某生物兴趣小组通过测定土壤中的微生物的种类、含量等来了解其土质情况，并做了相关微生物的分离工作。回答相关问题。

⑴获得纯净培养物的关键是___________________________，这是研究和应用微生物的前提。

⑵从土壤中分离纤维素分解菌时，常从公园里、街道旁、花盆中的土壤或是农田、菜园土选取土壤时，原因是___________________________。

⑶该小组对某种菌进行扩大培养时等分为两组，A组静置培养，B组振荡培养。结果发现B组比A组的细菌要多得多，原因是_______________________________（答两点）。

⑷小组进一步发现，该土壤中只有一种真菌，欲使其从土壤中与其它细菌分离开，可在牛肉膏-蛋白胨培养液中加入___________。分离纯化后提取DNA测序发现含有产脲酶的基

因序列，请设计实验证明该种真菌可合成脲酶（简要说明实验步骤，结果，结论。相关试剂、仪器、菌种等都可提供）____________________

下表是筛选异养型细菌的培养基配方。回答下列问题：

(1)苯胺是致癌物质，土壤中有分解苯胺的异养型细菌，若要筛选此异养型细菌，则此培养基中的成分X除了为目的菌提供能源外，还能提供_________，该培养基从物理性质看属于________培养基。中学实验室中对培养基进行灭菌的常用方法是____________。接种前，用灭菌后未接种的培养基培养一段时间，观察是否形成菌落，目的是________________________________________________________________________。

(2)如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，获得图A效果的接种方法是____________________。运用获得图B效果的方法接种时，操作上应注意每次划线前要灼烧________。

(3)在以尿素为唯一氮源的培养基中加______________可初步鉴定该种细菌能否分解尿素；在筛选能够分解纤维素的微生物过程中，常用到________染色法。

(1) 图中细菌培养基和选择培养基成分上的主要区别是后者_________。

(2) 土壤样品需稀释后振荡摇匀，用_________准确吸取0.1 mL土壤悬液，滴加在培养基中，均匀涂布，将培养皿倒置后放在_________中培养一段时间，获得细菌菌落。

(3) 在5个细菌培养基平板上，共接种稀释倍数为10⁵的土壤样品液0.5 mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191，则每毫升土壤样品中的细菌数量为

_________个。

(4) 研究人员用鉴别培养基来鉴定细菌，刚果红培养基平板上得到部分有透明降解圈的菌落(见图)，图中菌落_________的细菌最适合作为目的菌保存。不考虑基因突变，上图甲中鉴别培养基中的菌落周围是否都有透明圈？_________

（5）某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是________ 。

(6) 图中菌种若要长期保存，应该将其放在_________条件下。

如图为分离微生物的流程示意图，请据图回答问题：

（1）微生物培养时，选取_________________时的记录作为结果，这样可以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目．

（2）若要对分离的细菌做进一步的鉴定，还需借助物理化学的方法：若要鉴定是否有分解尿素的细菌，可以在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_________指示剂，若指示剂变红，说明培养基的PH____________，这样可以鉴定这种细菌可以分解尿素；若要鉴定是否有分解纤维素的细菌，在长出菌落的培养基上，覆盖_________染液，10～15min后，倒去该染液，再加入1mol/L的NaCl溶液，15min后，也倒去该溶液，若菌落的周围出现__________，说明此细菌能分解纤维素．

（3）在 10⁵ 稀释度下求出 3 个平板上菌落数的平均值为63，那么，每克样品中的菌落数为_______________．

秋收季节，北方的玉米田里“狼烟滚滚”，这是没有被深埋的玉米秸秆被粮农焚烧的结果。秸秆焚烧不仅浪费了能源，还污染了环境。研究人员发现某种细菌在无氧条件下可利用秸秆发酵生产甲烷，实现了能量更多的流向人类的目标。回答下列问题：

  (1)在实验室中纯化产甲烷的菌株时，为了得到单个菌落，可采用的培养基是__________(填“固体”或“液体”)培养基。将菌液接种于新的培养基上，该操作应在酒精灯火焰旁进行的原因是______________________________________________________________________。

  (2)在生产过程中将秸秆粉碎后制成产甲烷细菌的培养液，一般无需灭菌但需要______________处理以减少培养液中的氧气。因不同种类的产甲烷细菌中不同，需将装置置于不同温度条件下。

  (3)研究发现产甲烷细菌广泛分布在土壤中，推测其应分布在土壤的___________(填“深层”或“表层”)。硫基乙烷磺酸是产甲烷细菌特有的一种辅酶，利用该酶的特性制定的筛选产甲烷细菌的培养基称为__________。

  (4)科学家在北方冻土中发现了一种食甲烷的细菌，随着温度升高，冻土融化，冻土中的食甲烷细菌也活跃起来，这样可以避免因冻土中甲烷、二氧化碳释放引起更明显的__________现象。

