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            • 1. 分析有关科学探究资料,回答下列问题
              I.土壤中生活着肉眼看不见的细菌、丝状真菌和呈放射状的放线菌,这些微生物的种类和数量极其繁多,其中绝大多数以土壤中的有机物作为营养物质.某生物兴趣小组以带有落叶的表层土壤为实验材料,研究土壤微生物的分解作用,进行了如下实验(见表):
              实验组合 土壤处理 土壤湿度控制 温度(℃)
              灭菌 湿润 20
               不灭菌 湿润 20
               不灭菌 湿润 5
               不灭菌 较干燥 20
              (1)该实验对照组是实验组合 ______
              (2)预计本实验可得出的结论是:① ______ ;② ______
              (3)生态系统中微生物的分解作用不能等 同于微生物的细胞呼吸,其理由是: ______
              II.为了进一步研究土壤微生物对淀粉的分解作用,请利用下列实验材料和用具,设计实验并预期实验结果.实验材料和用具:土壤浸出液、蒸馏水、淀粉糊、恒温箱、酒精灯、烧杯若干、试管若干、碘液、班氏试剂等.
              (4)作出假设: ______
              (5)主要实验步骤:
              ①取两个大小相同的烧杯,编号为A、B,放入 ______ .在A烧杯中加入适量的土壤浸出液;B烧杯中加入 ______
              ②在室温(20℃左右)下放置7d后,分别取A、B烧杯中的溶液20mL,各加入两支试管中,分别编号为A1、A2,B1、B2
              ③在A1、B1试管中加入 ______ ;在A2、B2试管中加入 ______ ,并在酒精灯上加热至沸.
              ④观察试管中溶液的颜色变化,记录实验结果.
              (6)实验现象及结论预测:
              ①如果假设成立,则实验现象是: ______
              ②如果假设不成立,则实验现象是: ______
            • 2. 土壤微生物分离培养技术在微生物环境功能研究、代谢途径的阐明、特定功能的验证等方面发挥着重要作用.研究者可以通过培养基的优化和重新设计来达到分离土壤微生物的目的.以土壤中分解尿素的细菌的分离与计数为例,回答下列问题:
              (1)为达到分离的目的,培养基的成分必须以尿素为    .制作固体培养基时需加入    作为凝固剂.为方便计数,可用    法接种.
              (2)在使用同一土壤样品和培养基已灭菌的情况下,甲同学从对应104倍稀释的培养基中筛选出约200个菌落,而其他同学筛选出约50个菌落,请分析甲同学筛选出菌落较多的原因:    .(写出两个原因).
              (3)在细菌分解尿素的反应中,细菌产生的    酶可将尿素分解成为氨.为进一步分离得到的细菌是否可以分解尿素,可在培养基中加入    指示剂,若该指示剂    ,则可初步鉴定该细菌可以分解尿素.
            • 3. 请分析回答有关“土壤中分解尿素细菌的筛选与计数实验”的问题.
              尿素是一种重要的农业氮肥,但若不经细菌的分解,就不能更好地被植物利用.生活在土壤中的微生物种类和数量繁多,同学们试图筛选出能高效降解尿素的细菌.设计了“土壤中分解尿素细菌的筛选与计数实验”,过程如图所示:

