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            • 1．
              已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶．脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产．回答有关问题：
              （1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用 ______ 染色．微生物A产生的油脂不易挥发，可选用 ______ （填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取．
              （2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以 ______ 为碳源的固体培养基进行培养．从功能上划分该培养基属于 ______ 培养基
              （3）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用 ______ 直接计数；若要测定其活菌数量，可选用 ______ 法进行计数．
              （4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中， ______ ℃条件下该酶活力最小．为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕 ______ ℃设计后续实验．
              难度：较易
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            • 2．
              如图表示利用“果胶酶-酵母菌联合固定凝胶珠”生产红葡萄酒的部分过程，请问答下列问题．

              （1）海荡酸钠能作为固定裁体的特点是 ______ ，在联合固定果胶酶和酵母菌之前，对海藻酸钠所作的操作是 ______ ．
              （2）果胶酶在果汁生产中具有重要的作用，把果胶酶和酵母菌固定在一起生产红葡萄酒的重要意义在于 ______ ．
              （3）果胶酶通常先与戊二醛交联，然后与活化的酵母菌一起用海藻酸钠包埋固定，这是因为 ______ ．
              （4）在初级发酵时一般温度控制在 ______ ，在发酵过程中，尤其要随时监控和调整发酵罐中的温度和pH，使其在适宜的范围内波动，其主要目的是 ______ ．
              难度：较易
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            • 3．
              嗜热土壤芽胞杆菌产生的β-葡萄糖苷酶（BglB）是一种耐热纤维素酶，为使其在工业生产中更好地应用，开展了以下试验：
              Ⅰ．利用大肠杆菌表达BglB酶
              （1）PCR扩增bglB基因时，选用 ______ 基因组DNA作模板．
              （2）图1为质粒限制酶酶切图谱．bglB基因不含图中限制酶识别序列．为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒，扩增的bglB基因两端需分别引入 ______ 和 ______ 不同限制酶的识别序列．
              （3）大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为 ______ ．
              Ⅱ．温度对BglB酶活性的影响

              （4）据图2、3可知，80℃保温30分钟后，BglB酶会 ______ ；为高效利用BglB酶降解纤维素，反应温度最好控制在 ______ （单选）．
              A.50℃B.60℃C.70℃D.80℃
              Ⅲ．利用分子育种技术提高BglB酶的热稳定性
              在PCR扩增bglB基因的过程中，加入诱变剂可提高bglB基因的突变率．经过筛选，可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因．
              （5）与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌相比，上述育种技术获得热稳定性高的BglB酶基因的效率更高，其原因是在PCR过程中 ______ （多选）．
              A．仅针对bglB基因进行诱变     B．bglB基因产生了定向突变
              C．bglB基因可快速累积突变    D．bglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变．
              难度：较易
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            • 4．
