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            • 1.
              尿素是一种重要的农业肥料,经微生物分解后能更好的被植物利用.某生物兴趣小组试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用,设计实验并成功筛选到能高效分解尿素的细菌(目的菌).培养基成分如下表所示.
              KH2PO4 NaHPO4 MgSO4•7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂
              1.4g 2.1g 0.2g 10g lg 15g
              将表中物质溶解后,用蒸馏水定容到100mL.实验过程如图所示:
              回答下列问题:
              (1)该培养基能筛选出目的菌的原因是______.
              (2)图中将细菌转到固体培养基上接种时,可采用的方法是______.初步筛选出来的菌种还需要进一步的鉴定:在培养基中加入______指示剂,接种并培养初步筛选的菌种,若指示剂变成______色,则可说明该菌种能够分解尿素.
              (3)在实验中,下列材料或用具需要灭菌的是______,需要消毒的是______(填序号).
              ①培养细菌的培养基与培养皿
              ②玻棒、试管、锥形瓶和吸管
              ③实验操作者的双手
              (4)在进行分离分解尿素的细菌实验时,A同学从培养基上筛选出大约50个菌落,而其他同学只选择出大约20个菌落.A同学的实验结果产生的原因可能有______(填序号).
              ①所取土样不同 ②培养基被污染 ③接种操作错误 ④没有设置对照实验
              (5)实验结束后,使用过的培养基应该进行______处理后,才能倒掉.
            • 2.

              下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方,请根据表格和所学知识回答下列相关问题。

              成分

              蛋白胨

              乳糖

              蔗糖

              K2HPO4

              指示剂

              琼脂

              含量(g)

              10.0

              5.0

              5.0

              2.0

              0.2

              12.0

              将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL

              (1)从生态系统的成分上看,大肠杆菌属于____________。

              (2)若根据用途划分,该培养基属于________(填“选择”或“鉴别”)培养基。若要用上述培养基来筛选出土壤中的尿素分解菌,培养基的营养成分必需怎样更改?_____________。

              (3)在微生物培养的过程中,为防止杂菌污染,需要对培养基进行________。

              (4)图1和图2是培养某细菌的结果图,其对应的接种方法分别是:________和_________,




              (5)以下过程中所利用的主要微生物的细胞结构与大肠杆菌较相似的有________。

              A.制作果酒  B.由果酒制作果醋    C.制作泡菜     D.制作腐乳

            • 3. 微生物的分离、培养和计数是现代生物工程应用中的重要环节。图示为大肠杆菌分离和培养过程中部分操作示意图。请分析回答下列问题。

              (1)实验过程中对培养基、培养皿和实验操作者的双手所采用的灭菌或消毒方法依次是___________、___________、___________。

              (2)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是___________。

              (3)图示是利用____________法进行微生物接种,把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在灼烧接种环之后,要等其冷却后再进行划线的原因是____________。

              (4)关于图示的操作方法和结果正确的是___________

              A.操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌  

              B.划线操作须在火焰上进行

              C.在5区域中才可以得到所需菌落    

              D.在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌

            • 4.

              酸菜,古称菹,《周礼》中就有其大名。制作酸菜的初衷是为了延长蔬菜保存期限。请回答:


              (1)酸菜制作起主要作用的微生物是_____________。但是在发酵初期,很多杂菌会大量繁殖,其中导致泡菜水的表面长白膜且容易产生酒味的微生物是___________。
              (2)本实验所用的培养基都需经_________________法进行灭菌。

              (3)在实验室中可采用下图所示的________法进行菌种纯化,在下图中 ______(填图中序号)区域更易获得单菌落.




              (4)市场上购买的真空包装酸菜,在没有发生漏气状态下发生了“胀袋”现象,A同学怀疑是杂菌污染导致的,B同学怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的,说出你支持谁的观点并说出理由。支持___________,理由是_________________________________。 
            • 5.

