（1）按细胞结构分类，金黄色葡萄球菌属于______生物，从培养过程分析，金黄色葡萄球菌可进行_______呼吸。

（2）7.5％NaCl肉汤培养基可为微生物提供的营养成分包括________________，用7.5％NaCl肉汤培养基进行选择培养的主要目的是______________________。

（3）操作中在血平板上的接种方法是____________，接种操作前后需要对接种工具进行___________灭菌。

（4）在制备血平板时需将pH调节至________（“微酸性”或“微碱性”）后灭菌，待培养基冷却后，再加入适量血液。经多次规范操作、重复实验，血平板上均出现_____________________的菌落，初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌，但鲜牛奶供应商仍认为此菌并非鲜牛奶所携带，因此要对本操作进行完善，完善的方案是_______________________________。

土壤中含有大量的难溶性磷酸盐，为了从土壤中筛选出能够将难溶性磷酸盐转化为植物能吸收的可溶性磷的优良解磷菌株，以便将其添加到有机肥中，改善植物磷元素供应。科研人员进行如下实验：

                               图1                                                               图2

实验原理：固体培养基中难溶性磷酸盐在微生物的作用下溶解，会在菌落周围形成透明圈(如图)，透明圈直径(D)与菌落直径(d)的比值(D/d)代表微生物溶解磷的能力大小。实验步骤：

    步骤1　取某地区土样5 g制得土壤溶液后稀释，取稀释液1 mL接种到基础培养基A上，在适宜温度下培养72 h。                  

    步骤2　在基础培养基A上用接种环挑取代表性菌落再次接种，培养3～4 d后观察菌落特征和透明圈的大小。

(1)从物理形态看，培养基A属于________培养基。培养基中磷源应该是_____________。

(2)步骤1中接种方法是________，步骤2中接种环的灭菌方法是________。

(3)根据实验结果可以确定溶解磷能力最强的菌株是________。

(4)为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力，研究人员将它们接种到基础培养基B中，并在37 ℃、200 r·min－1摇床培养，定期取上清液，测定溶液中可溶性磷含量，得到图2所示曲线。

①用摇床进行培养的好处是____________________、___________________。

②结果表明最优良的解磷菌株是________________________________________。

回答下列(一)、(二)小题：

    (一)牛奶是微生物生长的良好培养基。生鲜牛奶中的微生物情况反映了奶牛的健康状况，也影响奶制品的运输和贮藏；牛奶在饮用前都要经过巴氏消毒，以杀死有害微生物。

    (1)为检测消毒前后牛奶中细菌含量变化情况，做如图操作。用无菌吸管从三角烧瓶中吸取1 mL生牛奶稀释液至盛有9 mL无菌水的试管中，如此重复3次，将10 mL生牛奶稀释到10^－4浓度后，取0.1 mL滴在培养基上。

    ①将牛奶稀释液滴加在培养基上进行涂布，应选择的涂布工具是_______________。

    ②该涂布工具最合适的灭菌方法是_______________________。

    (2)图中所示方法为稀释培养法，按此方法培养得到的3个培养皿中菌落数分别为25个、23个、24个，则生牛奶中每毫升含细菌数为______个。

    (3)消毒后牛奶中绝大部分细菌被杀死，若用稀释平板法检测消毒后牛奶是否含有细菌，则在操作步骤上应作什么改动?______________________。

    (4)涂布结束后将培养皿______，在37℃______________中培养。

    (5)细菌种群进化过程中，起主要作用的变异是______。

    A．环境条件    B．基因重组    C．基因突变    D．染色体变异

    (二)兔肝细胞中的基因E编码代谢甲醛的酶，拟利用基因工程技术将基因E转移入矮牵牛中，以提高矮牵牛对甲醛的代谢能力，请回答：

    (1)从兔肝细胞中提取mRNA，在_________酶的作用下形成互补DNA。然后以此DNA为模板在体外利用____________反应大量扩增，得到基因E。在相关酶的作用下，将基因E与Ti质粒连接在一起，形成___________，再导入用氯化钙处理的_______________，侵染矮牵牛叶片。将被侵染的叶片除菌后进行培养，最终得到转基因矮牵牛。其中培养过程正确的是________________(A．叶片在含合适浓度生长素的培养基上分化形成愈伤组织  B．愈伤组织在含细胞分裂素和生长素配比较高的培养基上形成芽  C．再生的芽在细胞分裂素含量高的培养基上生根  D．愈伤组织在含合适浓度植物生长调节剂的培养基上脱分化形成再生植株)。

    (2)取转基因矮牵牛叶片，放入含MS液体培养基和适量浓度甲醛且密封的试管中，将试管置于__________上，进行液体悬浮培养。一段时间后测定培养基中甲醛的含量，以判断基因E是否在转基因矮牵牛中正常表达。培养过程中液体培养基的作用：一是提供营养；二是__________，从而使叶片保持正常形态。

牛奶富含蛋白质长期饮用有助于增强体质，但牛奶同时也是多种疾病的传播载体。国家标准是每毫升牛奶中细菌数小于30000个。以下是牛奶消毒及细菌检测实验。

（1）图中步骤①称为_______消毒法。步骤②是_______________。

（2）培养基中的蛋白胨可以为微生物提供_________________。进行步骤③操作时，应选用下列中的哪种工具？______。为了避免杂菌污染，此步骤应在____________附近进行。

在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。实验基本步骤如下：
―→―→―→
请回答下列有关问题：
(1)配制培养基时，各成分含量确定的原则是________                                   ________________。不论何种培养基，在各种成分都溶化后分装前，要进行的是__________________________________。
(2)倒平板的适宜温度是50℃左右，原因是_______________________________。待平板冷凝后，要将平板倒置，这样既可使培养基表面的水分更好地挥发，又可防止________________________。
(3)纯化菌株时，若使用稀释涂布平板法进行接种，应选择的涂布工具是图中的________；若使用平板划线法进行接种，应选择的接种工具是图中的________。

