【生物——选修1 生物技术实践】

随着环境污染的加剧和石油危机出现，越来越多的国家使用乙醇作为代替燃料，生产中玉米和麦草的秸秆可以用来生产燃料乙醇，已知秸秆的主要成分是纤维素，回答下列问题：

（1）人们首先利用纤维素分解菌将纤维素分解，纤维素分解菌多分布在__________的土壤中，该微生物产生的纤维素酶是一种复合酶，一般包括三种成分，____________，___________和__________。前两种酶能使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。

（2）从土壤中筛选纤维素分解菌需要配制__________________培养基，该培养基中需要加入纤维素粉作为唯一的__________________。

（3）经过梯度稀释后，要将样品均匀涂布在用于鉴别纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中需要加入的特殊染料是______，当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生_________来筛选纤维素分解菌。当利用涂布器涂布平板之后需要对涂布器进行__________处理。（添“消毒”或者“灭菌”）

（4）产生葡萄糖后需要用到____________（微生物种类）发酵产生酒精，还可以使用_________检测产物是否为酒精，该试剂在酸性条件下可与酒精反应，溶液呈灰绿色。

现欲从果皮上分离出纯净的酵母菌菌种，并对其生长繁殖情况进行研究。某生物兴趣小组做了如下步骤的实验：

（1）分别配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基和乳酸马铃薯葡萄糖培养液，进行灭菌处理。

（2）取一小块果皮，不需冲洗，直接接入乳酸马铃薯葡萄糖培养液试管中。置28～30℃恒温箱中培养24小时，可见培养液变混浊。

（3）培养：用无菌吸管取上述培养后培养液0.l mL，注入另一管乳酸马铃薯葡萄糖培养液中，置28～30℃恒温箱中再培养24小时或稍长。

（4）分离提纯：……

请回答下列问题：

（1）在马铃薯葡萄糖培养液中添加一定量的乳酸，其目的是                  。

（2）乳酸马铃薯葡萄糖培养液应在分装试管               （填“前”或“后”）灭菌，灭菌采用的方法是                 。

（3）既能分离菌种，又可以用于酵母菌计数的纯化菌种的方法是             。

（4）该兴趣小组继续利用分离提纯的酵母菌培养液研究“酵母菌种群数量变化”，同样实验条件下，分别在4支试管中进行培养（如下表）：

根据实验结果数据，均获得了“S”型增长曲线。

在计数培养液中活酵母菌数目时，需要的是                （填序号）。

①酒精灯 ②血细胞计数板 ③滴管  ④显微镜 ⑤台盼蓝染色剂

Ⅰ号和Ⅳ号试管中，“K”值较大的是                 号试管；4支试管中，                   号试管中的酵母菌数量将最先下降。

[生物——选修模块1：生物技术实践]

   据报道，某地空气样本中检测出A、B、C3种抗生素的耐药性基因。只有存在于某种活菌中的耐药性基因才能感染人体。为研究此地空气中是否存在这些耐药性活菌，某研究小组做了以下实验，步聚如下。

①配置培养基并灭菌；

②制作无菌平板并收集、培养空气中的活菌；

③对步骤②得到的活菌进行分离纯化；

④设置若干实验组和对照组，进行相关操作；

⑤将各组平板置于适宜温度的恒温箱中培养一段时间，观察菌落的生长情况。

回答下列问题：

（1）步骤①中的灭菌方法是________。

（2）步骤③中接种的方法是________。

（3）若步骤②中得到的菌落类型有5种，则步骤④中需要设计至少________个实验组，对实验组的操作是________。

（4）若将所得菌落接种到含有________培养基中，形成的菌落呈________色，则表明可能存在大肠杆菌。从功能角度分析此培养基属于________培养基。

【生物——选修1：生物技术实践】

金黄色葡萄球菌是一种耐高浓度实食盐的致病菌，为探究某天然植物抗菌液对金色葡萄球菌的抑菌作用，某实验小组按照以下实验步骤进行了相关实验。回答下列问题：

(1)为防止杂菌污染，常用                法对固体培养基进行灭菌处理，为检测灭菌效果可对培养基进行                  。

(2)将配制好的多组培养基均分为甲、乙两组，甲组加入适量的天然植物抗菌液，乙组加入等量的蒸馏水。将金黄色葡萄球菌菌液进行一系列的        后，采用         法分别接种到甲乙两组对应的培养基上,在适宜条件下培养一段时间后，观察比较不同组别的菌落数。由于金黄色葡萄球菌具有致病性，因此严格进行无菌操作，一方面是防止培养基被外界环境中的杂菌污染，另一方面也是为了防止                    。

(3)在基本培养基中加入           可筛选出金黄色葡萄球菌，从功能上讲，该培养基属于            培养基。

将没有吃完的西瓜盖上保鲜膜后放入冰箱，是很多人日常储藏西瓜的办法。但事实上，有时候盖上保鲜膜储藏的西瓜中的细菌种类和数目反而比没用保鲜膜的多。某生物研究小组用保鲜膜保存三天的西瓜表面的瓜瓤制备浸出液，研究细菌的种类和数量。请回答下列问题：

