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            • 1. 昆虫学家用人工诱变的方法使昆虫产生基因突变,导致酯酶活性升高,该酶可催化分解有机磷农药.近年来已将控制酯酶合成的基因分离出来,通过生物工程技术将它导入细菌体内,并与细菌内的DNA分子结合起来.经过这样处理的细菌仍能分裂繁.请根据上述资料回答:
              (1)人工诱变在生产实践中已得到广泛应用,因为它能提高 ______ ,通过人工选择获得 ______
              (2)酯酶的化学本质是,基因控制酯酶合成要经过 ______ ______ 两个过程.
              (3)通过生物工程产生的细菌,其后代同样能分泌酯酶,这是由于 ______
              (4)请你具体说出一项上述科研成果的实际应用 ______
            • 2. 如图1为某种常用质粒的序列图,Lac Z基因编码的酶能使无色的X-gal变为蓝色,Ampr为氨苄青霉素抗性基因.图2为目的基因的序列及其相关限制酶的识别序列.请回答下列问题:

              (1)若要筛选成功导入目的基因的重组质粒,培养基中应加入的物质有 ______ ,构建重组质粒时需要的工具酶有 ______ ,对获取的目的基因可用PCR技术对其扩增.
              (2)实验小组用BamH I和Bgl II两种限制酶切割目的基因和质粒,构建重组质粒后导入大肠杆菌中,在筛选重组质粒的培养基上,若大肠杆菌菌落显蓝色,说明导入了 ______ .没有导入任何外源DNA的大肠杆菌 ______ (填“能”或“不能”)在该培养基上生存.
              (3)若质粒和目的基因用BamH I和Bgl II两种限制酶切割后,用DNA连接酶相连,然后再用BamH I和EcoR I切割成功连接后的重组质粒,可获得长度不同的 ______ 种DNA片段.
            • 3. 如图表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图右表示一种质粒的结构和部分碱基序列.现有MspI、BamHI、MboI、SmaI 4种限制性核酸内切酶,它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG.

              (1)图左DNA分子中的一条脱氧核苷酸链中相邻两个脱氧核苷酸之间由 ______ (化学键)连接.
              (2)若用限制酶SmaI完全切割图中含有目的基因D的DNA片段,其产物长度分为 ______
              (3)为了提高试验成功率,需要通过 ______ 技术扩增目的基因,以获得目的基因的大量拷贝.在目的基因进行扩增时,加入的引物有A、B两种,引物的作用是 ______ ,若该目的基因扩增n代,则其中含有A、B引物的DNA分子有 ______ 个.
              (4)若将图右中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是 ______ .经检测,部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达,其最有可能的原因是 ______
              (5)导入目的基因的植物细胞,经过植物组织培养技术得到幼苗,该技术利用的原理是 ______
            • 4. 继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后,膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展.最近,科学家培育出一种转基因小鼠,其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中.请回答:
              (1)将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞,常用方法是 ______
              (2)在基因工程中,将目的基因与运载体结合时必须用 ______ 酶.进行基因转移时,通常要将外源基因转入 ______ 中,原因是 ______
              (3)通常采用 ______ 技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组.
              (4)在研制膀胱生物反应器时,应使外源基因在小鼠的 ______ 细胞中特异表达.
              (5)为使外源基因在后代长期保持,可将转基因小鼠体细胞的 ______ 细胞中构成重组细胞,使其发育成与供体具有相同性状的个体.该技术称为 ______
            • 5. 埃博拉病毒(EBO)呈纤维状,EBO衣壳外有包膜,包膜上有5种蛋白棘突(VP系列蛋白和GP蛋白),其中GP蛋白最为关键,能被宿主细胞强烈识别.请回答下列问题:
              (1)基因疫苗指的是DNA疫苗,要获得编码GP蛋白抗原的基因疫苗,首先要提取出病原体的RNA,并将RNA ______ 要大量获得表达特异抗原的基因,可采用PCR技术进行扩增.
              (2)以GP蛋白作为疫苗比基因疫苗更安全,其原因是GP蛋白自身没有感染能力,但保留有 ______ .为了从牛分泌的乳汁中生产GP蛋白,在基因导入牛受体细胞前,基因的首段必须含有使其仅能在牛的乳腺细胞中特异性表达的 ______ ,才能驱动转录过程.这种通过分泌乳汁来生产所需要的药品的转基因动物称为 ______
              (3)为了提高胚胎的利用率,可采用胚胎分割技术.进行胚胎分割时,应选择发育良好、形态正常的囊胚或 ______ 进行操作.在对囊胚阶段的胚胎进行分割时,要注意将 ______ .转基因牛是否培育成功,可以通过 ______ 技术从分子水平进行检测.
              (4)科研人员利用经EBO免疫后小鼠的 ______ 与鼠的瘤细胞进行融合成杂交瘤细胞,培养后可以获得纯净的单一品种抗体,其特点是 ______ ,可以用此抗体与药物制成“生物导弹”,抗击EBO.
            • 6.
              如图表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图右表示一种质粒的结构和部分碱基序列.现有MspI、BamHI、MboI、SmaI 4种限制性核酸内切酶,它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG.

