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            • 1.

              为了调查蓉江河的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌的分离等工作.回答下列问题:


              (1)制备实验所需的培养基时,在各成分都溶化后和分装前,常需要调节PH和灭菌,对培养基进行灭菌的常用方法是_______.倒平板时要待平板冷凝后,将平板倒置,其主要原因是______.

              (2)该小组可采用上图②所示的______(方法)检测水样中的细菌含量.在接种前,随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间,这样做的目的是______;然后,将1mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37据此可得出每升水样中的活菌数为______.

              (3)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌.操作时,接种环通过灼烧灭菌,在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线.这样做的目的是______。

            • 2.

              下列有关NaCl用法的叙述中,正确的是:

              提取玫瑰精油时加入NaCl利于油水分层

              筛选耐盐金黄色葡萄球菌时在培养基中加入高浓度NaCl溶液

              ③DNA粗提取时调节NaCl浓度改变DNA溶解度

              刚果红染色结束后,倒去刚果红溶液加入NaCl溶液洗去浮色

              A.①②           
              B.①②③           
              C.①②③④       
              D.①③④
            • 3.

              酵母菌作为一种常见的微生物,在传统和现代生物技术中得到了广泛的应用。请回答下列问题:

              (1) 酵母菌广泛分布在自然界中,若要得到纯化的酵母菌菌种,常采用的分离方法有_______。分离出的菌种在酿制果酒的过程中,早期是酵母菌进行繁殖的阶段,其细胞增殖所需要的能量主要来源于___(填细胞结构)。 

              (2) 酿酒酵母的生活史中有两种形态:单倍体和二倍体,图是酵母菌单倍体和二倍体的形态相互交替的过程(酿酒酵母的生活史),若图中甲的基因型为Dd,则乙、丙的基因型分别是______;图中②④过程所示的出芽繁殖类似于有丝分裂,正在出芽生殖的酵母细胞中有无“同源染色体”?____(选填“一定有”、“不一定有”或“一定没有”)。 


              (3) 为及时了解酵母菌种群密度变化,某时刻取出酵母培养液稀释100倍后,分别滴加0.1mL到三个相同的固体培养基上,置于温度为____℃的适宜条件下培养一段时间后进行菌落计数,三个培养基上菌落数分别为41、52、57,此时酵母菌的种群密度是____个·L-1。 

              (4) 酵母菌也常用作基因工程中的受体细胞,重组细胞的筛选过程所需培养基在接种前一般需要经过____灭菌,若选用二倍体的酵母细胞作为基因工程的受体细胞,目的基因只插入到酵母菌的一条染色体上,该酵母产生的子囊孢子萌发形成的单倍体酵母中含目的基因的比例是____。  

            • 4. 苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中,对环境有严重危害。小明同学准备依据下图操作步骤,从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题:

              (1) 酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作为碳源的有_______。 


              (2) 将采集到的样品接种培养,苯酚用量应随转接次数增加而逐渐______,以达到富集酚降解菌的目的。若上图平板中菌落过于密集,应进一步_____,以便于菌落计数与分离。制备平板培养基时除了需要水、营养物质外,还必须添加____。 

              (3) 图为连续划线法示意图,在图中____(填图中标号)区域更易获得单菌落。 


              (4) 采用比色测定法(使用苯酚显色剂)检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应,下表中15号比色管的苯酚浓度应分别为____________。 

              管号

              1

              2

              3

              4

              5

              6

              苯酚浓度/(mg·L-1)

               

               

               

               

               

              1


              如果废水为50 mg·L-1苯酚溶液,降解后约有21%的苯酚残留,则需将残留液稀释____(填标号:①5 ②10 ③20)倍后,再进行比色。 

            • 5. 回答有关微生物的问题.
              Ⅰ、凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶.培育产高酶活力凝乳酶微生物菌种是目前最有前途的发展方向.图1为产高酶活力凝乳酶的枯草芽孢杆菌培育过程.

