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            • 1.

              【生物—选修1:生物技术实践】

                泡菜是四川人非常喜爱的家常小菜,新鲜的泡菜滤液中含有乳酸菌,可作为实验材料分离纯化乳酸菌.回答下列问题:

              (1)泡菜腌制一段时间后,泡菜坛中的盐水和蔬菜逐渐变酸,原因是________________________________________。腌制过程中,要注意控制腌制的__________________等条件,以防止亚硝酸盐的含量过高。

              (2)分离纯化乳酸菌时,需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释,这样做的目的是______________________________________________________________________________。接种泡菜菌液的全过程都应在______________________附近进行。

              (3)固体培养基会因加入适量碳酸钙后而不透明,但乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。纯化乳酸菌时应该挑取生长在平板_______(选填“表面”或“中下层”)且周围出现_________的菌落进一步分离。

            • 2.
            • 3.

              [生物—选修1:生物技术实践]

              为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题:


              (1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量.在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间,这样做的目的是     ;然后,将1mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为             

              (2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌,操作时,接种环应通过           灭菌  。

              (3)图1和图2是培养某细菌的结果图,其对应的接种方法分别:        和__        ,这两种方法接种后培养基上都可以得到由单个细菌繁殖所形成的。图1所用的接种方法可用来对活菌进行计数,此外,测定微生物数目的另一种方法是              

              (4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是:振荡培养能提高培养液的__ ___含量,同时可以使菌体与培养液充分接触,提高___ __的利用率。

            • 4. 啤酒的质量、口感与生产过程中起发酵作用的酵母菌的数量、品种有非常重要的关系.请回答下列问题:
              (1)从自然环境中获得的酵母菌中筛选优良品种时,所使用的培养基是 ______ (物理性质),培养基应该含有的营养物质包括: ______ (填写5种).
              (2)发酵生产过程中,要定时检测酵母菌的密度.菌落计数时,样液往往要先进行 ______ ,然后再涂布平板.每一浓度一般涂布 ______ 个平板,其目的是 ______ .也可以显微镜直接计数,但结果较菌落计数的结果 ______ (偏大或相当或偏小),为什么? ______
            • 5. 有些细菌可分解原油,从而消除有原油泄露造成的土壤污染.某同学欲从污染的土壤中采用富集培养的方法筛选出高效降解原油的细菌、经过的一般步骤是采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定,实验过程如图1所示,请分析回答:

              (1)如图A、B是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解,请分析接种的具体方法.
              图A所示的接种方法是 ______ ,图B所示的接种方法是 ______
              (2)在筛选过程中,应将 ______ 接种于以 ______ 为唯一碳源的培养基上,从功能上讲,该培养培养基属于 ______ 培养基.
              (3)在操作④时,为避免培养液中菌体浓度过高,对培养液进行稀释处理.各取0.1mL 已稀释103倍的菌液分别接种到图A 的三个培养基上培养,记录的菌落数分别为55、56、57,则原始培养液③中每毫升菌体数为 ______
              (4)①→③重复培养的目的是 ______ .在培养过程中,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养,结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快.分析其原因是:振荡培养能提高培养液中 ______ 的含量,同时可使菌体与培养液充分接触,提高 ______
              (5)实验中使用过的培养基及其培养物必须经过 ______ 处理后才能丢弃,以防止微生物的扩散.
            • 6. “煤城”淮北的煤矸石堆积如山.腐殖酸(大分子有机物)是煤矸石的主要成分之一,直接应用效果差.研究人员从煤矸石发酵的环境中筛选得到了能降解腐殖酸的细菌H4.回答下列问题:
              (1)为了从自然界中获得H4单菌落,可从煤矸石发酵的环境中取样,并应选用以 ______ 为唯一碳源的培养基进行培养,除此之外培养基中还应含有 ______
              (2)利用平板划线法纯化H4菌株时,划线前需要 ______ 接种环.从第一区域划线的 ______ 开始往笫二区域内划线.
              (3)若要测定培养液中H4活菌数量常用 ______ 法进行计数,其统计数据往往比真实值 ______ (高/低),原因是 ______
            • 7. 豆浆是深受中国百姓喜爱的饮品,但易变质,保质期较短.科研人员对变质豆浆中的腐败细菌进行分离,并研究了乳酸链球菌素对腐败细菌的抑制效果,为生产豆浆时,优化保质方法提供依据.主要研究过程如下:
              ①豆浆变质处理将2种市售豆浆A、B和自制豆浆在无菌操作台上分别装入已灭菌的250mL三角瓶中,密封、37℃条件下,放置7d后,豆浆发生变质.
              ②腐败细菌的初步分离和计数取变质的豆浆在无菌条件下接种到细菌培养基上,培养一段时间后.统计各培养基上菌落种类和数量.结果如表:
              细菌
              序号
              菌落特征 菌落直径/mm 菌落数/个
              豆浆A 豆浆B 自制豆浆
              S1 表面有白色绒毛,圆形边缘不规则 5 5 3 7
              S2 白色,表面无绒毛,有白色液滴 1~2 18 11 24
              S3 黄色,表面无绒毛,如同黄色液斑 20-30 11 7 15
              ③比较乳酸链球菌素添加量对腐败细菌的抑制效果以自制的新鲜豆浆为材料,经相应处理后,在37℃下放置35d后,统计豆浆中腐败细菌数量,结果如图.
              请回答下列问题:
              (1)步骤①中三角瓶的常用灭菌方法是 ______ ,步骤②中培养基的常用灭菌方法是 ______
               (2)步骤②中适宜采用的接种方法是 ______ .区分菌落种类的依据是 ______ .统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次,直到各类菌落数目稳定,以防 ______
              (3)乳酸链球菌素是一种天然食品防腐剂,它是由34个氨基酸组成的多肽.步骤③结果表明,最能耐受乳酸链球菌素的细菌是 ______ 为有效防止豆浆腐败,在生产中乳酸链球菌素的添加量应控制在 ______ 左右.
              (4)与用抗生素防腐相比,使用乳酸链球菌素防腐的优点是 ______
            • 8. 某研究小组将一组相同圆纸片放入不同浓度的麦迪霉素(一种抗生素)溶液中浸泡后,放在接种有大肠杆菌的培养基上培养,实验结果如图.请分析并回答下列问题:
              (1)将装有培养基的灭菌包装入 ______ 中灭菌,加热初期,必须先将锅内的 ______ 彻底排除后,将锅密闭,再继续加热灭菌.
              (2)倒平板时,待平板冷却凝固后,应将平板倒过来放置,倒置的原因是 ______ ,倒置后用记号笔在培养皿的 ______ (填“皿盖”或“皿底”)上标明培养基的种类、培养日期、平板上样品的稀释度、培养微生物名称及制作者姓名等信息.
              (3)该实验中,宜使用 ______ 方法接种大肠杆菌,在培养和接种大肠杆菌时要特别注意进行无菌操作.为了避免无关变量对实验结果的影响,对圆纸片的要求是 ______
              (4)实验结果表明,对大肠杆菌抑制作用最明显的是浓度为 ______  (填图中数字)的麦迪霉素,原因是 ______
            • 9. 研究人员为获得用于烟气脱硫的脱硫细菌,进行了如下操作.请回答:
              (1)取样与选择培养:在某热电厂烟囱周围区域采集土样,取样用的小铁铲和盛装土样的信封在使用前都需要 ______ .选择培养的目的是增加 ______ 浓度.
              (2)驯化脱硫细菌:将目的菌转移到含少量无菌水的锥形瓶中,边搅拌边持续通入SO2气体,驯化几分钟后接种到固体培养基上,待长出菌落后再重复上述步骤,并逐步延长通SO2的时间,与此同时逐步降低培养基的pH.由此分离得到的脱硫细菌具有 ______ ______ 能力.
              (3)培养、观察与应用:为获得大量的目的菌用于生产,在培养过程中技术人员需连续取样进行计数,计数方法一般有稀释涂布平板法和 ______ 法.当用前者进行计数时,培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的 ______ ,统计平板上的菌落数即可推测出样品中含有的活菌数目.通常情况下,用此计数方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目 ______ ;当用后者进行计数时,需在 ______ 上的计数室内计数.
            • 10. 办公和学习产生大量废纸,其主要成分是木质纤维,人类正努力将其转化为一种新的能源乙醇.下图是工业上利用微生物分解纤维素生产乙醇的基本工作流程,请回答相关问题:

              (1)图中①环节所需的微生物若来自土壤.要统计土壤样品中该活菌的数目,宜采用 ______ 法接种,根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积,通过统计平板上的 ______ 就能大约推测出样品中的活菌数.对于纯化后所得到的纤维素分解菌,若要进行长期保存,可以采用 ______ 的方法.
              (2)分解废纸中纤维素的纤维素分解菌能分泌纤维素酶,该酶是由3种组分(C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶)组成的复合酶,其中的葡萄糖苷酶可将 ______ 分解成葡萄糖.
              (3)④接种的微生物是 ______ .为降低乙醇生产成本,生产工艺上可利用 ______ 技术,使酶能够重复使用.
              (4)纸张加工过程中,有时要加入一些由植物芳香油制成的香精,芳香油的提取方法有
              ______ 等(至少写出2种);也可以用植物色素使纸张着色,根据植物色素易溶于有机溶剂的特点,可以考虑使用 ______ 法提取植物色素.
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