如图①～⑤列举了五种育种方法，请回答相关问题：

（5）方法③中秋水仙素作用的原理是                     。

（1）采用A→B育种过程培育抗某种除草剂的棉花时，若用γ射线照射幼苗，其目的是______________ ；若对抗性的遗传基础做进一步探究，可以选用抗性植株与纯合敏感型植株杂交，如果____________，表明抗性是隐性性状。F₁自交，若F₂的性状比为15(敏感)：1（抗性），则可初步推测该性状由________对等位基因控制。

（2）图中C→D育种方法所依据的原理是_________________。

图中培育新品种的处理过程发生了哪种变异？__________；该粉红棉新品种自交后代发生性状分离出现了另一种新品种白色棉，该新品种白色棉的基因型是________(标出相应染色体)；图中基因A、a分别控制抗虫与不抗虫性状，已知I^A基因显性纯合时植株不能存活，则图中新品种自交产生的子代中，抗虫粉红棉的概率是__________。

（1）如果要在短时间内获得较多的目的基因，通常采用_____________技术，该技术原理是_____________。在操作步骤中需要加热至90﹣95℃使________，然后降温至55﹣65℃，其目的是_______________。

（2）在进行细胞培养时，对培养液要进行无菌处理，通常还添加一定量的__________，以防止培养过程中的污染；使用合成培养基时，通常加入_____________等一些天然成分。

（3）如果检测发现目的基因被成功导入了受体细胞，但却没有检测到目的基因相对应的蛋白质，应考虑位于目的基因首端的_____________和末端的_____________是否设计好，并从这方面进一步改善。

（4）用于基因治疗的基因种类有三类，其中一类是反义基因，即通过产生的mRNA分子，与病变基因产生的____________进行互补，来阻止____________合成。

玉米(2N＝20)是重要的粮食作物之一。已知玉米的高秆、易倒伏(A)对矮秆、抗倒伏(a)为显性，抗病(B)对易感病(b)为显性，控制上述两对性状的基因分别位于两对同源染色体上。现有两个纯合的玉米品种甲(AABB)和乙(aabb)，据此培养AAbb品种。根据材料分析回答下列问题：

(1)由品种AABB、aabb经过a、b、c过程培育出新品种的育种方式称为______

(2)将图1中F₁与另一玉米品种丙杂交，后代的表现型及其比例如图2所示，则丙的基因型为_____________

(5)上述育种方法中，最不容易获得矮秆目标品种的是[ ]_____________ ，原因是____________________________

科学家应用现代生物技术培育出了荧光转基因克隆兔,培育原理如下,据图回答有关问题:

（1）上述过程中运用的生物技术有 （写出三个即可）。将重组质粒导入甲兔的成纤维细胞时,通常用      法。

（2）培养的空气中通常需含5%CO₂,目的是           。此时还应该对所需细胞进行筛选,方法是                               。

（3）胚胎移植前必须对代孕母兔和供体母兔用激素进行 处理。如果想获得核基因型相同的多个胚胎,常采取的方法是              

以下是科学家采用不同方法培育良种牛的过程，a～h为操作过程，请据图回答有关问题：

(1)图中c的操作名称是胚胎分割，d、f的操作名称是________。

(2)图中用到的激素是_______ _，其目的是获得更多的卵母细胞，卵母细胞受精后发育可得到早期胚胎；图中早期胚胎属于胚胎发育的囊胚期，其中胚胎干细胞来源于________(填数字标号)。

(3)过程h常用的方法是______________。

(4)图中A、B牛的性别________(填“相同”“不相同”或“不一定相同”)。

肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实现表达增强后，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。

　　　　　图1　　　　　　　　　　　　　　　    图2

（1）进行过程①时，需用     酶切开载体以插入let-7基因。进行过程②时，需用     酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于细胞培养。采用PCR技术扩增let-7基因时，在PCR反应体系的主要成分应包含:扩增缓冲液(含Mg²⁺)、水，4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、耐高温的DNA聚合酶和引物Ⅰ和引物Ⅱ等，若在该反应体系中，目的基因扩增了5代，则具有引物Ⅰ的DNA所占的比例理论上为     。

（2） 研究发现，let-7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图2。据图分析，可从细胞中提取    

进行分子杂交，以直接检测1et-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中    (填“RAS mRNA”或“RAS蛋白质”)含量减少引起的。

（3） 现有—长度为1000碱基对(bp)的DNA分子，用限制酶切开后得到仍是长度为1000bp的DNA分子，说明此DNA分子的形态为     。

（4）某线性DNA分子分别用限制酶Hind Ⅲ和SmaⅠ处理，然后用这两种酶同时处理，得到如下片段(kb为千个碱基对):

可以推知限制酶Hind Ⅲ和SmaⅠ在此DNA分子中分别有     个识别序列。两酶同时处理后得到的片段，再用限制酶EcoRⅠ处理，结果导致3.0 kb的片段消失，产生一种1.5 kb的新片段;那么如果用限制酶HindⅢ和EcoRⅠ将该线性DNA分子进行切割，则可得到长度分别为     的片段。 

假设A、b代表玉米的优良基因，这两种基因是自由组合的。现有AABB、aabb两个品种，为培育出优良新品种AAbb，可以采用的方法如图所示。

(1)由品种AABB、aabb经过①②③过程培育出新品种的育种方法称为________。若经过②过程产生的子代总数为1552株，则其中基因型为AAbb的植株理论上有________株。基因型Aabb的类型经过过程③，子代中AAbb与aabb的数量比是________。

(2)过程⑤常采用________的方法由AaBb得到Ab个体。与“过程①②③”的育种方法相比，“过程⑤⑥”育种的优势是____________________________________________。

(3)过程④在完成目的基因与运载体的结合时，必须用到的工具酶是______、        。与“过程⑦”的育种方法相比，“过程④”育种的优势是______________________。

白僵菌可感染农业害虫，常作为防治害虫的菌剂。由于白僵菌对除草剂草丁膦敏感且杀死害虫的能力较弱，科研人员对其进行基因工程改造，流程如图所示。

（1）苏云金芽孢杆菌产生的毒蛋白，能有效杀死害虫。已知该基因的全部序列，科研人员通过___________法和PCR技术获得大量毒蛋白基因片段。据图分析，将毒蛋白基因和质粒连接获得重组质粒1的过程需要用到的工具酶是__________    ___（写具体的限制酶）和DNA连接酶。

（2）重组质粒1和Bar基因（草丁膦抗性基因）各自用Xba I酶处理，得到酶切片段。将Bar基因与重组质粒1连接，获得重组质粒2。将重组质粒2与经       处理过的白僵菌菌液混合进行转化，重组质粒2在白僵菌细胞内被修复。一段时间后用含有_____________的平板培养基进行筛选，获得含有Bar基因的重组白僵菌。

（3）提取上述重组白僵菌全部mRNA，加入_________酶，获得cDNA。在获得的产物中加入毒蛋白基因引物进行PCR反应，用以检测毒蛋白基因是否完成了_______________。

（4）科研人员将重组白僵菌喷涂于植物叶片上，以此饲喂饥饿处理的害虫，记录单位时间内的_____________，以判断重组白僵菌的杀虫效果。