              (1)图左DNA分子中的一条脱氧核苷酸链中相邻两个脱氧核苷酸之间由 ______ (化学键)连接.
              (2)若用限制酶SmaI完全切割图中含有目的基因D的DNA片段,其产物长度分为 ______ .
              (3)为了提高试验成功率,需要通过 ______ 技术扩增目的基因,以获得目的基因的大量拷贝.在目的基因进行扩增时,加入的引物有A、B两种,引物的作用是 ______ ,若该目的基因扩增n代,则其中含有A、B引物的DNA分子有 ______ 个.
              (4)若将图右中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是 ______ .经检测,部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达,其最有可能的原因是 ______ .
              (5)导入目的基因的植物细胞,经过植物组织培养技术得到幼苗,该技术利用的原理是 ______ .
            • 7. (16分)育种工作者从高粱的基因组中分离出磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因(Ppc基因),利用农杆菌介导的转化系统将其转入水稻体内,以提高水稻的光合效率。质粒上有 Pst Sma EcoR Apa 四种限制酶切割位点。请回答下列相关问题:

              (1)基因工程的核心步骤是                          ;构建含抗病基因的表达载体A时,应选用限制酶                          分别对含Ppc基因的DNA和质粒进行切割,再用             使其连接。构建的表达载体A除含有目的基因、标记基因外,还应有                              

              (2)欲在体外获得大量的Ppc基因,常采用          技术扩增,其中所用的酶的特点是                              

              (3)水稻组织细胞具有                   ,因此,可以利用

                                        技术将导入Ppc基因的水稻组织细胞培养成植株。

            • 8.

              下图表示科学家采用不同方法培育良种牛的过程,a~h为操作过程,请据图回答有关问题:

              (1)“试管牛”技术的操作流程是       (填字母)。

              (2)d操作的名称是        ,受体子宫内胚胎发育的过程中,细胞不断分裂,其分裂方式为       

              (3)图中所示的过程中用到的激素是        ,其目的是获得更多的卵母细胞,经受精后可得到早期胚胎;图中早期胚胎属于胚胎发育的    阶段,其中胚胎干细胞来源于    (填数字标号)。

              (4)过程h常用的方法是        。为了能确定目的基因已经导入到受精卵中,相应的载体需要有        以便于进行检测。

            • 9. Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞.科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗.其技术流程如图:

              (1)步骤①中,在核移植前应去除卵母细胞的 ______ (结构).
              (2)步骤③中,需要构建含有Rag2基因的表达载体.可以根据Rag2基因的 ______ 设计引物,利用PCR技术扩增Rag2基因片段.用Hind III和PstI限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段.为将该片段直接连接到表达载体,所选择的表达载体上应具有 ______ 酶的酶切位点.
              (3)为检测Rag2基因的表达情况,可提取治疗后小鼠骨髓细胞的 ______ ,用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验.
            • 10. Ⅰ.请回答下列有关生物工程的问题:
              (1)在转基因鼠的培育过程中,目的基因导入鼠受精卵的常用方法是 ______ .为鉴定外源目的基因是否转录,取转基因幼鼠相关细胞的RNA,与标记的 ______ 探针进行分子杂交.
              (2)植物体细胞杂交技术中,促进细胞融合的物理方法是 ______ ______ 或电激,杂种细胞形成的标志是 ______ ,杂种细胞用 ______ 技术培养成植株.
              (3)在试管牛的培育过程中,要使精子和卵母细胞在体外成功结合,需要对精子进行 ______ 处理.若需获取更多的卵细胞一般要对雌性个体注射 ______ ,使其超数排卵.防止多精入卵的两道屏障依次为 ______ ______
              Ⅱ.实施西部大开发,要切实保护好生态环境,大力开展植树种草,治理水土流失,防治沙漠化等.
              (1)从生态学的角度看,保护环境、保护生态系统稳定性的关键是保护 ______
              (2)从能量流动的角度看,在农田管理措施中,赚草抬虫的目的是 ______ .为生产无污染的食品,治虫措施中不宜大量喷施化学杀虫剂,替代使用化学杀虫剂的方法,一是 ______ ,二是 ______ .采用基因工程的手段,将 ______ 转入农作物中,形成具有抗虫性的新品种.
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