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            • 1.

              “创卫”是创建卫生城市的简称。“卫生城市”是一个城市综合功能和文明程度的重要标志。某同学欲利用所学习的微生物培养知识,通过实验证明痰液中含有细菌,来倡导同学们不要随地吐痰,为“创卫”添一份力。请回答下列问题:

              (1)欲培养细菌必须先制备可供细菌生长的培养基。实验室中常用牛肉膏蛋白胨固体培养基来培养微生物,该培养基的组成成分包括牛肉膏、蛋白胨、NaCl________、H2O等;该培养基中微生物所需的氮源来自________,制备该培养基的步骤是:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板,其中灭菌常用的方法是_______________________________________________;培养基灭菌后,需要冷却到________ ℃左右才能倒平板,等平板冷凝后,还需要将平板倒置,主要目的是___________________________________________。

              (2)为了使实验更有说服力,某同学设置空白对照组和若干实验组,其中对照组的作用是____________________________________________________________。若在某次调查中,某一实验组平板上的平均菌落数为39个,而空白对照组的平板上出现了9个菌落,这种结果说明在此次调查中出现了________现象。

              (3)某同学利用稀释涂布平板法来统计样品中细菌的数目,统计结果往往比实际细菌的数目要低,主要原因是:____________________________________。

            • 2. 请回答下列与玉米秸杆处理有关的问题:
              (1)秸杆的主要成分是纤维素,牛本身没有相应的消化酶,但胃内有一种微生物可以帮助其分解,这种微生物与牛的种间关系为______.尿素并不是牛马的必须营养,过多甚至有害,但有经验的农民常在其草料内喷少量尿素,据此题的信息你认为尿素的作用是______.
              (2)分离纯化能分解秸秆的微生物时,需对培养基和接种针进行灭菌处理,常用的方法依次是______.
              (3)将玉米秸秆人工收获后,将其铡碎、压实、密封储藏.秸杆经此处理后,气味微酸芳香(主要由乳酸菌代谢产物造成).上述“压实密封”的目的是:人为造就一个______环境,利于乳酸菌的______.用这样处理后的秸杆饲喂牲畜的好处是______.
              (4)下面是分离分解纤维素的微生物的实验流程图:

              步骤(二)中选择培养基的营养物质的特点是______,步骤(三)中稀释的目的是______.
            • 3.

              酸奶是以牛奶为原料,经过巴氏杀菌后再向牛奶中添加有益菌,经发酵制成。家庭自制酸奶的安全隐患是有害菌污染问题,为检测自制酸奶是否被杂菌污染,进行如图所示操作。回答下列问题。


              (1)制备牛肉膏蛋白胨培养基,倒平板待其冷却后将平板倒置的主要原因是________。

              (2)取最终的牛奶稀释液0.1 mL滴在培养基上进行涂布,涂布前要将涂布器________才能涂布。如果培养基上出现________的菌落,说明自制酸奶已被杂菌污染。

              (3)在恒温培养箱中培养一段时间后,3个平板上菌落数分别为65个、63个、64个,则可以推测酸奶中每毫升含菌数为________个。运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小,原因是________。

              (4)已知酸奶中的有益菌主要是乳酸菌,进一步分离纯化乳酸菌的方法是________,该操作中常使用的接种工具是________。若培养后获得的某个平板,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,第二划线区域所划的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落,造成第一条线上无菌落的可能操作失误有________、________。

            • 4. 金黄色葡萄球菌是一种具有高度耐盐性的微生物,可引起人类肺炎、肠炎等疾病。金黄色葡萄球菌在血平板(培养基中添加适量人的血液)上生长时,可破坏菌落周围的红细胞,使其褪色。下图为定性检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程,请回答相关问题。

              (1)按细胞结构分类,金黄色葡萄球菌属于_________生物,从培养过程分析,金黄色葡萄球菌可进行____________呼吸。

              (2)用质量分数为7.5%的NaCl肉汤培养基进行选择培养的主要目的是_________________。

              (3)操作中在血平板上的接种方法是______________,接种操作前后需要对接种工具进行_____灭菌。

              (4)在制备血平板时需将pH调节至________(填“微酸性”或“微碱性”)后灭菌,待培养基____________后,再加入适量血液。按培养基功能分类,血平板属于________培养基。

              (5)经多次规范操作、重复实验,血平板上均出现______________________的菌落,初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌,但鲜牛奶供应商仍认为此菌并非鲜牛奶所携带,因此,要对本操作进行完善,完善的方案是________________________________________________。

            • 5.

