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          50条信息

            • 1.
              传统发酵技术和微生物分离、纯化过程中,无菌操作是微生物接种技术的关键。某实验小组欲从污水污染的污泥中筛选出脲酶细菌(脲酶可将尿素分解为氨)。回答下列问题:
              (1)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调节 ______ ;接种前要进行 ______ ,这种操作的目的是 ______ 。
              (2)在菌株筛选过程中,应将污泥样品稀释液接种于以 ______ 为唯一氮源的固体培养基上;并加入 ______ 指示剂加以鉴别。在第二次及其后的划线操作时,总是从 ______ 开始划线,该分离纯化方法称平板划线法。
              (3)进行分离分解尿素的细菌实验时,A同学从培养基上筛选出大约50个菌落,而其他同学只选择出大约20个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有 ______ (填序号)。
              ①所取土样不同     ②培养基被污染    ③接种操作错误    ④没有设置对照实验
              实验结束后,使用过的培养基应该进行 ______ 处理后才能倒掉。
            • 2.
              有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题:
              (1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以 ______ 为唯一碳源的固体培养基土,从功能上讲,该培养基属于 ______ 培养基。
              (2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即 ______ 和 ______ 。
              (3)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力 ______ 。
              (4)通常情况下,在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、 ______ 和 ______ 。无菌技术要求试验操作应在酒精灯 ______ 附近进行,以避免周围环境中微生物的污染。
            • 3.
              杀虫脒,又名氯苯脒,是一种有机氮农药,具有高效广谱杀虫杀螨的作用,但长期使用容易导致土壤污染,为探究能降解杀虫脒的细菌进行了以下实验。

              (1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、 ______ 、水、无机盐四类,该实验所用的选择培养基只能以杀虫脒作为唯一氮源,其原因是 ______ ,从功能上讲,该培养基属于 ______ 培养基。
              (2)微生物接种的方法很多,最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法,这两种方法在功能上的区别是 ______ ,此外, ______ 也是测定微生物数量的常用方法。
              (3)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力 ______ 。
              (4)通常情况下,在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和 ______ 。培养基一般不使用干热灭菌的原因是 ______ 。
            • 4.
              如表所示配方的培养基可筛选某种细菌,该细菌可以在该培养基上生长,进而形成菌落.回答下列问题:
              KH2PO4 1.4g
              Na2HPO4 2.lg
              MgS04•7H2O 0.2g
              葡萄糖 10.Og
              尿素 1.Og
              琼脂 15g
              将上述物质溶解后,用蒸馏水定容至1000mL
              (1)该培养基可筛选的细菌是 ______ ,判断的依据是 ______ .
              (2)如果从土壤中获取的样本含该细菌的数量较少,需要对样本中的细菌进行扩大培养,请判断能否用表格中的培养基来扩大培养 ______ (填“能”或“不能”),理由是 ______ .
              (3)如果需要对该细菌进行计数,则应用 ______ 法接种.为了确定该细菌确实属于所要分离的细菌,需要在培养基中加入 ______ 指示剂.另一种接种细菌的常用方法是 ______ .该方法在操作时,每一次划线前都要进行灼烧,目的是 ______ .
            • 5.
              下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验,请回答有关问题。
              (1)制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液。
              (2)为了得到更加准确的结果,选用适宜的方法接种样品:如图是利用 ______ 法进行微生物接种,把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面,为达到这一目的,操作上应注意 ______ 。
              (3)适宜温度下培养。
              结果分析:
              ①甲同学在稀释倍数为105的培养基中测得平板上菌落数的平均值为524个,那么每毫升样品中的细菌数是(接种时所用稀释液的体积为0.1mL) ______ 个。
              ②用这种方法所得的数量比实际活菌数量要 ______ ,因为 ______ 。
              (4)乙、丙同学测定同一样品中的细菌数。在对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下两种统计结果:乙同学在该浓度下涂布了平板,统计的菌落数为47;丙同学在该浓度下涂布了3个平板,统计的菌落数分别为43、54、326,然后取其平均值141作为统计结果。请评价这两位同学的实验结果的有效性。
              ①乙同学的结果 ______ ,原因是 ______ 。
              ②丙同学的结果 ______ ,原因是 ______ 。
              (5)丁同学采用血细胞计数板计数(规格为16×25,0.1mm3),统计4个中格中的细菌数,计算出每个小格所含细菌的平均数为2个,则每毫升样品中的细菌数是(稀释倍数为103) ______ 个。
            • 6.
              为了保障人体健康,国家对人工游泳池水质制定了一系列卫生标准,其中一项要求水中的大肠杆菌必须≤18个/mL.某兴趣小组对学校游泳馆大肠杆菌含量进行了统计,步骤如下:(1)制备培养基。除了需要提供水、碳源、氮源和无机盐等主要营养物质,培养基还需要满足微生物生长对pH、 ______ 以及 ______ 的要求。(2)接种并计数。统计样品中活菌的数目常用的方法是 ______ 。该方法理论依据是当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个 ______ 来源于样品稀释液中的一个活菌,通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有的活菌数目。为了保证结果准确,一般选择菌落数在 ______ (填范围)的平板进行计数。为了排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度,还需要设置 ______ 。(3)结果分析:该小组最后统计的菌落数往往比活菌的实际数目 ______ 。原因是 ______ 。
            • 7.
              大肠杆菌是寄生于人和动物肠道中的细菌,其代谢产物能与染料伊红美蓝反应,使菌落呈黑色.如表是其培养基配方:
              成分 蛋白胨 乳糖 磷酸二氢钾 琼脂 蒸馏水 2%伊红水溶液 0.5%美蓝水溶液
              含量 10g 10g 2g 20~30g 1000mL 20mL 13mL
              回答下列问题:
              (1)该培养基中,蛋白胨为大肠杆菌提供的主要营养有 ______ 和维生素.从物理性质来看,该培养基属于 ______ 培养基.
              (2)对该培养基进行灭菌时,可采用 ______ 法.在接种大肠杆菌前,需先将灭菌后的空白培养基放在恒温箱中培养一段时间,观察是否有菌落生成,其目的是 ______ .
              (3)为检测严重污染水体中大肠杆菌数量,将水样适当稀释后,取样涂布在上述平板培养基中,应选择颜色为 ______ 的菌落进行计数.该方法是通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数,其原理是 ______ .
            • 8.
              类胡萝卜素是一种常用的食品色素,并常用于临床治疗夜盲症等疾病.类胡萝卜素的主要来源是化学合成或从植物中提取,成本较高.科研人员尝试从光合细菌中提取类胡萝卜素,流程如图:

