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            • 1.

              下图表示微生物接种、分离实验中的一些步骤,请回答:

                 

              (1)实验步骤A称为_________。进行步骤A之前,要对培养基进行灭菌,常采用的方法是_________________。

              (2)实验步骤B的目的是_____________,步骤C在沾取菌液前应将接种环_______________。

              (3)上图所示接种微生物的方法是_______,操作过程中,在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线,这样做的目的是________________________。

            • 2.

              人和哺乳动物的尿中含有尿素,大量尿素的存在会对环境造成污染.土壤中有些细菌含有脲酶,可通过降解尿素作为其生长的氮源。现对土壤中的这类细菌进行分离实验,请回答下列问题:

              (1)分离培养细菌时必须进行无菌操作,包括培养基和各种器皿都必须是无菌的,常用的灭菌方法有 ____________、_____________ 和灼烧灭菌。

              (2)将样液进行一系列的梯度稀释,然后接种培养.在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在__________附近进行操作.接种后的培养皿倒置于37℃的恒温培养箱中培养。

              (3)用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌,从功能上划分该培养基属于_______培养基.若培养基中存在有分解尿素的细菌,其菌落周围会出现红色环带,这是由于尿素被分解产生的______使pH升高,酚红指示剂产生的颜色变化,从而证明这一菌株可以尿素为氮源.变色区域越大,表明该菌株利用尿素的能力_______。

              (4)实验室筛选微生物通常须人为提供有利于目的菌生长的________、________、pH等条件,抑制或阻止其他微生物的生长,能达到此目的的培养基称为________。

              (5)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶,该酶是由3种组分组成的复合酶.其中的葡萄糖苷酶可将__________分解成____________。

              (6)在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)时,CR可与纤维素形成___________色复合物.用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的___________。

            • 3.

              幽门螺杆菌感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后,进行分离培养。实验基本步骤如下,请回答:


              (1)幽门螺杆菌能够以尿素为唯一氮源,是因为能够合成______________________,培养基中加入酚红指示剂,若有幽门螺杆菌,则菌落周围会出现___________环带。

              (2)上述培养过程中,能够“浓缩”幽门螺杆菌的步骤是_____________________。

              (3)采用稀释涂布平板法,通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌,其原因是_____________________________________________。

              (4)上述实验统计结果往往比原患者样品中含有的幽门螺杆菌活菌数_______________(偏大、偏小、相同)。

            • 4.

              回答下列(一)、(二)小题。

              (一)请回答下列有关微生物培养、发酵过程中的相关问题。

              (1)在“分离以尿素为氮源的微生物”的实验中,配制好的尿素固体培养基加上封口膜后用高压蒸汽灭菌方法灭菌,冷却后加入用_________漏斗过滤的尿素溶液。漏斗用后需用适宜浓度的___浸泡,再用蒸馏水冲洗,干燥后保存。 

              (2)在“果汁中的果胶和果胶酶”实验中,可以用___(A.50%乙醇 B.70%乙醇 C.90%乙醇 D.95%乙醇)鉴别果胶。果胶酶可以从黑曲霉或______中提取,配制这些微生物的培养基时需要将pH调至____。

              (3)果酒制作果醋过程中,通入空气需要经过_____过滤。果醋发酵结束的标志是pH_____。 

              (二)下图表示动物细胞克隆和制备单克隆抗体的相关过程,请回答相关问题:

              (1)过程①常应用____方法导入重组诱导基因后得到干细胞;部分干细胞经过诱导可分化成全身的不同组织或器官,说明这些细胞具有____性。在动物细胞培养过程中培养液中必须通入O2和CO2,通入CO2的目的是__________。

              (2)该过程中甲和乙细胞可经过生物诱导剂______的作用形成丙细胞。取一个丙细胞,放在含大量失去____的小鼠成纤维细胞的特定培养体系中培养,最后产生大量的细胞群,这种方法为____法。 

              (3)下列关于经③和④过程得到单克隆抗体的叙述,错误的是_____。

              A.该过程应用了细胞膜具有流动性的原理    B.该过程应用了动物细胞融合和动物细胞培养技术

              C.丙细胞要具有分泌多种抗体的能力   D.丙细胞的形成先通过筛选得到杂交瘤细胞,再进行抗体检验

            • 5.

              影响酱油卫生指标的细菌主要有耐热的芽孢杆菌和耐盐菌。某生物兴趣小组欲从酿制的酱油中筛选出耐盐菌,请结合所学知识回答下列问题:

              (1)在筛选过程中,应将酱油接种于含有_________的固体培养基上,从功能上讲,该培养基属于______培养基。

              (2)对该培养基灭菌的方法是_____________,接种过程需在__________________附近进行。

              (3)若要统计活的耐盐菌的数目,把酱油接种到培养基上常采用的方法为__________;统计结果一般用菌落来表示,统计的菌落数往往比活菌的实际数目_________,原因是_________________________________。

              (4)在纯化耐盐菌的过程中,发现培养基上的菌落连成一片,最可能的原因是______________________________

            • 6. 烧伤病人容易感染绿脓杆菌,引起化脓性感染,比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素都是非常经典的抗绿脓杆菌的药物。临床使用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验。实验时,从病人身上获取少量样本,按照一定的实验步骤操作,以确定该病人体内的绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性。

              (1)获取绿脓杆菌单菌落:

                  配制适于绿脓杆菌生长的培养基,培养基中的营养成分一般含有______、氮源、生长因子、水和无机盐,调节pH至7,灭菌处理,待培养基冷却至50℃时,在_________附近倒平板。经过选择培养、鉴别等步骤获得单菌落。