下表是筛选异养型细菌的培养基配方。回答下列问题：

(1)苯胺是致癌物质，土壤中有分解苯胺的异养型细菌，若要筛选此异养型细菌，则此培养基中的成分X除了为目的菌提供能源外，还能提供_______，该培养基从物理性质看属于________培养基。中学实验室中对培养基进行灭菌的常用方法是____________。接种前，用灭菌后未接种的培养基培养一段时间，观察是否形成菌落，目的是________________________________________________________________________。

(2)如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，获得图A效果的接种方法是____________________。运用获得图B效果的方法接种时，操作上应注意每次划线前要灼烧________。

(3)在以尿素为唯一氮源的培养基中加______________可初步鉴定该种细菌能否分解尿素；在筛选能够分解纤维素的微生物过程中，常用到________染色法。

如表所示甲、乙分别是分离两种土壤中微生物的培养基的配方，图丙所示为相关分离过程，回答下列问题：

注：水解酪素，即水解酪蛋白，由酪蛋白水解得到。

(1)从功能上看，甲培养基属于________。从物理性质上看，甲培养基属于________。其中提供氮源的物质是________。

(2)如果将乙培养基配制成固体培养基，则在该培养基上长出的菌落是否都能分解纤维素？________。如果培养基中加入________可以筛选出具有分解纤维素能力的菌株，同时透明圈越________(填“大”或“小”)，表示该菌分解纤维素的能力越强。

(3)为了计数微生物的数量，图丙采用________法进行接种培养计数，除此之外，还可以采用__________法进行计数。其中前一种计数方法所得结果要比后一种计数方法所得结果________(填“大”或“小”)。

(4)一位同学利用图丙的方法将10g土壤溶于90ml无菌水中，采用稀释涂布平板法在4个平板培养基上分别接种0.1 mL土壤稀释液④，培养后菌落数分别为180、155、176、129个，则1 g原土壤样品中微生物数量约为________。

回答下列关于微生物的培养和应用的相关问题：

（1）现在大力提倡无纸化办公，但是每年仍然不可避免地产生大量的废纸。废纸的主要成分是木质纤维，人类正努力将其转化为一种新的资源——乙醇。如图是工业上利用微生物由纤维素生产乙醇的基本工艺流程，请回答相关问题：

①自然界中①环节需要的微生物大多分布在富含纤维素的环境中，将从土壤中获得的微生物培养在以纤维素为唯一碳源、并加入_______的培养基上，筛选周围有_____的菌落。

②在如上所述的筛选过程中获得了三个菌落，对它们分别培养，并完成环节②，且三种等量酶液中酶的浓度相同，则你认为三种酶液的活性__________________(一定相同、不一定相同、一定不同)，可以通过_____________________进行定量测定。

③根据测定结果，①环节常选择木霉，则②中获得的酶是纤维素酶，该复合酶包括____________________________________。

④生产中可以满足④环节的常见菌种是________，为了确保获得产物乙醇，⑤环节要注意____________。

（2）羧甲基纤维素钠（CMC）是常用的食品添加剂，不能被人体消化吸收，因此通常被认为是安全的食品添加剂．研究者用含1.0%CMC无菌水作为饮用水，连续饲喂实验小鼠12周，测定小鼠体重，结果如图1、图2所示。（注：假设无菌环境饲养小鼠的消化道中无微生物）

根据所学知识，回答下列有关生物技术实践的问题

（1）为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量：

①该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是                             ；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为46、45和44，据此可得出每升水样中的活菌数为___________。

②该小组采用平板划线法分离水样中的细菌，操作时，接种环通过___________灭菌，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是_______                     。

    （2）尿素是一种重要的农业氮肥。但是，尿素并不能直接被农作物吸收，只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后，才能被植物利用。土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成         。

   （3）在筛选纤维素分解菌的过程中，人们发明了          ，这种方法能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选。其基本的实验设计流程是①土壤取样→②         →③梯度稀释→④将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→⑤                      。

请回答下面与微生物的培养与应用有关的问题：

  (1)在微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是______________________；对玻璃器皿的灭菌方法为__________。

  (2)微生物常用的接种方法有2种，但只有______________方法可用于微生物的计数，运用该方法计数的结果往往比实际结果__________。

  (3)农作物秸秆中含有大量的纤维素，利用微生物可以将纤维素转化为酒精以供人类所需。将纤维素转化为酒精需要先将纤维素转化为葡萄糖，将纤维素转化为葡萄糖的酶是一种复合酶，它包括C₁酶、_________________，将葡萄糖转化为酒精的微生物是__________。

  (4)下表是分离某种微生物的培养基配方：

表中X物质最可能为________(碳源、氮源、无机盐)；培养基中添加琼脂的作用是______________________________________。