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            • 1.

              经人工诱变获得的天冬氨酸缺陷型菌株,菌体自身不能合成天冬氨酸,必须从外界环境中获取天冬氨酸才能生长繁殖。下图是科研人员利用“影印法”筛选天冬氨酸缺陷型菌株的部分过程(注:基本培养基中不含氨基酸,完全培养基中含所有种类的氨基酸)。回答下列问题:


                  (1)过程①接种的方法是________________。待测培养皿中的培养基是___________(答“基本”或“完全”)培养基。

                  (2)过程②是将印在同一块丝绒布上的菌落,先后转印至两个不同的平板上。该过程应该先转印到_______________(答“基本”或“完全”)培养基上,原因是____________________。

                  (3)完成②过程的转印并在28℃的培养箱中培养2天后,两个平板上出现的菌落有的相同,有的不同。完全培养基上出现的菌落A和菌落B中,不可能是天冬氨酸缺陷型菌株的是_________菌落(答“A”或“B”),原因是___________________。

                  (4)为了进一步鉴定筛选到的菌株确实是天冬氨酸缺陷型菌株,科研人员又制备了甲、乙两个平板,这两个平板中营养成分的差异是________________。将待鉴定菌种接种到两个平板中,置于适宜条件下培养一段时间后,若观察到两个平板中菌落的生长情况是__________,则说明该菌株是天冬氨酸缺陷型菌株。

                  (5)临时保存该菌种时,可将菌种接种到试管的______上,在合适的温度下培养。长期保存时可采用________的方法。

            • 2.

              植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题:

              (1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶,该酶是由_________________3种组分组成的复合酶。

              (2)在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)时,CR可与纤维素形成_____色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的__。

              (3)为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落,某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表):


               

              酵母膏

              无机盐

              淀粉

              纤维

              素粉

              琼脂

              CR

              溶液

              培养

              基甲

              +

              +

              +

              +

              -

              +

              +

              培养

              基乙

              +

              +

              +

              -

              +

              +

              +

              注:“+”表示有,“-”表示无。

              据表判断,培养基甲____(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是_______________________;培养基乙____(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是___________________________。

            • 3. 苯酚是工业生产排放的有毒污染物质,自然界中存在着能降解苯酚的微生物.某工厂产生的废水中含有苯酚,为了降解废水中的苯酚,研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株,筛选的主要步骤如图所示,①为土壤样品,请回答下列问题:

              (1)②中培养菌株的选择培养基中应加入________作为碳源,②中不同浓度碳源的培养基________(A.影响;B.不影响)细菌的数量,如果要测定②中活细菌数量,常采用______________法.

              (2)④为对照,微生物在④中不生长、在⑤中生长,④与⑤培养基的主要区别在于_______________;使用____________法可以在⑥上获得单菌落.采用固体平板培养细菌时进行倒置培养是为了防止                             .

            • 4.

              在生产研究上,常常需要进行微生物的培养和计数。回答下列与微生物的培养与利用有关的问题

              (1)下图是利用______________法将微生物接种到固体培养基上,把混合的菌种逐步稀释分散获得______________菌落。接种后培养基应______________放在37℃恒温培养箱中进行培养。

              分析下面培养基的配方:NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4•7H2O、KCl、H2O。若此培养基用于筛选尿素分解菌,则应除去上述培养基成分中的________,并加入______________和________物质,以补充其生活所需的碳源和氮源。培养基中加入酚红作指示剂的原因是尿素分解菌能合成________将尿素分解为氨,使培养基pH发生改变,酚红由黄变红,使菌落周围呈现红色。

              (3)三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量。在对应稀释倍数为106的培养基中,取0.2ml稀释液涂布,得到以下统计结果:

              甲同学涂布了1个平板,统计的菌落数是260;

              乙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是210、240和246,取平均值232;

              丙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是21、212和256,取平均值163;

              在三位同学的统计中,____________同学的统计结果是相对准确可信的。按照该同学的结果,每毫升原液中的菌体数是______________。用这种方法测得的菌体数比实际活菌数量______________。

            • 5.

              塑料袋造成的“白色污染”早已成为地球公害,塑料袋的自然分解需要20-1000年不等.2008年7月3日加拿大媒体报道:16岁的高中生丹尼尔-伯德从土壤中找到了一类假单胞杆菌,能将聚乙烯塑料的自然降解过程缩短至3个月,而且分解产物只有水和二氧化碳.伯德也因此被誉为“塑料袋的克星”.以下是伯德寻找到聚乙烯降解菌的大致过程.请回答:

              (l)根据你的生活经验推测,伯德这项研究的“土壤样品”最可能取自于______.
              (2)图中“…”表示对土壤悬浮液进行一系列的梯度稀释,目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞.从而能在Ⅰ号培养基表面形成单个______.接种培养后,统计菌落数,通常活菌的实际数目要比统计的菌落数_______。

              (3)对培养基灭菌的常用方法是________________。接种前需要检测使用的培养基是否被污染,方法是__________________________。

              (4)I号培养基属于______培养基,其作用是使目的菌能“脱颖而出”.如图采用的接种方法为______.

              (5)使用Ⅱ号培养基的目的是使目的菌数目增多,若对目的菌进一步培养,则其增长呈____型曲线增长。Ⅱ号培养基中必须包含水、无机盐、______等基本营养成分.从物理性质来看,Ⅱ号培养基中________(填“不能”或“能”)添加琼脂.假设该同学发现培养基上细菌数目过多连成一片,说出一种可能的原因并提出合理的处理措施。原因:__________________________;

            • 6.

