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            • 1.

              回答有关基因工程的问题。

              (1)构建基因工程表达载体时,用不同类型的限制酶切割DNA后,可能产生黏性末端,也可能产生__________末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接,则应选择能使二者产生________(填“相同”或“不同”)黏性末端的限制酶。

              (2)利用大肠杆菌生产人胰岛素时,构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等,其中启动子的作用是______________________。以利于表达载体进入;为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA,可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交,该杂交技术称为____________。为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成__________,常用抗原—抗体杂交技术。

              (3)如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞,先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的________中,然后用该农杆菌感染植物细胞,通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的__________上。

            • 2.

              黄连素具有促进排卵和提高受孕率的生殖疗效。作为一种重要的生物碱,黄连素可从中草药黄连、黄柏、三颗针等植物中提取。临床常用来治疗细菌性胃肠炎、痢疾等消化道疾病。请回答下列有关问题。

              (1)某生物科研小组利用植物组织培养技术快速大量繁殖含黄连素的黄连等植物。该技术利用的原理是____________________。在培养过程中,离体的黄连茎切段需经过__________、__________,然后培养出根、芽,才能形成完整的黄连小植株。

              (2)黄连素具有促进排卵的疗效。卵子在发生过程中,减数第二次分裂是在__________的过程中完成的。获能的精子与卵子相遇时,首先发生 ____________________反应,使顶体内的酶释放出来。卵子完成受精的标志是____________________。 

              (3)某生物科研小组想利用基因工程的方法获取催化合成黄连素的酶。基因工程操作过程中的核心步骤是__________;将目的基因导入大肠杆菌细胞内,首先要用__________处理细胞,使之成为感受态细胞。

            • 3. [选修模块3:现代生物科技专题]
              请回答胚胎工程和基因工程方面的问题:
              (1)应用胚胎工程技术可以培育出“试管牛”.试管牛的培育需经过体外受精、 ______ 、 ______ 以及在母体中发育和产出等过程.
              (2)在“试管牛”的培育过程中,要使精子和卵母细胞在体外成功结合,需要对精子进行处理,使其 ______ .另外,培养的卵母细胞需要发育至减数第二次分裂的中期,该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和 ______ .
              (3)通常奶牛每次排出一枚卵母细胞,采用激素处理可使其一次排出多枚卵母细胞,常使用的激素是 ______ .
              (4)利用基因工程可以获得转基因牛,从而改良奶牛的某些性状.基因工程的四个基本操作步骤是 ______ 、基因表达载体的构建、 ______ 和 ______ .若要获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素,则所构建的基因表达载体必须包括:某种牛乳腺分泌蛋白基因启动子、 ______ 、 ______ 、 ______ 和复制原点等.将该基因表达载体导入受体细胞所采用的方法是 ______ (显微注射法、农杆菌转化法),为获得能大量产生人干扰素的转基因牛,该基因表达载体应导入的受体细胞是 ______ (受精卵、乳腺细胞).
            • 4. 家蚕细胞具有高效表达外源基因能力.将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养,可以提取干扰素用于制药.
              (1)进行转基因操作前,需用 ______ 酶短时处理幼蚕组织,以便获得单个细胞.
              (2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达,需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的 ______ ______ 之间.
              (3)采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞.改PCR反应体系的主要成分应该包含:扩增缓冲液(含Mg2+)、水,4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、 ______ ______
              (4)利用生物反应器培养家蚕细胞时,的细胞会产生接触抑制.通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中,这样可以 ______ 增加培养的细胞数量,也有利于空气交换.
            • 5. (10分)右图表示五种不同的育种方法示意图,请根据图回答下面的问题:   

               

              (1)图中A、D方向所示的途径表示      育种方式,其中从F1到F2再到Fn连续多代自交的目的是为了提高          的含量,且从F2开始逐代进行人工选择是为了淘汰              ;A→B→C的途径表示         育种方式。这两种育种方式都是从亲本杂交开始,这样做的目的是                  ,比较两种育种方式,后者的优越性主要表现在             

              (2)B常用的方法为                    

               (3)E方法所运用的原理是              

               (4)C、F过程中最常采用的药剂是        

               (5)由G→J的过程中涉及到的生物工程技术有:植物组织培养和__________      _。

            • 6. 番茄的抗病(R)对感病(r)为显性,高秆(D)对矮秆(d)为显性,控制上述两对相对性状的基因分别位于两对同源染色体上.为获得纯合高秆抗病番茄植株,研究人员采用了如图所示的方法.

              (1)若过程①的F1自交3代,产生的后代中纯合抗病植株占 ______
              (2)过程②,若只考虑F1中分别位于n对同源染色体上的n对等位基因,则利用其花药离体培育成的单倍体幼苗的基因型,在理论上应有 ______ 种;若单倍体幼苗通过加倍后获得M株番茄,通过筛选得到的高秆抗病植株的基因型为 ______ ,约有 ______ 株.
              (3)过程③由导入抗病基因的叶肉细胞培养成转基因植株需要利用 ______ 技术.
              (4)过程④“航天育种”方法中主要的变异类型是 ______ .卫星搭载的种子应当选用刚萌发的而非休眠的种子,原因是 ______
            • 7. (生物一现代生物科技专题)
              人类在预防与诊疗传染性疾病过程中,经常使用疫苗和抗体.已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原,其疫苗生产和抗体制备的流程之一如图:
              请回答:
              (1)过程①代表的是 ______
              (2)过程②构建A基因表达载体时,必须使用 ______ ______ 两种工具酶.
              (3)过程③采用的实验技术是 ______ ,获得的X是 ______
              (4)对健康人进行该传染病免疫预防时,可选用图中基因工程生产的 ______ 所制备的疫苗.对该传染病疑似患者确诊时,可从疑似患者体内分离病毒,与已知病毒进行 ______ 比较;或用图中的 ______ 进行特异性结合检测.
            • 8.
              基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤,分别是: ______ .
            • 9.
              继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后,膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展.最近,科学家培育出一种转基因小鼠,其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中.请回答:
              (1)将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞,常用方法是 ______ .
              (2)在基因工程中,将目的基因与运载体结合时必须用 ______ 酶.进行基因转移时,通常要将外源基因转入 ______ 中,原因是 ______ .
              (3)通常采用 ______ 技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组.
              (4)在研制膀胱生物反应器时,应使外源基因在小鼠的 ______ 细胞中特异表达.
              (5)为使外源基因在后代长期保持,可将转基因小鼠体细胞的 ______ 细胞中构成重组细胞,使其发育成与供体具有相同性状的个体.该技术称为 ______ .
            • 10.
              Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞.科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗.其技术流程如图:

              (1)步骤①中,在核移植前应去除卵母细胞的 ______ (结构).
              (2)步骤③中,需要构建含有Rag2基因的表达载体.可以根据Rag2基因的 ______ 设计引物,利用PCR技术扩增Rag2基因片段.用Hind III和PstI限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段.为将该片段直接连接到表达载体,所选择的表达载体上应具有 ______ 酶的酶切位点.
              (3)为检测Rag2基因的表达情况,可提取治疗后小鼠骨髓细胞的 ______ ,用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验.
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