              (2)检测绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性:

                  取该单菌落适当稀释,用___________法接种于固体培养基表面,使其均匀生长,布满平板。将分别含等剂量的比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素的相同大小的小滤纸圆片均匀置于该平板上的不同位置,适宜条件培养一段时间,结果是含不同抗生素的滤纸片周围均出现透明圈(如上图),这说明绿脓杆菌对上述抗生素________(填“敏感”或“不敏感”);含头孢菌素的滤纸片周围的透明圈比含美罗培南的小,这说明绿脓杆菌对头孢菌素的敏感性比美罗培南________(填“强”或“弱”);含比阿培南、碳青霉烯类的滤纸片周围的透明圈也比含美罗培南的小,且比阿培南透明圈中出现了一个菌落,请推测此菌落产生的可能原因:一是________________,二是_________________。

              (3)根据上述实验结果,为达到抗绿脓杆菌的目的,对于该患者来说最好应选用抗生素_____________。

            • 7.

              某化工厂的污水池中含有一种有害的、难以降解的有机化合物A。专家用化合物A、磷酸盐、镁盐及微量元素配制的培养基,成功地筛选出能高效降解有机化合物A的目的菌,实验步骤如图所示。请分析回答下列问题。

                 (1)培养基中加入化合物A的目的是筛选             ,这种培养基属于          培养基。

                 (2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的             ,实验中需要振荡培养,由此推断“目的菌”的代谢类型是             

                 (3)培养若干天后,应选择培养瓶中化合物A含量             的培养液转入新的培养液中连续培养,使“目的菌”的数量           

                 (4)转为固体培养时,常采用           法接种,获得单菌落后再筛选。

                 (5)若研究“目的菌”的生长规律,将单个菌落进行液体培养,可采用            的方法进行计数,以时间为横坐标,以           为纵坐标,绘制生长曲线。

                 (6)实验结束后,使用过的培养基应该进行             处理后,才能倒掉。

            • 8.

              某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功筛选到能高效降解化合物A的非固氮细菌(目的菌)。实验的部分步骤如下图所示。请回答下列问题:

              (1)培养基中的化合物A能为目的菌的生长繁殖提供_____     ___,这种培养基从功能上分属于        培养基,配制培养基时各种成分在溶化后分装灭菌前必须进行          ,在整个微生物的分离和培养中,获得纯净培养物的关键是____                    。筛选过程中所用的培养基常用              方法灭菌,培养皿常用                方法灭菌。

              (2)实验过程中振荡培养,“振荡”的目的是                  。由此推测“目的菌”的代谢类型是                   。

              (3)某同学计划统计污水池中“目的菌”的活菌数目,应用               方法接种。从设计实验的角度看,需要设计                  作为对照组,以此证明培养基制备是否合格。

            • 9.

              土壤中的细菌数量多、分布广,包括自养细菌和异养细菌。自养细菌能直接利用光能或无机物氧化时所释放的化学能同化CO2合成有机物(例如硝化细菌),异养细菌从有机物中获得能源和碳源(例如纤维素分解菌),人类根据需要从土壤中分离提纯各种细菌。回答下列问题:

              ⑴若要筛选硝化细菌,培养基中一般不加入碳源,从功能上分,该培养基属于______培养基。获取纯净培养物最关键的是                              

              ⑵要鉴别所分离的细菌是否为纤维素分解菌,需在培养基中加入CR溶液,观察培养基中是否出现以纤维素分解菌为中心的      ,从而可筛选纤维素分解菌。操作的每一步都要在                       附近完成。⑶在鉴定胡萝卜素粗品时,如果标准样品只形成一种色素带,而提取样品形成了多种色素带,其原因可能是                                                 

              ⑷茉莉花精油的提取流程如图:


              过程A表示                 ,向粗提精油中加入无水硫酸钠的目的是                

            • 10.

              乳酸菌是一种厌氧型细菌,以下为乳酸菌筛选的步骤:

              ①制备乳酸菌筛选培养基(MRS培养基)(成分:蛋白质、牛肉膏、无机盐、葡萄糖和水) 

              ②调节pH,并将NRS培养基和CaCO3溶液灭菌后混合,倒平板制备培养基。 

              ③梯度稀释样品,选择合适的稀释倍数接种。 

              ④挑选产生____的菌落。 

              请回答下列问题: 

              (1)乳酸菌常用于制作泡菜,用于制作泡菜的泡菜坛要在坛盖边沿的水槽中注满水,其目的是_______________________,制作过程中亚硝酸盐含量的变化是_________________。 

              (2)MRS培养基中蛋白胨可以作为乳酸菌的碳源和氮源,乳酸菌筛选过程中所用的接种方法是__________________。

              (3)上述实验步骤②制备而成的培养基因含有碳酸钙而不透明,乳酸菌产生的乳酸能溶培养基中的碳酸钙,上述实验步骤④挑选产生____________的菌落。

              (4)若要长期保存乳酸菌,菌液中常需要加入一定量的_________________(填“蒸馏水”、“甘油”或“碳酸钙”),且要放置在        (填“-5”、“-20”或“-100”)℃的冷冻箱中。若要短期保存乳酸菌,可将菌种接种到试管的        (填“溶液中”、“固体培养基表面上”或“固体斜面培养基上”),菌落长成后,将试管放置在        (填“-4”、“0”或“4”)℃的冰箱中保藏。

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