问题：

（1）为了获得能降解有机磷农药的微生物菌种，可在被有机磷农药污染的土壤中取样，并在含有碳源、氮源及________等的选择培养基上添加适量的________进行选择培养。

（2）将获得的3种待选微生物菌种甲、乙、丙分别接种在1L含20mg有机磷农药的相同培养液中培养（培养液中其他营养物质充裕、条件适宜），观察实验开始到微生物停止生长所用的时间，甲、乙、丙分别为32小时、45小时、16小时，则应选择微生物________（填“甲”“乙”或“丙”）作为菌种进行后续培养，理由是________。

（3）制备固体培养基的基本步骤是计算→________→溶化→分装→加棉塞→包扎→________→倒平板。

（4）若要测定培养液中选定菌种的菌体数，既可在显微镜下用________直接计数，也可选用________法统计活菌数目。

在盛产柿子的某地，生物小组开展柿子酒、柿子醋生产的相关活动。

（1）土壤中的酵母菌计数：

在秋季的柿子园中，落地的柿子流出果汁的周围土壤中有酵母菌大量生长繁殖。

①用灭过菌的小铁铲、信封取该处土样，并在________旁称取10g土样，加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。而后进行系列稀释操作：吸取锥形瓶中土壤液的上清液________mL，转移至盛有9mL无菌水的大试管中充分摇匀，依次等比稀释，获得稀释至10¹、10²、10³、10⁴倍的土壤液的稀释液。

②为测定土壤中酵母菌的数量，选用第①步中所获得的10²、10³、10⁴倍的土壤液的稀释液，并依次分别吸取0.1mL进行平板涂布操作。在适宜条件下培养，当菌落数目稳定时，对各稀释度涂布的三个平板进行菌落计数（如下表）。

则每克土壤样品中的酵母菌数量约为________个。要使该实验所得数据可靠，还应该实施的操作是________。

（2）柿子醋生产菌的制备：

   为去掉酵母菌，挑取变酸的柿子酒内的菌膜于________℃进行纯化培养，获得如图所示菌落分布。应从________（填“甲”“乙”或“丙”）区域中挑取部分菌落制玻片观察，选择所需菌种。

（3）柿子酒、柿子醋的制作（发酵装置如下图所示）：

①排气口弯管设置的目的是________。

②可通过装置中的________对发酵情况进行及时监测。此时，若采用血细胞计数板对发酵液的酵母菌观察计数，与（1）中计数方法相比，该计数方法测得的酵母菌数自较________。

③柿子醋可在柿子酒生产的基础上改变________进行生产。

[生物——选修1：生物技术实践]

有机氯为高毒性农药，在环境中有高残留、难降解的特点：为清除有机氯农药厂废弃场地中的高浓度有机氯污染，科研人员计划从受污染的土壤中筛选出能高效分解有机氯的细菌菌株。

（1）筛选分解有机氯的菌株时，应将土壤样品稀释，接种到以________为唯一碳源的培养基上，从功能上讲，该培养基属于________。配制此类培养基的原则是：人为提供有利于________生长的条件，同时________。

（2）若对土壤中分解有机氯的菌株进行计数，一般采用________法进行菌株接种。培养一段时间后，统计平板上的________，就能推测样品中能分解有机氯的________数。用这种方法统计的菌落数________（填“大于”、“小于”或“等于”）显微镜直接计数测得的菌株数。

[生物——选修1：生物技术实践]

生活中，部分食品或饮料与微生物的发酵密不可分。回答下列关于微生物的培养及其运用的问题：

（1）不同微生物对营养的需求存在一定差异，但都能归纳为4类营养，即水、________、氮源和________。

（2）为增加分泌高效果胶酶的微生物的浓度，应该用________（填写物理状态）培养基。探究不同微生物分泌的果胶酶的活性实验，所用材料是果汁，那么该实验的自变量是________。

（3）制备果酒时，发酵菌为________，该发酵菌能将葡萄糖转化成酒精和CO₂，如图是某同学设计的发酵装置，该装置的优点有________。

（4）制备果醋时，发酵菌在________（填“有氧、无糖”“无氧、有糖”或“有氧、有糖”）条件下，能将乙醇转化成________，进而转化成乙酸。

[生物——选修1：生物技术实践]

   β—胡萝卜素可在人体的小肠、肝脏等器官转化成维生素A，因此β—胡萝卜素可用于治疗因缺乏维生素A而引起的疾病。回答下列有关制备β—胡萝卜素和纯化三孢布拉霉的问题：

（1）工业生产上，提取天然β—胡萝卜素的方法主要有三种，一是从植物中提取，二是从大面积养殖的________中获得，三是利用微生物的发酵生产。

（2）胡萝卜中富含β—胡萝卜素，从胡萝卜提取β—胡萝卜素的方法为________。影响该方法的主要因素是________，同时还受到原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、________等条件的影响。

（3）三孢布拉霉是一种可用于生产β—胡萝卜素的霉菌，培养三孢布拉霉时，培养基中一定要含有水________、________和无机盐等营养成分。

（4）纯化兰孢布拉霉时，固体培养基上菌落的分布情况如下图1、图2所示，则图1、图2分别是采用________法和________法接种的。

[生物——选修1：生物技术实践]

生物兴趣小组试图探究牛和山羊的瘤胃中的微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如表所示，实验步骤如图所示。请分析回答问题：

（2）实验需要振荡培养，原因是                  。转为固体培养时，常采用              的方法接种，获得单菌落后继续筛选。

（3）在实验过程中：①培养基、培养皿；②玻棒、试管、锥形瓶、吸管；③瘤胃中液体．其中需要灭菌是    填序号）．

（4）分离分解尿素的细菌实验时，甲同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落．甲同学实验结果差异的原因可能有       （填序号）①取样不同②培养基污染③操作失误④没有设置对照

（5）以尿素为唯一氮源的培养基培养“目的菌”后，加入指示剂后变红色，说明“目的菌”能分解尿素．理由是                                       。

一、[生物——选修1：生物技术实践]

大肠杆菌是寄生于人和动物肠道中的细菌，其代谢产物能与染料伊红美蓝反应，使菌落呈黑色。下面是其培养基配方：

回答下列问题：

（1）该培养中，蛋白胨为大肠杆菌提供的主要营养有________和维生素。从物理性质来看，该培养基属于________培养基。

（2）对该培养基进行灭菌时，可采用________法。在接种大肠杆菌前，需先将灭菌后的空白培养基放在恒温箱中培养一段时间，观察是否有菌落生成，其目的是________。

（3）为检测严重污染水体中大肠杆菌数量，将水样适当稀释后，取样涂布在上述平板培养基中，应选择颜色为________的菌落进行计数。该方法是通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数，其原理是________。

二、[生物——选修3：现代生物科技专题]  

据报道，尽管存在巨大争议，世界上首例“三亲婴儿”仍然于2016年4月在墨西哥诞生。三亲婴儿的培育技术路线如下。

回答下列问题：

（1）三亲婴儿培育技术中，过程A使用的技术是________；在体外受精前需对精子进行________处理；由“受精卵→三亲婴儿”过程中，需用到的胚胎工程技术有早期胚胎培养和________。

（2）利用三亲婴儿培育技术可以避免三亲中________（填“捐献者”、“母亲”或“父亲”）中的________（填“常染色体上”、“性染色体上”或“线粒体中”）的基因缺陷传给孩子。

（3）三亲婴儿与体细胞克隆动物多利羊在遗传物质来源上的主要区别是________。