（1）该研究小组需配制用于培养微生物的培养基，配制的培养基一般都含有水、碳源、________和________。一般采用________法对培养基进行灭菌。

（2）为了避免培养基污染，在培养过程中，需将平板________（填“正置”或“倒置”）。为了观察浸出液中微生物的种类和数量，采用____法接种。接种时，为了避免环境中微生物的污染，实验操作应在________附近进行。

（3）在培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，说明西瓜的浸出液中有________（填“一种”或“多种”）细菌。细菌总数越多，说明西瓜被细菌污染的程度越________（填“高”或“低”）。

【生物——选修1 生物技术实践】

胡萝卜素是一种常用的食用色素，可分别从胡萝卜或产生胡萝卜素的微生物体中提取获得，流程如下：

（1）筛选产胡萝卜素的酵母菌R时，可选用       或平板划线法接种。采用平板划线法接种时需要先灼烧接种环，其目的是              。

（2）培养酵母菌R时，培养基中的蔗糖和硝酸盐可以分别为酵母菌R提供       。

（3）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好温度和            以防止胡萝卜素分解；萃取过程中宜采用           方式加热以防止温度过高；萃取液浓缩前需进行         ，以除去固体不溶物。

（4）纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素，常用           作为层析液。鉴定过程中需要用胡萝卜素标准品作为             。

手机高温、潮湿的环境非常适合细菌的生长，由大肠杆菌引起的食源性疾病日渐成为社会比较关注的公共卫生问题。为了了解手机上大肠杆菌的种类及分布情况，某兴趣小组进行了如下实验步骤。请进一步完善实验内容并回答相关问题：

（1）实验步骤：

①配制含有________、水、无机盐的固体培养基，并在培养基中加入少量________（使大肠杆菌菌落呈现黑色）；

②从10名学生的手机正、反面采集样品，分别接种至灭菌的培养基上，在37℃恒温培养箱中培养24～48h，选取________的菌落；

③将接种针用________法灭菌后，将②中选取的菌落接种到________（填“固体”或“液体”）培养基，在恒温摇床上培养24h，使细菌大量繁殖；

④用________法将③过程所获得的细菌接种到培养基上，分别统计菌落的种类和数目；

⑤根据菌落的特征进一步鉴定大肠杆菌的类型。

（2）上述实验步骤中，从用途看，①所用培养基属于________培养基。

（3）上述实验步骤④统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是________。

某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、 灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。

（1）培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了氮源和_ _____。除此之外，培养基还必 须含有的基本成分是_____和______。

（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是_______。

（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于______中培养，培养 的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种______作为对照 进行实验。

（4）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有_____种细菌。 一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越_______。

（5）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐__细菌，这种培养基（按功能分）被称为_        。

[生物——选修1：生物技术实践]

在调查和分离湖水中耐盐细菌的实验中，先将10升湖水水样浓缩至10毫升，然后各取浓缩水样1毫升，涂布到多个培养皿中培养。请回答： 

(1)可以通过提高培养基中____的浓度，筛选被调查细菌，这种培养基被称为____培养基。

(2)要提高实验结果的可靠性，排除培养基未彻底灭菌的可能性，应该设置的对照组是_____________。为检验(1)中筛选方法的效果，可以设置的对照组是______________。 

(3)在微生物的培养过程中，实验室对培养基灭菌常用的方法是_________。为防止冷凝水影响细菌的生长，需将培养皿______培养。在培养基上产生的单个菌落在生态学中可以被称为_______。 

(4)根据培养皿上菌落的平均数可以计算湖水中该种细菌的密度，但计算的数据要比实际活菌的数目少，原因是__________________________。

某化工厂的污水池中含有一种有害的、难以降解的有机化合物A，研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基成功筛选到能高效降解化合物A的细菌。实验的主要步骤如下图所示，请分析回答：

(1)培养基中加入化合物A的目的是筛选______________，这种培养基从用途上分属于______________培养基。培养基灭菌的常用方法是利用高温可以使微生物的________________________等物质发生变性。

(2)化合物A为“目的菌”生长提供_________。培养过程中震荡的目的是_____________。

(3)转为固体培养时，常采用_____________________的方法接种，以便于分离和计数。

(4)若研究“目的菌”的群体生长规律，将单个菌落进行液体培养，可采用__________的方法进行计数。若以一个大方格(体积为0.1 mm³)有25个中方格的计数板为例进行计算，设五个中方格中总菌数为B，菌液稀释倍数为C，那么原菌液的菌群密度为_____个/mL。

(5)实验结束时，使用过的培养基应该进行______处理后，才能倒掉。

(6)为研究化合物A初始浓度对菌株降解能力的影响，做了有关实验并得到下图。结果由图可知，若要得到较好的降解效果，化合物A的初始浓度应该为____________________。

(A、小于1600 mg/L B、小于1200 mg/L C、1200 mg/L与1600 mg/L之间)