(4)划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有________________________________________________________________________。
(5)若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及培养物必须经过________处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。

金黄色葡萄球菌是一种耐高浓度食盐的致病菌,为探究某天然植物抗菌液对金黄色葡萄球菌的抑菌作用,某兴趣小组利用高压蒸汽灭菌锅(如下图)等器材进行了相关实验。请分析回答下列问题:

（1）实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是          ；为了减少灭菌后器皿被污染，灭菌前应该          。

（2）上图是灭菌锅及其局部剖面示意图，图中甲、乙、丙指示的依次是     。(填序号)

①安全阀、放气阀、压力表              ②放气阀、安全阀、压力表

③安全阀、放气阀、温度表              ④放气阀、安全阀、温度表

（3）下列关于高压蒸汽灭菌法的叙述错误的是         。

A.将装有培养基的灭菌包装入灭菌锅时,注意不要太挤,以免因影响蒸汽流通从而影响灭菌的效果

B.拧紧固定盖子的螺栓,要同时旋紧相对的两个螺栓,使螺栓松紧一致,不漏气

C.加热初期,必须把灭菌锅内的冷空气排尽

D.灭菌结束后,切断热源,旋松螺栓,打开盖子,取出灭菌物品

（4）将灭菌后的多组培养基均分为甲、乙两组,甲组加入适量的天然植物抗菌液,乙组加入等量的蒸馏水。将金黄色葡萄球菌菌液进行一系列的         后,采用       法分别接种到甲乙两组对应的培养基上,在适宜条件下培养一段时间后,观察比较不同组别的菌落数。由于金黄色葡萄球菌具有致病性,因此严格进行无菌操作,一方面是防止培养基被外界环境中的杂菌污染,另一方面也是为了防止         。

（5）在基本培养基中加入         可筛选出金黄色葡萄球菌。按照培养基的功能分类,

该培养基属于         培养基。

某生物兴趣小组通过测定土壤中的微生物的种类、含量等来了解其土质情况，并做了相关微生物的分离工作。回答相关问题。

⑴获得纯净培养物的关键是___________________________，这是研究和应用微生物的前提。

⑵从土壤中分离纤维素分解菌时，常从公园里、街道旁、花盆中的土壤或是农田、菜园土选取土壤时，原因是___________________________。

⑶该小组对某种菌进行扩大培养时等分为两组，A组静置培养，B组振荡培养。结果发现B组比A组的细菌要多得多，原因是_______________________________（答两点）。

⑷小组进一步发现，该土壤中只有一种真菌，欲使其从土壤中与其它细菌分离开，可在牛肉膏-蛋白胨培养液中加入___________。分离纯化后提取DNA测序发现含有产脲酶的基

因序列，请设计实验证明该种真菌可合成脲酶（简要说明实验步骤，结果，结论。相关试剂、仪器、菌种等都可提供）____________________

  Ⅰ．某同学以新鲜的泡菜滤液为实验材料纯化乳酸菌。请回答：

    （1）分离纯化乳酸菌时，首先需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的目的是保证在            培养基上获得__________。

    （2）制作的培养基必须使用__________（填仪器名称）灭菌后才能使用。如果在配制培养基的过程中加入碳酸钙，制出的培养基就显得不透明，用这种培养基来分离纯化乳酸菌，碳酸钙起到的作用有____________和____________。肉眼能明显观察到菌落时应挑选出__________的菌落作为候选菌。

    （3）获得的乳酸菌菌种若要采取临时保藏，首先要将菌种接种到试管的____________上，并在适宜的温度下培养，当菌落长成后才放入40度的冰箱保存。

    Ⅱ．回答下列与芳香油提取相关的内容。

    （1）实验室提取胡萝卜素常用____________法，而提取植物芳香油常用____________法。

    （2）如果蒸馏过程中不进行冷却，则芳香油提取量会____________。

    （3）在对玫瑰精油粗提取的过程中，玫瑰花瓣与清水的质量比为__________，向乳浊液中加入质量浓度为0.1g/mL的NaCI溶液的目的是__________用分液漏斗分离得到油层后，为了进一步去除水分，可以加入__________。

金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，可引起食物中毒、肺炎、肠炎等。某研究小组的同学用所学的微生物的实验室培养的方法进行“变质牛奶中金黄色葡萄球菌的分离和计数实验”，部分实验处理和结果如下图。（注:培养皿旁的数字代表菌落数目；实验室条件满足金黄色葡萄球菌的生长繁殖；实验操作规范；实验过程严格做好各项防护防扩散等工作）

请回答相关问题

（1）在实验室培养微生物，获得纯净培养物的关键是                    。

（2）据图，研究小组采用的是_______法分离和计数金黄色葡萄球菌。由样品到4号试管的操作中，第一步，将分别盛有9mL生理盐水的4支试管______，并编号1—4号；第二步，用移液管从样品中吸取1mL牛奶，注入1号试管中，充分摇匀；第三步，重复第二步骤操作，以此类推，4号试管的稀释倍数是_____。

（3）资料显示，金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10%—15%NaCL的肉汤中生长;本实验可配制含10%氯化钠的培养基，使之成为_______培养基，以利金黄色葡萄球菌的生长，抑制或阻止其他微生物的生长

（4）通过观察菌落特征可区分不同种类微生物，这些特征包括菌落的________、     、     和     等方面；在统计菌落数目时，需按照菌落计数的要求计数，以保证计数结果准确。据图可得出1mL牛奶样品中金黄色葡萄球菌的活菌数为_____。