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            • 1. 某科研机构欲培养出能降解柴油的细菌,做了相关的研究.请回答下列相关问题:
              (1)从土壤中分离能降解柴油的细菌,需从 ______ 的地方取土壤样品5g,加到含100mL,培养液中,30℃条件下震荡培养5天,该培养液中 ______ 作为细菌的唯一碳源.
              (2)考虑到土壤样品中降解柴油的细菌数目较少,可重复第(1)小题中的培养方法,重复培养的目的是 ______ .如果只为分离能降解柴油的细菌而不对细菌进行计数,可采用 ______ 法将培养的菌液接种到牛肉膏蛋白胨培养基中;接种时,需要用 ______ 法对接种环进行灭菌.
              (3)利用该菌,科研人员进一步探索其降解柴油的最佳条件,获得实验结果如图.

              ①根据上图可判断,该实验的目的是探究 ______ ______ 对细菌降解柴油的影响.
              ②如果某土壤中遭受柴油的严重污染,则需要将土壤浸出液稀释到柴油含量为 ______ mg.kg-1最有利于该细菌发挥作用.
            • 2. 为了分离和纯化高效分解石油的细菌,科研人员利用被石油污染过的土壤进行如图A所示的实验.

              (1)配制好的培养基通常使用 ______ 法灭菌.步骤③与步骤②中培养基成分相比,最大的区别是 ______
              (2)同学甲进行步骤④的操作,其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示.该同学的接种方法是 ______ ,出现图B结果可能的操作失误是 ______
              (3)同学乙也按照同学甲的接种方法进行了步骤④的操作:将1mL样品稀释100倍,在3个平板上分别接人0.1mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为56、58和57.据此可得出每升样品中的活菌数为 ______ 个.
              (4)步骤⑤需要振荡培养,原因是 ______
              (5)步骤⑤后取样测定石油含量的目的是 ______
            • 3. 苹果园广泛使用的一种除草剂(含氮有机物)在土壤中不易被降解,长期使用可污染土壤.为修复被该除草剂污染的土壤,科学工作者按甲图程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度低,含一定量该除草剂的培养基不透明).

              (1)制备土壤浸出液时,为避免菌体浓度过高,需将浸出液进行稀释处理.现有一升土壤浸出液,用无菌吸管吸取1mL液样至盛有9mL无菌水的试管中,再稀释103倍.各取0.1mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养,记录的菌落数分别为55、56、57,则每升原土壤浸出液样中菌体数为 ______
              (2)科学工作者为修复被该除草剂污染土壤的目的来选择细菌,所用培养基应该 ______
              (3)接种技术的核心是 ______ .在划线接种时,连续划线的目的是将聚集的菌种逐步 ______ ,培养时,只有很少菌落出现,大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是 ______ 或有氧条件抑制了这些细菌的生长.
              (4)在培养基上形成的菌落中,无透明带菌落利用的氮源主要是 ______ ,有透明带菌落利用的氮源主要是 ______ ,据此可筛选出目的菌.实验结果如乙图显示的A~E五种菌株中, ______ 是最理想菌株.
            • 4. 苹果醋是以苹果为原料,经酒精发酵,醋酸发酵酿制而成的一种营养丰富,风味优良的酸性饮品,请回答:
              (1)将乙醇转化为醋酸的代谢反应在醋酸杆菌细胞的 ______ 中进行,与酵母菌的果酒发酵相比较,醋酸杆菌需在 ______ 环境条件下完成醋酸发酵过程.
              (2)乙醇脱氢酶在醋酸发酵过程中对产酸的速率和产酸量起重要作用,可根据各种蛋白质分子的 ______ 进行电泳,将乙醇脱氢酶与其他蛋白质分子分离.
              (3)为选育耐较高酒精和醋酸浓度的醋酸杆菌,需先将少量优质果醋样液转移到含较高酒精和醋酸浓度的增殖培养液中进行培养,然后对培养液进行稀释并接种到含有CaCO3不透明的固体培养基上,培养并筛选出符合要求的菌株,从功能上分析,上述增殖培养液是一种 ______ ,培养液中酒精的作用是 ______ ;醋酸能溶解CaCO3,将稀释后的增殖培养液接种到含有CaCO3不透明的固体培养基上,培养后的植株选出 ______ 、菌落丰厚的单菌落做进一步的纯化.
              (4)若要测定培养液中活菌数量,常用 ______ 进行接种并对菌落进行计数;除此之外,测定微生物数量的常用方法还有 ______
            • 5. 在农业用地中发现一种广泛使用的除草剂(含氮有机化合物)在土壤中不易降解,长期使用可污染土壤.为修复被该除草剂污染的土壤,可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度一定,该除草剂的培养基不透明).

