知识点挑题 - 高中生物 - 优优班--学霸训练营

1．
微生物强化采油(MEOR)是利用某些微生物能降解石油，增大石油的乳化度，降低石油黏度的原理，通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术。以下是人们筛选、纯化和扩大培养该类微生物的实验操作。请回答下列问题：
(1)土壤是微生物的大本营，该类微生物应取自___________________________的土壤。
(2)为筛选和纯化该类微生物，从功能上分，应选用__________培养基。常用的接种方法是_________和___________培养基。
(3)接种后，应密封培养的原因是________________，培养一段时间后在培养基上形成降油圈，此时选取___________就可获得高效菌株。
(4)扩大培养过程中需要对微生物进行计数。取0.2mL样品，用固体培养基对其培养，最后统计三个平板，菌落数分别是200、180、220。则样品中微生物的数量为____________个／mL。该统计结果_________(填“低于”或“高于”)实际值。

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2．
常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵，自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精，科学家欲从果园的葡萄上或土壤中分离这种酵母菌。操作如下：

(1)制备酵母菌培养基要进行倒平板操作，待平板冷凝后，要将平板倒置，其主要原因是______________________________________。获得纯净培养物的关键是____________________。

(2)纯化菌株时，通常使用的划线工具是________。在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，这样做的目的是__________________________。划线的某个平板经培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误是______________________________。

(3)将自然界中采集到的葡萄带回实验室，用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中，然后将瓶中的液体用涂布器涂布接种于以木糖为唯一________的固体培养基上，在适宜的条件下培养一段时间，获得能利用木糖的多个酵母菌__________。实验中所用培养基按功能属于__________培养基。

(4)若要检测土样中的酵母菌含量，应采用__________________法。在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板培养基先行培养了一段时间，这样做的目的是______________________________。然后，将1 mL土壤溶液分别稀释10倍和100倍，各在3个平板上分别接入每种稀释度的稀释液0.1 mL，经适当培养后，6个平板上的菌落个数分别为59、57、58、2、7和5，据此可得出每升土壤溶液中的活菌数为____________个。

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3．为研究“某品牌酸奶中乳酸菌数量及其对抗生素耐药性情况”，某同学进行了如下实验。请分析回答下列问题：

    （1）配制的细菌培养基除了含有水、碳源、氮源和无机盐等主要营养成分外，还应加入适量的____________和琼脂。在培养基各成分溶化与灭菌之间，要进行的操作是__________。

    （2）接种微生物的方法有很多，图1中过程①②③所示的方法为___________________。用该方法统计样本菌落数后，所得数据需要乘10ⁿ后，才可表示乳酸菌的数量（单位：个/mL），这里的n＝________________。用该方法统计样本菌落数时，同时需要做A、B、C三个培养皿，原因是_______________________。

    （3）为了检测乳酸菌对抗生素的敏感性，取该单菌落适当稀释，接种于固体培养基表面，在37℃培养箱中培养24 h，使其均匀生长，布满平板。将分别含有A、B、C三种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含抗生素A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A___________（填“敏感”或“不敏感”）；含抗生素C滤纸片周围的透明圈比含抗生素A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是____________。

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4．某校实验小组对某种品牌的酸奶中乳酸菌的数量进行了测定。取6支灭菌的试管，分别加入9 mL灭菌的生理盐水，标号为B₁、B₂、B₃、B₄、B₅、B₆；吸取1 mL酸奶样液加入试管B₁中，混合均匀；然后另取一支吸管从B₁中吸取1mL溶液，加入B₂中，依次类推，最后从试管B₆中取0.1 mL样液进行涂布计数，涂布三个平板，其菌落数分别为251、265、276个。
请回答下列问题：
(1)培养乳酸菌除了必要的_________外，还需在培养基中添加维生素。
(2)制备乳酸菌的培养基过程中，对培养皿灭菌的常用方法是______________；待平板冷凝后，要将平板倒置，其目的是_____________________________。

(3)该实验小组对乳酸菌接种所采用的方法是___________________。根据酸奶样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的__________；根据三个平板中菌落数，可推测原酸奶中乳酸菌的浓度为_________个／mL，该方法测定的乳酸菌的含量和实际值相比，一般________(填“偏大”或“偏小”)。

(4)为了使测量结果更加准确，该实验对照组的设置是______________________________。

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5．
农业生产上有一种广泛使用的除草剂在土壤中不易被降解,长期使用会污染土壤。为修复被污染的土壤,可按图示程序选育出能降解该除草剂的细菌。已知该除草剂(含氮有机物)在水中溶解度低,含一定量该除草剂的培养基不透明。请回答下列问题:

(1) 微生物接种是微生物学研究中最常用的基本操作技术,该技术的核心是____,应该在____旁完成。图中B、C所示操作的目的是将聚集的菌种逐步__________。

(2) 在选育过程中,应将出壤浸出液接种于以____为唯一氮源的固体培养基上。为了筛选出高效的目的菌,可比较单菌落周围透明圈的大小。实验结果如图显示的A~E五种菌株中,____是最理想菌株。

(3) 若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数,可采用的接种方法是___________。对分离的细菌数目统计时,统计的菌落数目往往比活菌的实际数目____。