              根据下面的实验装置图(图甲、乙)和果酒的生产工艺流程图(图丙)回答问题:


              (1)提取“玫瑰精油”可用上图________所示装置。图丙为葡萄果酒生产工艺流程图,葡萄榨汁前需要除去果柄,此操作的顺序是在冲洗之________进行的。

              (2)制作果酒时可选用图乙的装置。为适当提高果酒的生产速率,进气口应________

              (3)若是从混杂的微生物中分离酵母菌应使用________(填“选择”或“鉴别”)培养基。

              (4)若进一步制作果醋,需适时通入________。当缺少糖源时,醋酸菌生产果醋的反应简式为________

            • 7.

              在生产研究上,常常需要进行微生物的培养和计数。回答下列与微生物的培养与利用有关的问题:

              (1)下图是利用______________法将微生物接种到固体培养基上,把混合的菌种逐步稀释分散获得单个菌落。接种后培养基应______________放在37℃恒温培养箱中进行培养。

              (2)分析下面培养基的配方:NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4•7H2O、KCl、H2O、琼脂。若此培养基用于筛选尿素分解菌,则应除去上述培养基成分中的________,并加入______________和_____________。培养基中加入酚红作指示剂的原因是尿素分解菌能合成________将尿素分解为氨,使培养基pH发生改变,使菌落周围呈现红色。

              (3)三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量。在对应稀释倍数为106的培养基中,取0.2ml稀释液涂布,得到以下统计结果:

              甲同学涂布了1个平板,统计的菌落数是260;

              乙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是210、240和246,取平均值232;

              丙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是21、212和256,取平均值163;

              在三位同学的统计中只有一位同学的统计结果是相对准确可信的,按照该同学的结果,每毫升原液中的菌体数是______________。

              (4)实验结束后,使用过的培养基应该进行_____________处理后,才能倒掉。

              (5)用这种方法测定密度,实际活菌数量要比测得的数量______,因为_______________. 

            • 8.

              根据各类微生物的形态结构特点和新陈代谢类型,利用选择培养基和鉴别培养基,结合显微镜镜检以及菌落特征,可以把混杂在一起的大肠杆菌、硝化细菌、乳酸菌、酵母菌、金黄色葡萄球菌、圆褐固氮菌、尿细菌、纤维杆菌分离开来。下面是分离筛选的方法步骤,请根据各个步骤的条件,填写空格中的内容:

              首先配制一系列不同性质的固体培养基,然后进行高温灭菌。再将上述微生物的混合液分别接种到各种培养基上培养。

              (1)利用无氮培养基可筛选出________________。

              (2)用不含有机碳源的选择培养基可筛选出_________________.

              (3)酵母菌的筛选需要在常规培养基中另加人_______________。

              (4)用含较高浓度NaCl的培养基可选择出________________。

              (5)利用伊红一美蓝培养基培养混合菌,菌落呈黑色是____________,挑取该菌落单独培养,结合显微镜镜检和进一步用伊红——美蓝鉴别培养基来确定。

              (6)在无氧环境下培养混合菌,同时加入一定浓度的乳酸,使培养基pH充分降低,利用菌落特征,结合显微镜镜检,选取生长优势的菌落,即可分离出________________。

              (7)利用碳源为纤维素的液体培养基可筛选______________________。

              (8)若筛选尿细菌,则配制的培养基特点是________________________。初步筛选后为了进一步验证分解尿素的细菌是否存在,常用的方法是        

              (9)在上述实验接种时可采用平板划线法,操作结束为什么仍需要灼烧接种环?                                                           

            • 9.

              苹果醋是指苹果汁经发酵而成的苹果原醋,再兑以苹果汁等原料而制成的饮品。如下图是苹果醋的制作流程简图,请据图回答:


              (1)过程①、②所用的微生物在结构上最明显的区别是____________。这两个过程所需发酵的条件(环境因素)最明显的区别有_______、______。

              (2)过程①、②中产物的检测,除了嗅味和品尝外,还可分别用___________和____________检测。

              (3)若要在过程②的发酵产物中分离出所需菌种,需进行纯化培养。纯化培养的原理是:在培养基上得到_____________________________,即可获得较纯的菌种。常用的接种方法有平板划线法和_______________,配制固体培养基所用的凝固剂是___________。

            • 10. (10分)为提高玉米产量,科学家在育种和栽培中进行研究。下图是关于玉米培养的过程,请回答:

              (1)玉米秸秆的主要成分是          ,酵母菌不能直接使用,要利用C1酶和CX酶分解成          后,再经            酶分解成葡萄糖才能供给酵母菌使用。

              (2)取茎尖进行组织培养,发育成植株D,取D的花药培养成幼苗,经秋水仙素处理后发育成为植株G。从细胞分裂方式上分析,E→F过程中进行了________分裂;从育种方式上分析,D→G属于____________育种。

              (3)D植株上的小孢子母细胞形成精子所经历的分裂方式是____________________。

              某个时期对离体刺激最敏感,一般来说在________期,花药培养成功率最高。

              (4)选取茎尖放入A瓶中培养,是因为__________________________________________。

              如果选取D植株茎的切段放入A瓶培养,首先要进行____________

              (5)C和F试管苗不能直接栽培到大田中,要进 行____________________________。

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