              (1)为达到实验目的,本实验所配置的培养基成分应包括:    .(填入编号)
              ①水②无机盐(不含氮)  ③NH4NO3④尿素  ⑤葡萄糖  ⑥牛肉膏⑦蛋白胨  ⑧伊红美蓝   ⑨琼脂
              (2)为能够进行菌落计数,本实验应采用的接种方法是    ,接种工具是    
              (3)在接种前,进行①~⑤系列操作的意图是    .根据题意,为使菌液稀释10倍,每次应加入的无菌水量是    ml.
              (4)甲同学设计了“计算→称量→溶解→灭菌→倒平板→接种土壤样本→菌落计数”的实验步骤,该同学忘记了在    (步骤名称)之前还需要    (遗忘的步骤名称).
              (5)乙同学分别接种了3个培养皿,一段时间后三个培养皿中分别长出了54个、46个、50个菌落,根据甲的实验结果,该1g土壤样本中约有分解尿素的细菌    个.
            • 4. 请回答生物技术实践的相关问题:
              (1)果酒的制作过程中,在葡萄汁装入消毒发酵瓶时,要留有大约    的空间.所使用的发酵液能使酵母菌生长繁殖而绝大多数其他微生物无法适应,这种发酵液应具有    的特点.
              (2)在筛选纤维素分解菌的过程中,常用的方法是    .但这只是分离纯化的第一步,为了确定得到的是纤维素分解菌,还需要进行    的实验.
              (3)植物组织培养是一种常见的繁殖花卉的手段,一般的说,容易进行    的植物,也容易进行组织培养.但为了提高成功率,往往要添加植物激素,其中关键性的激素是    
              (4)许多植物芳香油的提取在原理和程序上是相同的,结合玫瑰精油的提取,设计提取茉莉油的实验流程(如下):
              茉莉花+水→A→油水混合物→油水分层→B→过滤→茉莉油
              其中A表示    过程,B表示    过程.
            • 5. 尿素是一种重要的农业肥料,但是不经过细菌的分解,就不能更好地被植物利用.生活在土壤中的微生物种类和数量繁多,同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用,设计了以下实验,并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌),培养基成分如表所示,实验步骤如图所示,请回答下列问题:
              KH2PO41.4g
              Na2HPO42.1g
              MgSO4•7H2O0.2g
              葡萄糖10g
              尿素1g
              琼脂15g
              将上述物质溶解后,用自来水定容到1000m3
              (1)此培养基能否用于植物组织培养?    ,理由是    
              (2)培养基中氮源是    ,这种培养基在功能上属于    培养基,目的是只允许能合成的微生物生长,其他微生物均不能生长.
              (3)欲从土壤中分离获取上述特定微生物,可采用    法进行接种.
              (4)在以尿素为唯一碳源的培养基中加入    ,使指示剂变红色,而筛选纤维素分解菌的方法是    法.
            • 6. 分离土壤中分解尿素菌的实验操作中,对于获得纯化的尿素分解菌的单菌落影响最大的是(  )
              A.制备浸出液的土壤取自土壤的表层
              B.涂布前涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌
              C.牛肉膏蛋白胨培养基中添加尿素作为氮源
              D.接种操作者的双手未用酒精棉进行消毒
            • 7. 在农田土壤的表层自生固氮菌较多.用表层土制成的稀泥浆接种到特制的培养基上培养,可将自生固氮菌与其他细菌分开,对培养基的要求是(  ) ①加抗生素     ②不加抗生素    ③加氮素     ④不加氮素
              ⑤加葡萄糖     ⑥不加葡萄糖      ⑦37℃恒温箱中培养  ⑧28~30℃恒温箱中培养
              A.①③⑤⑦
              B.②④⑥⑧
              C.②④⑤⑧
              D.②④⑥⑦
            • 8. 在做分离分解尿素的细菌实验时,A同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只选择出大约50个菌落.产生A同学结果的原因可能有(  ) ①土样不同   ②培养基污染   ③操作失误   ④没有设置对照.
              A.①②③
              B.②③④
              C.①③④
              D.①②③④
            • 9. 下列有关微生物培养的叙述,不正确的是(  )
              A.测定土壤样品中的细菌数目,常用稀释涂布平板法进行菌落计数
              B.在对微生物进行培养前,需要对微生物和培养基进行灭菌
              C.酵母菌发酵过程产生的酒精,对其他微生物生长有一定的抑制作用
              D.分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中唯一的氮源
            • 10. 尿素是一种重要的农业氮肥,不能直接被农作物吸收,只有当土壤中的微生物将尿素分解后才能被植物吸收利用。因此,对土壤中分解尿素的微生物进行分离和鉴定具有重要意义。
              回答下列问题:
              (1)对土壤中分解尿素的微生物的分离过程如下:
              第一步:土壤取样。取土样用的工具和盛土样的信封等在使用前都需要______(填“消毒”或“灭菌”)。
              第二步:样品稀释。通常分离不同种类的微生物要采用不同的稀释度,原因是                      

              第三步:微生物的培养与观察。将一定稀释度的样品接种在以尿素为唯一氮源的培养基上,并在适宜的条件下培养。分解尿素的微生物能在该培养基上生长繁殖,而                       则不能生长繁殖。(注:实验中所用的培养基经检测符合要求,且均在无菌条件下操作)

              (2)若对土壤悬液进行梯度稀释时,未经振荡而直接取上层悬液进行梯度稀释,用稀释倍数为104的样液涂布到平板上进行培养和计数,统计出的菌落数往往比正确操作统计出的菌落数______。
              (3)对土壤中分解尿素的微生物作进一步的鉴定

              成分

              KH2PO4

              Na2HPO4

              MgSO4•7H2O

              酚红指示剂

              尿素

              蒸馏水

              培养基(含量)

              1.4g

              2.1g

              0.2g

              0.01g

              1.0g

              1000mL

              若要对上述初步筛选出的分解尿素的微生物作进一步的鉴定,需在上表培养基配方中添加的物质是__________________。若分离得到的是尿素分解菌,则培养基中pH升高使酚红指示剂变为_____色(1分),pH升高的原因是______。

              (4)细菌的数目可以通过滤膜法来测定,例如测定饮用水中大肠杆菌的数目。将已知体积的水过滤后,将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养,在该培养基上,大肠杆菌的菌落呈现__________,根据培养基菌落的数目,计算出水样中大肠杆菌的数量。

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