（1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：第一步是目的基因的获取，第二步是基因表达载体的构建，第三步是将目的基因导入受体细胞，第四步是          ▲         

①通常在第一步和第二步的操作中需要相同的工具酶是          ▲           

②利用PCR技术扩增目的基因的过程中，目的基因受热形成单链并与引物结合，在   ▲     酶的作用下延伸形成DNA。

③采用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞后，培养该细胞再生成植株的过程中，往往需要使用植物激素，人为地控制细胞的           ▲          。

④如果转基因植物的花粉中含有毒蛋白，将引起的安全性问题包括     ▲            （多选）。

    A．生物安全  B．环境安全    C．食品安全    D．伦理道德问题

⑤蛋白质工程的基本原理是：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的        ▲            序列，所以蛋白质工程实质是对基因直接操作的。

（2）请回答下列有关单克隆抗体制备的问题：

①与动物细胞融合过程相比，植物体细胞杂交在细胞融合之前要用    ▲      ，以获得原生质体。

②骨髓瘤细胞和产生免疫反应的动物的脾脏细胞中的B淋巴细胞融合时，由于可能产生多种融合细胞，因此还需对融合细胞进行            ▲        ，且要适时克隆化培养。

（3）请回答下列有关胚胎工程的问题：

   ①在胚胎移植过程中，供、受体母牛选择好后，要用激素进行同期发情处理的原因是       ▲        ，

     以保证移植的胚胎能够继续正常发育。

   ②人类的胚胎发育过程中，细胞分化开始于    ▲        阶段。

①预期蛋白质功能②推测应有的氨基酸序列③表达(转录和翻译)④形成预期功能的蛋白质⑤合成相对应的脱氧核苷酸序列(基因)⑥设计预期的蛋白质结构

下图表示利用现代生物技术生产某种动物蛋白的流程示意图，请分析回答下列问题：

(1)该生产流程中应用到的现代生物技术有____________、______________和蛋白质工程。

(2)蛋白质工程中，要对蛋白质结构进行设计改造，必须通过基因修饰或基因合成来完成，而不直接改造蛋白质，原因是____________________________。

(3)图中A、B分别表示___________________________、___________________。

(4)为提高培育成功率，进行②过程之前，对受体动物的处理是用______________进行同期发情处理，对早期胚胎的处理是取其部分细胞用目的基因探针进行______________检测。

(1)图中cDNA文库________(填“大于”、“等于”或者“小于”)基因组文库。

(2)①过程提取的DNA需要________________的切割，B是________________过程。

(3)为在短时间内大量获得目的基因，可用________________扩增的方法，其原理是____________________________________。

(4)农杆菌中的Ti质粒上的________________具有可转移至受体细胞并且整合到受体细胞染色体的DNA上的特点。目的基因能否在棉株体内稳定遗传的关键是______________________________________________________________________，可以用________________________技术进行检测。

(5)如果要想使该酶活性更高或具有更强的耐受性，需要对现有蛋白质进行改造，这要利用基因工程的延伸——蛋白质工程。首先要设计预期的________________________，再推测应有的氨基酸序列，找到相对应的________________________________________。

(1)该生产流程中应用到的现代生物技术有________________________、________________________。(写出其中两种)

(2)图中A、B分别表示________________________________________、________________________________。