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            • 1． 2015年诺贝尔奖生理学或医学奖授予屠呦呦、威廉·C·坎贝尔和大村智，以表彰他们发现了治疗疟疾的开创性疗法和治疗线虫门感染的新疗法。寄生虫生物学家威廉·C·坎贝尔利用大村智的链霉菌菌株，分离并纯化出了一种能有效对抗家养和畜牧动物的寄生虫成分命名为阿维菌素。阿维菌素随后被进一步化学修饰成为一种叫“伊维菌素”的物质，变得更加有效。这两个发现为人类对抗这些每年影响数亿人的疾病提供了有力的新手段，对提升人类健康、减少患者痛楚方面的意义是无可估量的。以下是从土壤溶液中分离链霉菌菌株的主要步骤：

              ①按以下配方配制培养基：


              ②将培养基在121℃下高压蒸汽灭菌20min。

              ③倒平板，冷却备用。

              ④用稀释涂布平板法接种。 

              ⑤将平板倒置，与28℃下培养7天。 

              据此回答问题：

              （1）培养基中为链霉菌提供碳源的物质是            ，提供氮源的物质是            。培养基中的重铬酸钾能够减少细菌、真菌的数量，故该培养基属于        培养基。

              （2）培养基pH的调节是在培养基灭菌            （填之前或之后）进行。

              （3）在倒平板之前，应将培养基冷却至       ℃左右才能进行；冷却凝固的平板要倒过来放置，原因是                                    。

              （4）从稀释倍数为104的稀释液中取0.1mL，涂布一个平板，某同学共涂布了3个这样的平板，统计的菌落数分别是201个、212个和256个，那么每克样品中的菌株数是         个。

              （5）下图所示的四种菌落分布图中，不可能由稀释涂布平板法得到的是__      _____。

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            • 2． 纤维素酶可以将哪种物质分解（　　）
              A．牛肉片
              B．鱼片
              C．滤纸条
              D．塑料条
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            • 3．

              34.下列叙述错误的是（   ）

              A．醋酸菌在有氧条件下利 用乙 醇产生醋酸
              B．酵母菌在无氧条件下利用葡萄糖汁产生酒精
              C．分解尿素的细菌利用尿素作为碳源
              D．腐乳制作利用了毛霉等微生物的蛋白酶和脂肪酶
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            • 4． 研究人员成功地从土壤中筛选到能产生纤维素酶的微生物．请就如何从土壤中获得纤维素分解菌回答以下问题：
              （1）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即 ______ ．
              （2）若获得纯净的菌株，常采用 ______ 进行接种，此过程所用的接种工具是接种环，操作时采用 ______ 灭菌的方法．
              （3）刚果红可以与纤维素等多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的 ______ 和葡萄糖发生这种反应．常用的刚果红染色法有两种：第一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应；第二种是在 ______ 时就加入刚果红． ______  （填“第一种”或“第二种”）方法会使菌落之间发生混杂．
              （4）如果观察到产生 ______ 的菌落，说明可能获得了纤维素分解菌．为了确定是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验．
              （5）如图为实验室培养和纯化菌种过程中的部分操作步骤，下列说法错误的是 ______
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              A．①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行
              B．步骤③中，每次划线前后都需对接种环进行灼烧处理
              C．步骤①中待倒入的培养基冷却后盖上培养皿的皿盖
              D．划线接种结束后，将图④平板倒置后放入培养箱中培养．
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            • 5． 选用下列实验材料能得到预期实验结果的是（　　）
              A．用35S标记噬菌体研究DNA的半保留复制
              B．用人的成熟红细胞观察DNA、RNA的分布
              C．用富含枯枝落叶的土壤分离纤维素分解菌
              D．用T细胞和骨髓瘤细胞融合制备单克隆抗体
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            • 6． 用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目。在某稀释浓度下某同学做了若干个平板并统计每个平板的菌落数，最接近样品中菌体数真实值的是(    )
              A．菌落数量最多的平板
              B．菌落数量最少的平板
              C．菌落数量适中的平板
              D．若干个平板菌落数量的平均值
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            • 7． （10分）某厂对苹果进行深加工的菌种筛选及生产流程如图甲所示．

                
              （1）苹果压榨过程中加入_________酶可提高榨汁率；在图甲的发酵罐I中，酵母菌进行酒精发酵的反应式为________________________________；发酵罐II需接种________菌，与发酵罐I相比，需要不断通入_____________。

              （2）图乙表示发酵罐I、II中主要物质的变化，曲线__________代表酒精的变化。可用___________________试剂检测酒精的有无。

              （3）为获得用于生产的理想的酵母菌菌种，需向平板内的固体培养基中加入一定量的_________进行选择培养；培养时平板须倒置，可防止_____________________________________；用稀释涂布平板计数法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，这是因为_______________________________________________________________________。

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            • 8． 培养基是微生物生长、分离、鉴别的营养基础，下列有关微生物培养及培养基的描述错误的是(　　)
              A．微生物培养基的配方中必须包含的成分有碳源、氮源、水、无机盐、生长因子及琼脂
              B．不论何种培养基，在各成分溶化后都要进行灭菌操作，灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌
              C．接种微生物常用的方法有平板划线法和稀释涂布平板法
              D．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂可以鉴定分解尿素的细菌
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            • 9． 下列生物学实验操作，能够顺利达到实验目的的是（   ）
              A．在固体培养基上稀释涂布大肠杆菌培养液以获得单菌落
              B．在接种酵母菌的新鲜葡萄汁中持续通入无菌空气以制作果酒
              C．土壤浸出液接种于牛肉膏蛋白胨培养基上以筛选出能分解尿素的细菌
              D．将切下的胡萝卜外植体直接接种在培养基上以获得愈伤组织
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            • 10． 已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：

              (1)显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用________染色。

              (2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以________为碳源的固体培养基进行培养。

              (3)若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用____________直接计数；若要测定其活菌数量，可选用________法进行计数。

              (4)为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35 ℃、40 ℃、45 ℃温度下降解10 g油脂所需酶量依次为4 mg、1 mg、6 mg，则上述三个温度中，________℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕________℃设计后续实验。

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