4.
分析下列材料,回答有关基因工程操作过程中的问题:
(1)如图表示目的基因在DNA分子中的相对位置及利用PCR技术(多聚酶链式反应)扩增目的基因过程中第一轮循环产生的产物:
①PCR技术的原理是利用了________。
②与体内DNA复制相比较,PCR反应要在一定的缓冲溶液中才能进行,并且要严格控制________条件。
③PCR中加入的引物有________种。
④请绘出以3链为模板经PCR扩增的产物________。
(2)用两种识别序列不同的限制酶M和N切割(识别序列和切割位点如图)某种质粒后,通过凝腔电汰分离分析得下表:
使用限制酶 |
酶切结果(单位:Kb) |
酶M |
1.0、5.0、10.0 |
酶M+酶N |
1.0、2.0、3.0、4.0、6.0 |
则:①在该质粒中,N酶的切割位点有________个。
②若将M酶与N酶切出的DNA末端用________酶相互连接后,对于该连接部位序列是否仍可以用M酶、N酶进行切割:________(填“都可以”、“都不可以”或“只有一种可以”)。