(4) 操作过程中有三种材料或用具需要消毒或灭菌:①培养细菌用的培养基与培养皿;②操作者的双手;③玻璃棒、试管、烧瓶和吸管。其中需要灭菌的是____(填序号)。

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6．农作物收获后，燃烧秸秆会造成大气污染，如何回收利用是我国面临的一个重要问题．某同学设计从土壤中分离纤维素分解菌→分解秸秆，获得糖液→发酵生产乙醇，从而实现再次利用，请回答以下问题：
（1）将从土壤中获得的微生物培养在以 ______ 为碳源，并在加入 ______ 的培养基上筛选周围有 ______ 的菌落．
（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即 ______ 和 ______ ．采用固体平板培养细菌时，需要倒置培养，其原因是 ______ ．
（3）发酵阶段需要的菌种是 ______ ，在产生乙醇时要控制的必要条件是 ______ ．

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7．反刍动物，如牛和山羊，具有特殊的器官--瘤胃，在瘤胃中含有多种微生物，其中许多微生物能以尿素作唯一氮源．以下示意图是从瘤胃中分离出能够分解尿素的微生物流程．

（1）进行①过程的目的是 ______ ；②过程所使用的接种方法是 ______ ．用该接种方法对微生物进行计数时，统计的菌落数往往比活菌的实际数目，原因是 ______ ．
（2）从用途上来说，Ⅰ号培养基属于 ______ 培养基，制备该培养基的步骤是：计算→ ______ →灭菌→倒平板．由于瘤胃中的微生物多为厌氧菌，接触空气后会死亡，因此分离其中能分解尿素的微生物除了需要准备Ⅰ号培养基外，还要提供 ______ 的条件．
（3）酶对化学反应的催化效率称为酶活性，图示的酶活性的高低可用 ______ 中 ______ 的减少量来表示．
（4）萃取胡萝卜素的过程应避免明火加热，采用水浴加热的原因是 ______ ．
（5）如果要对具有优良性状的植物进行大规模种植可采用 ______ 方法，在对外植体进行接种前，需要进行制备MS 固体培养基和 ______ 两项工作．培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值 ______ （填“高”或“低”）时，有利于芽的分化．

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8．回答下列关于微生物和酶的问题．
高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性．研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图1所示．

（1）①过程为梯度稀释其目的是将聚集在一起的微生物分散成 ______ 细胞，②过程的接种方法为 ______ ．
（2）Ⅰ号培养基属于 ______ （按功能分），该培养基中除了加入淀粉外．还需加入另一种重要的营养成分 ______ （选择序号）
A．琼脂 B．葡萄糖 C．硝酸铵D．碳酸氢钠
（3）一般对配制的培养基采用 ______ 灭菌．灭菌是为了杀死体内外所有微生物，包括 ______ ．
（4）从Ⅰ号培养基挑出菌落接种到Ⅱ号培养基时，向Ⅰ号培养基加入碘液，选择菌落周围蓝色浅而且范围 ______ 的菌落挑出．
在高温淀粉酶运用到工业生产前，需对该酶的最佳温度范围进行测定．图2中的曲线①表示酶在各种温度下酶活性相对最高酶活性的百分比．将酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最适温度下测其残余酶活性，由此得到的数据为酶的热稳定性数据，即图2中的曲线②．

（5）根据图中的数据，判断该酶使用的最佳温度范围是 ______ ．
A.40～50℃B.50～60℃C.60～70℃D.70～80℃

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9．在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂（含氮有机化合物）在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤．为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）．

（1）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行 ______ 处理．
（2）要在长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌，从物理性质、用途方面来看，上述培养皿中的培养基应具有的特点是：在 ______ 的培养基中加入 ______ ．
（3）在划线培养时，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是 ______ ．
（4）在固体培养基上形成的菌落中，无透明带菌落利用的氮源主要是 ______ ，有透明带菌落利用的氮源主要是 ______ ，据此可筛选出目的菌．
（5）若实验接种时用的是稀释涂布平板法，在统计菌落数目时得到4个平板，统计的数目分别为21、213、257、278，则对数据处理后取平均值计数为 ______ ，该方法往往比活菌的实际数目偏 ______ （高/低）．

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10．
常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵，而自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精，但是对酒精的耐受能力差。科学家利用基因工程培育了能利用这两种糖进行发酵且对酒精耐受能力强的酿酒酵母。

（1）将自然界中采集到的葡萄带回实验室，用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中，然后将瓶中的液体用________法接种于固体培养基上，在适宜的条件下培养，获得各种菌落。

（2）将培养基上的酵母菌菌株转接到________的培养基中，无氧条件下培养一周后，有些酵母菌死亡，说明这些酵母菌不能利用木糖发酵。从存活的酵母菌中提取DNA，经大量扩增获得目的基因。

（3）将目的基因连接到质粒上，该质粒具有尿嘧啶合成酶基因作为标记基因。将重组质粒导入酵母菌时，应选择缺乏________能力的酿酒酵母作为受体菌。

（4）将上述获得的转基因酿酒酵母接种在以_________和_________为碳源的培养基中进行发酵能力测试。随着发酵的持续进行，若该酿酒酵母能够存活，说明它能_________，即说明所需菌株培育成功。

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