              (1)将少量污泥样品接入液体培养基中,培养基中加入铵盐和谷氨酸钠为光合细菌的生长提供 ______ ,培养基中没有加入有机碳,从功能上看这种培养基属于 ______ 培养基.
              (2)②将样品涂布到固体培养基之前要进行梯度稀释,为了防止混淆,应该在培养皿的 ______ 部位做好标记.从固体平板中挑选紫色非硫细菌(某光合细菌)的菌落,萃取效率主要取决于萃取剂的性质.通过③接种到新鲜培养基中继续培养,②、③过程需要重复几次,目的是 ______ .
              (3)从浸提离心干燥后的菌体中提取胡萝卜素常用萃取法,萃取剂应该具有的特点是 ______ ,萃取液的浓缩可直接使用 ______ 装置.
              (4)鉴定所提取的胡萝卜素样品常用的方法是 ______ ,鉴定过程中需用 ______ 作为对照.
            • 9.
              某些细菌能够合成纤维素--细菌纤维素(一种新型生物材料)。为了获得高产菌种,研究小组以木醋杆菌(一种好氧菌)为原始材料,拟通过紫外诱变的手段,筛选获得高产菌株A.请回答下列问题
              (1)与酵母菌相比,木醋杆菌在结构上的最大不同是 ______ 。
              (2)培养木醋杆菌的培养基中需要含有 ______ (填单糖名称),所起到的作用有 ______ 。
              (3)用紫外线可诱导木醋杆菌发生 ______ ,由于该变异 ______ ,所以在筛选之前需要对诱变后的菌液进行富集培养(将特定微生物的数量比例不断增高的一种培养方法)
              (4)从富集好的菌液中分离并计数所需菌种常用的方法是 ______ ,木醋杆菌产生纤维素的同时还会产生葡萄糖酸,葡萄糖酸会和培养基中的碳酸钙反应使培养基变透明,所以在加了碳酸钙的固体培养基上,需要挑选菌落直径/透明圈 ______ (填“较大”或“较小”)的菌落进行进一步的筛选。
              (5)可以用 ______ 方法对上一步挑选出来的菌落进行进一步的纯化。该方法中,每次划线前都要对接种环进行 ______ ,冷却后再从 ______ 开始划线。
            • 10.
              以下是在推进生态文明建设过程中,合理利用微生物的实例。
              ①农作物秸秆可用于还田、造纸、养殖蘑菇、生产乙醇等,既能解决集中焚烧污染环境问题,又能变废为宝。
              ②农业生产上广泛使用的除草剂在土壤中不易被降解,长期使用会污染土壤,可选育^降解该除草剂的细菌修复被污染的土壤。
              请回答:
              (1)用于生物工程的目的菌大多是从自然环境中筛选纯化出来的。在选育能分解除草剂(一类含氮有机物)的目的菌时,应将土壤浸出液接种在以 ______ 为唯一氮源的固体培养基上。对固体培养基进行灭菌处理常用的方法是 ______ ,为检测灭菌效果可对培养基进行 ______ 。
              (2)稻杆还田以及利用秸秆生产乙醇的过程都需要以纤维素为 ______ 的微生物。分离该类微生物时应用含纤维素的培养基进行培养,并加入 ______ 形成红色复合物进行筛选,目的菌应从周围有 ______ 的菌落中选取。
              (3)生产乙醇过程中常用的微生物是 ______ ,发酵过程中检测该微生物数量可采用的方法有显微直接计数(或血球计数板)法和 ______ ,后者统计得到的菌落数目往往比活菌的实际数目 ______ 。
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