              某科研小组开展紫外线诱变选育脂肪酶高产菌株的研究．原始菌株1444粗壮假丝酵母经连续两次紫外线诱变，反复筛选，得到的突变株Z6和Z8．在40℃、pH 7.5条件下测定所产脂肪酶活性，分别比原始菌株提高了l26%、150%．回答下列问题：
              （1）由于突变是不定向，突变导致脂肪酶活性变化的可能结果有 ______ ．
              （2）科研人员对上述三个菌株所产生的脂肪酶特性进行研究，获如下结果

              实验一：为测定脂肪酶在不同pH值条件下的稳定性，科研人员分别取上述三种菌株所产的酶液各20mL，分别与等体积的pH5～9的缓冲液混匀，置于4℃冰箱保存24小时后，将pH调至7.5，再加入等量的底物溶液，测定酶的相对活性．结果如图，与原始菌株1 444相比，z6和z8的酶在不同pH条件下的 ______ ．测定酶的活性的实验温度为 ______ ℃．
              （3）实验二：分别取上述三种菌株的酶液各20ml，置于50℃恒温水浴处理60min，每隔10min取样一次，测定酶活性，同时测定三个对照组的酶活性并进行比较．本实验目的是 ______ ，对照组所用的酶液应如何处理？ ______ ．
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            • 5．
              为了比较甲、乙、丙三种微生物所产生的淀粉酶的活性，某生物兴趣小组以三种微生物提取液（提取液中淀粉酶浓度相同）为材料进行了如下实验：
              试管1 试管2 试管3 试管4
              实验操作 蒸馏水（mL 2 2 2 A
              pH=8缓冲液 0.5 0.5 0.5 0.5
              淀粉溶液（mL） 1 1 B 1
              甲生物提取液（mL） C
              乙生物提取液（mL） D
              丙生物提取液（mL） E
              37℃的水浴，保温1小时
              总体积（mL） 3.8 3.8 3.8 3.8
              滴加等量的碘液
              实验结果 颜色深浅程度 ++ - + F
              注：“+”显色，“+”越多显色越深；“-”不显色
              （1）F的颜色深浅程度为 ______ （用“+”或“-”表示）．
              （2）该实验的自变量是 ______ ；温度属于无关变量，保持相同即可，该说法是 ______ （填“对”、“错”）的．
              （3）生物体内酶的化学本质是 ______ ，其特性有 ______ 、 ______ ．
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            • 6． 某同学利用可溶性淀粉溶液、玉米种子提取液（含有α-淀粉酶）及相关试剂进行的实验如表所示，请回答下列问题：
              试管编号 A B C D E F
              质量分数为1%的可溶性淀粉溶液（mL） 2 2 2 2 2 2
              恒温水浴10min（℃） 0 20 40 60 80 100
              玉米种子提取液（mL） 1 1 1 1 1 1
              恒温水浴10min（℃） 0 20 40 60 80 100
              溶液混合，振荡后恒温水浴10min（℃） 0 20 40 60 80 100
              冷却后加入碘液 振荡后观察颜色变化
              观察并记录各试管内颜色的变化 +++ ++ - ++ +++
              （注：“+”表示碘液变蓝色，“-”表示碘液不变色）
              （1）上述实验的实验原理是 ______ ．
              （2）请填写表中C试管中液体颜色变化情况 ______ ．D试管中滴加碘液后不变蓝色，不变蓝色的原因是 ______ ．
              （3）A、F试管中蓝色最深的原因分别是 ______ ， ______ ．
              （4）该实验能否选用斐林试剂检测实验结果？ ______ ，理由是 ______ ．
              （5）据表能否推断α-淀粉酶的最适温度一定是60℃？ ______ ，理由是 ______ ．
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            • 7． 为获得果胶酶高产菌株，科研人员进行了下列分离、筛选、鉴定工作．
              （1）为分离果胶酶产生菌，科研人员配制了下表所示成分的培养基，该表空白处的两种成分是 ______ ．制备的培养基常用 ______ 法进行灭菌．
              K2HPO4 MgSO4 NaNO3 FeSO4 琼脂
              0.1g 0.5g 3g 0.01g 2g 15g 加至1L