              (1)枯草芽孢杆菌的芽孢是 ______ .
              A.休眠体    B.营养繁殖体    C.孢子        D.营养体
              (2)图1所示的b过程的目的是为 ______ ,接种用的平板培养基在制备时需注意的是 ______ (多选).
              A.待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板
              B.倒好的培养基和培养皿要进行高压灭菌处理
              C.等到平板培养基冷却凝固后才可以盖上培养皿的皿盖
              D.待平板冷却凝固约5-10min后将平板倒过来放置
              Ⅱ、在35℃、40分钟内能凝固1mL10%奶粉所需的酶量为一个酶活力单位(U).图2表示图1中提取得到的各种凝乳酶活力检测结果.
              (3)据图2所示,酶催化能力最强的是 ______ 组,而各组酶催化能力存在差异的原因是 ______ .
              (4)A2、A5组酶活力与A0组芽孢杆菌相同,两位同学对此做出了推测:
              ①同学甲:A2、A5组芽孢杆菌可能未发生基因突变,用 ______ 技术检测即可证实.
              ②同学乙:A2、A5组与A0组酶活力虽然相同,但也可能存在不同的基因突变,理论上的解释是 ______ .
            • 6. 工业上可以用微生物的发酵来获得β-胡萝卜素.回答有关胡萝卜素提取的问题:
              (1)培养基中的营养物质主要有______.为了使发酵菌种迅速繁殖,应用______培养基.发酵过程中应采用______技术来防止外来杂菌的入侵,保证发酵正常进行.
              (2)在胡萝卜素的提取过程中,石油醚是理想的萃取剂,因为它具有:、______、______等优点.萃取过程采用水浴加热,不用明火加热的原因是______.
              (3)若用胡萝卜的根尖细胞组织培养,则培养成的植株叶片的颜色为______,说明根尖细胞______.
            • 7. Ⅰ.细菌常被应用于生产生活中,如有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染.某同学欲从污染的土壤中筛选出能高效降解原油的细菌.
              (1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以 ______ 为唯一碳源的固体培养基上.为筛选出高效菌株,可比较单菌落周围清晰区域的大小.一般情况下,如图中清晰区域越大说明 ______ .
              Ⅱ.另一同学将第一步筛选得到的甲、乙、丙三种细菌分别接种到A、B、C三种培养液中,经培养后分别测得它们繁殖一代所需的时间,结果如表所示:
              注:“-”表示细菌没有生长.
              (2)在A培养基中增殖较快的细菌是 ______ .丙细菌可以在C培养液中繁殖却无法在B培养液中繁殖,原因是 ______ .
              (3)由于微生物的营养类型复杂,不同的微生物对营养物质的需求是不同的.如果培养能进行光合作用的微生物,培养基中的营养物质是 ______ (多选题),
              A.碳源    B.氮源    C.生长因子    D.无机盐     E.水
              Ⅲ.下面是有关某细菌G的四项实验:
              实验1:将G接种于一般培养基上,结果出现菌落.
              实验2:用一定剂量的紫外线处理G,产生突变种g1.将g1接种于一般培养基后,不出现菌落;但在培养基内添加营养物质甲后,就出现菌落.
              实验3:用另一剂量的紫外线处理G,得突变种g2,将g2接种于一般培养基后,也不出现菌落;但在培养基内添加营养物质乙后,就出现菌落.
              实验4:将g1和g2一起接种于一般培养基上,数日后出现菌落.
              (4)细菌g1和g2分别接种于一般培养基,均不能生长.其原因是用紫外线处理导致细菌G发生了 ______ ,从而缺乏合成营养物质甲或乙的酶.
              A.基因突变     B.基因重组     C.染色体畸变     D.不可遗传变异
              (5)实验1至3表明,物质甲和乙均是细菌G在代谢过程中产生的代谢产物.在实验2和3 中,它们是作为 ______ 加入一般培养基的.
              A.碳源     B.氮源        C.生长因子      D.无机盐
              (6)实验4中出现菌落的原因可能是 ______ .
            • 8. 尿素是一种重要的农业肥料,但是不经过细菌的分解,就不能更好地被植物利用.生活在土壤中的微生物种类和数量繁多,同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用,设计了以下实验,并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌),培养基成分如下表所示,实验步骤如图所示,请回答下列问题:

              (1)此培养基能否用于植物组织培养?______,理由是______.
              (2)培养基中氮源是______,这种培养基在功能上属于______培养基,目的是只允许能合成______的微生物生长,其他微生物均不能生长.
              (3)欲从土壤中分离获取上述特定微生物,可采用______法进行接种.
              (4)在以尿素为唯一碳源的培养基中加入______,使指示剂变红色,而筛选纤维素分解菌的方法是______法.
            • 9. (11分,除标注外每空1分)科研人员为了分离、筛选蓝莓果酒专用酵母来改善蓝莓果酒的品质,进行了如下实验:
              ①取不同品种的成熟蓝莓制果浆,置于恒温培养箱中自然发酵,直至产生大量气泡和明显酒味。
              ②将蓝莓发酵液梯度稀释后,进行涂布平板操作,每个梯度3个平板,并在恒温下培养2d,根据酵母菌菌落特征挑取单菌落。 
              ③将挑取的单菌落扩大培养后,通过平板划线法分离纯化并保存。 
              ④检测筛选菌株的发酵性能,得到如下实验结果。

              注:“-”表示不产气;“+”表示产气,“+”越多产气越多。 
              分析回答:

              (1)酵母细胞中能产生CO2的场所是             。(2分)步骤①恒温培养箱的温度控制在 20℃左右,其主要目的是              。(2分)

              (2)步骤②中,发酵液应使用       进行梯度稀释。稀释涂布平板法依据的原理是在稀释度足够高的菌液里,将聚集在一起的菌种分散成       ,从而能在培养基表面形成单个菌落。“一个菌落”在生态学中属于一个          

              (3)步骤③平板划线时,每次划线前后都要用     法对接种环进行灭菌。在做第二次以及其后的划线操作时,总是从上一次划线的末端开始划线,原因是      。(2分)

              (4)根据实验结果推知,            (品种)是较理想的酿酒菌种。

               

            • 10. 某小组同学为了调查垃圾处理场附近土壤中细菌污染情况,做了包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数等系列实验操作,请回答与此实验相关的问题.
              (1)培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了 ______ 和 ______ .
              (2)对培养基进行灭菌,应该采用的方法是 ______ .
              (3)将取自不同区域的土壤浸出液分别稀释涂布到不同的平板上,置于37℃ ______ 培养20小时后,观察到平板上有形态和颜色不同的菌落,这说明土壤样品中有 ______ 种细菌.一般说来,菌落总数越多,土壤遭受细菌污染的程度越 ______ .
              (4)如果要分离土壤中的纤维素分解菌,经常用 ______  的选择培养基,若要鉴别是否分离出了纤维素分解菌则应使用加入了 ______ 的鉴别培养基.
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