              酿酒厂常用酸性脲酶去除酒精类饮品中的尿素,以改善酒精类饮品的品质。请回答下列问题:

              (1) 从土壤中筛选酸性脲酶生产菌,其培养基的主要成分有葡萄糖、尿素、琼脂等,从功能上分析,该培养基属于________培养基。该培养基的氮源来自_________。

              (2) 筛选和纯化酸性脲酶生产菌常用的两种接种方法是___________和_____________。配制浓度梯度为10-1的系列稀释液时,需用移液管将lmL菌液移入盛有____mL蒸馏水的试管中。

              (3) 对同一浓度的酸性脲酶生产菌稀释液,分别用血球计数板计数和稀释涂布平板法计数,若不存在实验误操作,则前者的数量___(多于/等于/小于)后者,其原因是________。

              (4) 若用海藻酸钠固定含酸性脲酶的细菌时,应将海藻酸钠溶液和细胞混合滴入溶液中。下表是不同浓度海藻酸钠形成的凝胶珠状况,从表中看出,海藻酸钠的浓度应选用__g/dL。若利用固定化酶技术,它的优点是___________________。

              海藻酸钠质量浓度(g/dL)

              凝胶强度

              凝胶气泡量

              成球难度

              凝珠形状

              1.0

              没有

              较易

              扁圆形

              2.0

              少量

              圆球形

              3.0

              较多

              稍难

              有托尾

              4.0

              大量

              难成球形

            • 6.

              (每空1分,共7分)某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的部分步骤如下图所示。请回答下列问题:

              (1)培养基中的化合物A能为目的菌的生长繁殖提供________,筛选过程中所用的培养基的常用灭菌方法是________。

              (2)实验中“重复多次”的目的是________,为了达到分离纯化目的菌的目的,在固体培养基上接种的方法可以是________。

              (3)实验过程中振荡培养,“振荡”的目的是________。

              (4)实验结束后,使用过的培养基应该进行灭菌后才能倒掉,目的是________。

              (5)某同学计划统计污水池中“目的菌”的数目,需要设计________作为对照组,此对照组的目的是证明培养基是否被污染。

            • 7.

              有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题:

              (1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以________________为唯一碳源的固体培养基土,从功能上讲,该培养基属于___________培养基。

              (2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即_________和________。

              (3)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈说明该菌株的降解能力___________。

              (4)通常情况下,在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、____________和_________。无菌技术要求试验操作应在酒精灯______________附近进行,以避免周围环境中微生物的污染。

            • 8.

              为了调查某城市自来水的水质情况,某研究小组对自来水水样中的大肠杆菌进行了分离和含量测定,请回答下列问题:

              (1)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌,操作时,每次划线之前都要对接种环进行灭菌目的是_____________。在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线,这样做的目的是____________________。

              (2)在接种前,随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间,结果发现空白对照组的平板上出现了5个菌落,请分析说明可能的原因(写出两点):①________;②_______。

              (3)检测自来水中大肠杆菌的数量,可采用稀释涂布平板法,选用__________鉴别培养基。该研究小组在统计菌落数目时,选取菌落数目稳定时的记录作为结果,这样可以防止因___________而遗漏菌落的数目。

              (4)稀释涂布平板法测定细菌数量,实际活菌数量要比测得的数量______,因为________。

            • 9.

              为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题:


              (1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间,这样做的目的是________________________;然后,将1mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为________。

              (2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,接种环通过_________灭菌,在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是__________。

              (3)示意图A和B中,_________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。 

              (4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是:振荡培养能提高培养液的__________________的含量,同时可以使菌体与培养液充分接触。

            • 10. 为了检测抗生素作用,需要做细菌耐药实验。
              (1)为了统计某治病菌活菌数,可用________________法将样本接种于固体培养基表面。该接种方法中的接种工具是________________。
              (2)为了检测致病菌对于抗生素的敏感性,将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,培养一段时间后,含A的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对抗生素A  ________________;含B的滤纸片周围没有出现透明圈,说明该病菌对抗生素B________________;含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小,说明________________;含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是抗生素D的________________。
              (3)根据(2),抗生素________________抗菌效果最好。

              (4)人类经常使用抗生素,细菌抗药性不断增强是________________的结果。

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