              （2）科研人员将采集的果园土壤放入无菌水中，震荡混匀，制成悬液．为获得较均匀分布的单菌落，还需要将悬液进行 ______ ，用 ______ 法接种于固体培养基上．接种后的培养基 ______ 状态放人培养箱．
              （3）选择单菌落数目适宜的培养基，加入一定浓度的刚果红溶液（果胶与刚果红结合后显红色），一段时间后洗去培养基表面的刚果红溶液，观察并比较菌落 ______ 直径的比值，筛选果胶酶高产菌株．
              （4）将获得的菌株进行液体培养后，从培养液的 ______ （填“上清液”或“沉淀物”）获得粗提的果胶酶．将一定量的粗提果胶酶与适量果胶溶液混合，一定时间后测定吸光值来测定酶活性．进行吸光值测定时，需将 ______ 与等量果胶溶液混合，作为实验的对照．
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            • 8． 我国食品加工企业每年都会产生大量高浓度有机废水，如直接排放会造成严重污染．固定化酶技术可应用于高浓度有机废水的处理，科研人员对固定化蛋白酶进行了以下实验研究．
              实验一：研究人员选择了硅胶、活性炭和大孔树脂为载体制备固定化蛋白酶，三种载体的固定化率如图1所示．
              实验二：为探究pH对三种载体固定化酶活性的影响．研究人员将高浓度污水的pH值分别调至4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0，各取500ml．分别使其与等量不同载体的固定化酶混合，然后在37℃的水浴中反应6小时．测定每个反应器中氨基酸的生成速率．测定结果如图2所示．据图回答下列问题：

              （1）由图1可知，三种载体蛋白酶固定化率最低的是______．与水溶性酶相比，固定化酶处理高浓度污水的优点是______．
              （2）实验二的自变量是______，无关变量是______．（至少写两点）
              （3）从图2中可得出的结论：______；______．
              （4）结合图1和图2分析，进行高浓度污水的净化时应选择______载体的固定化酶．
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            • 9． 谷物中淀粉酶活性是影响啤酒发酵产酒的重要因素，某科研小组为寻找啤酒发酵的优良原料，比较了小麦、谷子、绿豆萌发前后淀粉酶活性，其实验过程及结果如下，分析回答：
              ①谷物的萌发：称取等量小麦、谷子、绿豆三种谷物的干种子，都均分为两份，其中一份侵泡2.5h，放入25°C恒温培养箱，至长出芽体为止．
              ②酶提取液的制备：将三种谷物的干种子和萌发种子分别布置于研体中，加入石英砂和等量蒸馏水研磨、离心，制备酶提取液．
              ③反应进程的控制：分别取②制备的酶提取液1ml置于不同的试管中，加入1ml，1%的淀粉溶液，25°C保温5min后，立即将试管放入沸水浴中保温5min．
              ④吸光度的测定：在试管中加入？、摇匀、加热，当溶液由蓝色变为砖红色后，用分光度计依次测定各试管的吸光度．
              ⑤酶活性的计算：将测定值与标准麦芽糖溶液吸光度比时，计算出淀粉酶活性，结果如下：
              （1）本研究的自变量是______、______．
              （2）步骤②中加入“石英砂”的目的是______；步骤③中立即将试管在沸水浴中保温5min的作用是______，避免因吸光度测定先后对实验结果的影响：步骤④“？”加入的试剂是______．
              （3）实验结果表明，谷物萌发过程中淀粉酶活性______，其意义是______．
              （4）本实验对生产实践的指导意义是应优先选择______作为啤酒发酵的原料．
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            • 10． 为获得果胶酶高产菌株，科研人员进行了下列分离、筛选、鉴定工作．
              （1）为分离果胶酶产生菌，科研人员配制了下表所示成分的培养基，该表空白处的两种成分是 ______ ．制备的培养基常用 ______ 法进行灭菌．
              （2）科研人员将采集的果园土壤放入无菌水中，震荡混匀，制成悬液．为获得较均匀分布的单菌落，还需要将悬液进行 ______ ，用 ______ 法接种于固体培养基上．接种后的培养基 ______ 状态放人培养箱．
              （3）选择单菌落数目适宜的培养基，加入一定浓度的刚果红溶液（果胶与刚果红结合后显红色），一段时间后洗去培养基表面的刚果红溶液，观察并比较菌落 ______ 直径的比值，筛选果胶酶高产菌株．
              （4）将获得的菌株进行液体培养后，从培养液的 ______ （填“上清液”或“沉淀物”）获得粗提的果胶酶．将一定量的粗提果胶酶与适量果胶溶液混合，一定时间后测定吸光值来测定酶活性．进行吸光值测定时，需将 ______ 与等量果胶溶液混合，作为实验的对照．
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