              (1)制备土壤浸出液时,为避免菌体浓度过高,需将浸出液进行 ______ 处理.
              (2)要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌,上述培养皿中培养基的特点是:固体培养基且 ______ .若需要调节培养基pH,应该在各种成分都溶化后且分装 ______ (填“前”或“后”)进行.
              (3)在划线前,接种环应该在酒精灯火焰上 ______ .培养后发现,只有很少菌落出现,大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是 ______ 或有氧条件抑制了这些细菌的生长.
              (4)在固体培养基上形成的菌落中,无透明带菌落利用的氮源主要是 ______ ,有透明带菌落利用的氮源主要是 ______ ,据此可筛选出目的菌.
              (5 )A细菌和B细菌都能降解该除草剂,研究发现以每克菌体计算,A细菌降解该除草剂的能力比B细菌要强,对此现象合理的假设是 ______
            • 6. 自生固氮菌是一类能独立固定氮气的细菌,其中有些好氧的种类能产生PHB(一种可以被生物降解的塑料).现欲获得高产PHB的自生固氮菌菌种,操作流程如下:采集土样→富集培养→分离、纯化培养→初步筛选PHB固氮菌→筛选高产PHB固氮菌→保存备用.回答下列问题:
              (1)富集培养时,为达到筛选自生固氮菌的目的,在配制培养液时不应添加 ______ .培养时要将装有培养液的锥形瓶放置在摇床上,其目的是 ______
              (2)进行分离、纯化培养时,要先将培养基倒入培养皿中,制成平板.此时所使用的培养基与富集培养时有所不同,其中添加了一定量的 ______ .倒平板时,要待高压灭菌后的培养基 ______ ,再在 ______ 附近操作.平板冷凝后,需置于恒温箱中1-2天后再用于接种,目的是 ______
              (3)分离纯化培养后,得到8种形态特征有所不同的单菌落.经染色鉴定,其中3种能产生PHB.那么如何进一步筛选出高产PHB的菌种呢?请说出你的实验思路. ______
            • 7. (1)为了检测大肠杆菌对抗生素的敏感性,在37℃培养箱中培养24h,使其均匀生长,布满平板.将分别含有A,B,C三种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,培养一段时间后,结果见图根据上述实验结果,为达到抗菌目的,最好选择的抗生素是 ______
              (2)治疗肺结核的常用抗生素是利福平,写出其抑菌机理: ______
            • 8. 生物柴油是一种可再生的清洁能源,其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗.科学家发现,在微生物M产生的脂肪酶作用下,植物油与甲醇反应能够合成生物柴油(如下图).

              (1)用于生产生物柴油的植物油不易挥发,宜选用 ______ ______ 方法从油料作物中提取.
              (2)筛选产脂肪酶的微生物M时,选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供 ______ ,培养基灭菌采用的最适方法是 ______ 法.
              (3)测定培养液中微生物数量,可选用 ______ 法直接计数;从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测 ______ ,以确定其应用价值;为降低生物柴油生产成本,可利用 ______ 技术使脂肪酶能够重复使用.
              (4)若需克隆脂肪酶基因,可应用耐热DNA聚合酶催化的 ______ 技术.
            • 9. 在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂(含氮有机化合物)在土壤中不易降解,长期使用可污染土壤.为修复被该除草剂污染的土壤,可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度低,含一定量该除草剂的培养基不透明).

              (1)制备土壤浸出液时,为避免菌体浓度过高,需将浸出液进行 ______ 处理.
              (2)要在长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌,从物理性质、用途方面来看,上述培养皿中的培养基应具有的特点是:在 ______  的培养基中加入 ______
              (3)在划线培养时,只有很少菌落出现,大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是 ______
              (4)在固体培养基上形成的菌落中,无透明带菌落利用的氮源主要是 ______ ,有透明带菌落利用的氮源主要是 ______ ,据此可筛选出目的菌.
              (5)若实验接种时用的是稀释涂布平板法,在统计菌落数目时得到4个平板,统计的数目分别为21、213、257、278,则对数据处理后取平均值计数为 ______ ,该方法往往比活菌的实际数目偏 ______ (高/低).
            • 10. 下表所示为培养某种微生物的培养基配方,请据此回答下列问题:
              NaNO3 Na2HPO4
              7H2O
              KH2PO4 MgSO4
              7H2O
              KCl 酵母膏 水解酪素 纤维素粉 蒸馏水
              1g 1.2g 0.9g 0.5g 0.5g 0.5g 0.5g 5g 定容至1000mL
              (1)根据上述配方可知该培养基是 ______  培养基(填“固体”或“液体”).该培养基为选择培养基,因为它只允许分解 ______ 的细菌生长,其他种类的细菌会因为 ______   生长受抑制.
              (2)培养该菌用的培养基通常采用 ______ 法进行灭菌,在培养基接种时应采用 ______ 法,该方法接种培养后的菌落,不可能是图中的 ______ (单选).

              (3)在长出菌落的培养基上,人们可以通过 ______  法对该细菌进行筛选,如果产生了 ______ 即可筛选出该菌.
              (4)若某同学用0.1mL稀释液在稀释倍数为106的培养基中共制作了四个平板,统计的菌落数分别为25、183、176和169,则1mL样品中的细菌数是 ______ 个.
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