在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。实验基本步骤如下：
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请回答下列有关问题：
(1)配制培养基时，各成分含量确定的原则是________                                   ________________。不论何种培养基，在各种成分都溶化后分装前，要进行的是__________________________________。
(2)倒平板的适宜温度是50℃左右，原因是_______________________________。待平板冷凝后，要将平板倒置，这样既可使培养基表面的水分更好地挥发，又可防止________________________。
(3)纯化菌株时，若使用稀释涂布平板法进行接种，应选择的涂布工具是图中的________；若使用平板划线法进行接种，应选择的接种工具是图中的________。

(4)划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有________________________________________________________________________。
(5)若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及培养物必须经过________处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。

（一）酵母菌是日常生产和生活中应用极其广泛的一种微生物。下图是有关酵母菌的实验操作。请据图回答：

(1)实验中试管用滤膜（封口膜）封住，其目的是___________________________，A和C过程所采用的接种方法分别是______________和______________。

(2)为了扩增酵母菌，可将经D过程接种后的三角瓶置于______培养一段时间，若要测定三角瓶中酵母菌的细胞数，可借助显微镜和血细胞计数板进行计数，下列操作不正确的是____（A.压在方格线上的细胞只计左线和上线上的酵母菌数  B.用滴管取1滴培养液到血细胞计数板的方格区，盖上盖玻片进行计数 

C.如果酵母菌有芽体，因为没有分离成两个子体，要以一个计数 D.计数方格内酵母菌总数应不少于300个）。

(3)G过程利用酵母菌进行果酒制作，为适当提高果酒的生产速率，进气口应____________，制作好的果酒，还可继续生产果醋，用果酒制作果醋的原理是__________________________（写化学反应式）。

（二）玉米自交系（遗传稳定的育种材料）A具有高产、抗病等优良性质，但难以直接培育成转基因植株，为使其获得抗除草剂性状，需进行一系列试验。部分试验如图所示。

（1）为防止酶切产物自身环化，构建重组DNA分子需用2种限制性核酸内切酶，选择的原则是____。

①Ti质粒内，每种限制性核酸内切酶只有一个切割位点

②G基因编码蛋白质的序列中，每种限制酶只有一个切割位点

③酶切后，G基因形成的两个粘性末端序列不相同

④酶切后，Ti质粒形成的两个粘性末端序列相同

A．①③         B．①④        C．②③       D．②④

（2）下表是4种玉米自交系幼胚组织培养不同阶段的结果。据表可知，细胞脱分化时使用的激素是__________，自交系_____的幼胚最适合培养成愈伤组织作为转化受体，用愈伤组织做受体细胞是因为其细胞表达___________的能力强，图示目的基因导入受体细胞的方法是_____________。

（3）农杆菌转化愈伤组织时，T-DNA携带插入其内的片段转移到受体细胞。筛选转化的愈伤组织，需使用含________的选择培养基。

（4）转化过程中，愈伤组织表面常残留农杆菌，导致未转化愈伤组织也可能在选择培养基上生长。含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能催化无色物质K呈现蓝色。用K处理后出现蓝色的愈伤组织可能是无农杆菌附着的转化愈伤组织或________________________。

胡萝卜素是常用的食品色素，可以用于治疗某些疾病，甚至有使癌变细胞恢复成正常细胞的作用，因此提取胡萝卜素具有重要的意义。胡萝卜素可以从植物中提取和养殖的岩藻中获得，还可以利用微生物发酵产生。如图为提取胡萝卜素的流程示意图，请回答下列问题：

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(1)胡萝卜素在人体内可以被氧化成________，有利于治疗夜盲症、干皮症等疾病；炒胡萝卜时要多加________，以利于胡萝卜素的溶解，从而更易被人体吸收。工业生产上，用养殖的岩藻作为原料获得胡萝卜素时，________(填“需要”或“不需要”)将新鲜的岩藻干燥。

(2)新鲜胡萝卜干燥时温度不能太高、时间不能太长，目的是________________________________。萃取时一般选用的萃取剂是________，影响萃取效率的因素有_____________________________________________________________________(答出三项即可)。萃取液浓缩前需进行过滤，其目的是_________________。鉴定萃取液中是否含有胡萝卜素时，通常可采用________法，并以________________样品作为对照。

(3)利用微生物发酵生产胡萝卜素时，培养微生物的培养基中的蔗糖和硝酸盐可以分别为微生物提供________和________。采用________法接种时需要先灼烧接种环，以防止杂菌污染。

为了获得β-胡萝卜素产品，某小组开展了产β-胡萝卜素酵母菌的筛选与色素提取实验。请回答下列问题：

(1)实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是________________________________；为了减少灭菌后器皿被污染，灭菌前应该________________。

(2)为了筛选出酵母菌，培养基中添加了青霉素，其目的是________________________________________________________________________。

(3)下图是灭菌锅及其局部剖面示意图，图中甲、乙、丙指示的依次是________。(填序号)

①安全阀、放气阀、压力表　②放气阀、安全阀、压力表

③安全阀、放气阀、温度表　④放气阀、安全阀、温度表

(4)为了将分离到的菌株纯化，挑取了菌落在3块相同平板上划线，结果其中一块平板的各划线区均未见菌生长，最可能的原因是________________。

(5)为增加β-胡萝卜素提取量，在研磨酵母细胞时，添加石英砂的目的是___________________________________________________________；研磨时________(填"需要"或"不需要")添加CaCO，理由是______________________________________。

下表是筛选异养型细菌的培养基配方。回答下列问题：

(1)苯胺是致癌物质，土壤中有分解苯胺的异养型细菌，若要筛选此异养型细菌，则此培养基中的成分X除了为目的菌提供能源外，还能提供_________，该培养基从物理性质看属于________培养基。中学实验室中对培养基进行灭菌的常用方法是____________。接种前，用灭菌后未接种的培养基培养一段时间，观察是否形成菌落，目的是________________________________________________________________________。

(2)如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，获得图A效果的接种方法是____________________。运用获得图B效果的方法接种时，操作上应注意每次划线前要灼烧________。

(3)在以尿素为唯一氮源的培养基中加______________可初步鉴定该种细菌能否分解尿素；在筛选能够分解纤维素的微生物过程中，常用到________染色法。

某大肠杆菌能在基本培养基上生长,其突变体M和N均不能在基本培养基上生长，但M可在添加了氨基酸甲的基本培养基上生长,N可在添加了氨基酸乙的基本培养基上生长。物M和N在同时添加氨基酸甲和乙的基本培养基中混合培养一段时后,再将菌体接种在基本培养基平板上,发现长出了大肠杆菌(X)的菌落。据此判断,下列说法不合理的是（ ）