              研究发现柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白质)均有抑菌作用,两者的提取及应用如图所示。请回答下列问题:

              (1)通常采用压榨法提取柚皮精油,该过程得到的糊状液体可通过布袋________除去其中的固体杂质。为了提高出油率,需要将新鲜的柚皮进行________处理,并用石灰水浸泡,作用是________________________________________________________________________。

              (2)筛选乳酸菌A时可选用________________________法接种。对新配制的培养基灭菌时常用的灭菌方法是________________。培养乳酸菌A的培养基中通常含有________、________、水和无机盐。

              (3)抑菌实验时,在长满致病菌的平板上,会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。

            • 6.

              下表所示配方的培养基可筛选某种细菌,该细菌可以在该培养基上生长,进而形成菌落。回答下列问题:

              KH2P04

              1.4g

              葡萄糖

              10.Og

              Na2HP04

              2.lg

              尿素

              1.Og

              MgS04•7H20

              0.2g

              琼脂

              15g

              将上述物质溶解后,用蒸馏水定容至lOOOmL

              (1)该培养基可筛选的细菌是_________________,判断的依据是_________________________________________。

              (2)如果从土壤中获取的样本含该细菌的数量较少,需要对样本中的细菌进行扩大培养,请判断能否用表格中的培养基来扩大培养___________(填“能”或“不能”),理由是____________________________________________________________。

              (3)如果需要对该细菌进行计数,则应用_________________法接种。为了确定该细菌确实属于所要分离的细菌,需要在培养基中加入_________指示剂。另一种接种细菌的常用方法是_______________________。

            • 7. [选修1:生物技术实践](15分)

              临床使用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验。实验时,首先要从病人身上获取少量样本(如痰液、粪便等),然后按照一定的实验步骤操作,以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题:

              ⑴为了从样本中分离并获取某种致病菌单菌落,可用             法或             法将人体样本接种于固体培养基表面,再经过选择培养、鉴别等步骤实现。

              ⑵为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性,取该单菌落适当稀释,接种于固体培养基表面,在37℃培养箱中培养24h,使其均匀生长,布满平板。将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板的不同位置,培养一段时间后,在四个滤纸片周围出现透明圈由大到小依次是A>C>D>B。由此推断,该病人目前适合使用的是抗生素        。含D的滤纸片周围的透明圈比含A、C的小,但透明圈中出现了一个菌落,这种菌落的出现可能是由于杂菌污染导致的,也可能是由于该致病菌发生了突变;若发生了基因突变,这种突变一般是否由抗生素诱发的?         ,若要证明这种致病菌发生了基因突变,可检测和比较这类细菌细胞中        (“DNA 的碱基组成”“mRNA 的含量”“ DNA 的碱基序列”)。

              ⑶为防止杂菌污染,培养基的灭菌方法是         灭菌,接种环的灭菌方法是         灭菌,接种过程应该在               旁进行。

            • 8. 紫杉醇具有独特的抗肿瘤作用.研究人员从红豆杉中发现了一种具有产紫杉醇能力的内生真菌.为探究制备红豆杉内生真菌原生质体(不含细胞壁)的适宜pH和温度,进行了如下实验:①培养菌株,离心收集菌丝体,并用渗透压稳定剂洗涤两次;②将获得的菌丝体,分别置于不同pH或温度的培养液中,并加入适量酶液,震荡、摇匀后,每隔一段时间,取样、过滤、离心,用渗透压稳定剂洗涤两次后,收集纯化的原生质体.③统计原生质体数量,结果如下. 分析回答:
              (1)步骤②中,加酶液的目的是______,洗涤时选用渗透压稳定剂的理由是______.
              (2)结果表明,制备红豆杉内生真菌原生质体的适宜条件是______、______.
              (3)检验原生质体再生能力,需要配制再生固体培养基,培养基灭菌后需要冷却到______℃左右才能用来倒平板.
              (4)实验中将收集到的原生质体浓度为30×106个/mL培养液先稀释104倍,再各取0.1mL稀释液分别均匀涂布在3个再生固体培养基上培养.一段时间后,统计得到的菌落数分别为:27、21、24.则原生质体再生率(能再生的原生质体数占全部原生质体的比例)约为______.
            • 9. 一研究小组测定了某河流水样中的细菌含量,并进行了细菌的分离等工作来调查其水质状况.回答下列问题:
              (1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量.在涂布接种前,随机取若干 ______ 后的空平板先行培养了一段时间,这样做的目是 ______ ;
              (2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌.操作时,接种环通过灼烧灭菌,在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线.这样做的目的是 ______ .
              (3)示意图A和B中, ______ 表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果.

              (4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养.结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快.分析其原因是:振荡培养能提高培养液的 ______ 的含量,同时可以使菌体与培养液充分接触,提高 ______ 的利用率.
            • 10.
              下列有关微生物培养的叙述,错误的是(  )
              A.获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染
              B.平板划线法和稀释涂布平板法都可对微生物进行计数
              C.培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌
              D.倒置平板可防止培养皿盖上的冷凝水滴落,造成污染
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