【生物——选修1：生物技术实践】

某同学进行苹果汁制作实验，工艺如下图所示。

请回答：

(1)图中用KMnO₄溶液浸泡苹果的目的是________。黑曲霉提取液中含有的________可水解果胶，从而使果汁澄清。固定化柱中填充的石英砂通过________方式将酶固定化，酶被固定后用蒸馏水洗涤固定化柱是为了除去________。

(2)实验中，操作流程A和B的先后顺序为________。在苹果汁澄清过程中，应关闭的流速调节阀是________。要测定从固定化柱流出的苹果汁中是否还有果胶，可取一定量的果汁与等量的________混合，如果出现________现象，说明果胶还没有被完全水解。为使果胶完全水解，应将流速调________。

(3)实验后，将洗涤过的固定化柱在低温环境中保存若干天，该固定化柱仍可用于苹果汁制作实验，说明固定化酶可被________使用。

苹果酒、苹果醋、苹果汁等是人们餐桌上的常见食品。请结合相关知识回答以下问题：

（1）如图所示是在苹果酒的基础上制作苹果醋的流程图。写出过程②发生的化学反应式：                                   ；过程②常用的发酵菌是             ，

可以在食醋中获得，分离和纯化该微生物的方法如下：

第一步：配制培养基。根据物理性质，培养该微生物的培养基为              。

第二步：采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌处理，并倒平板。

第三步：               。

第四步：培养。温度控制在                  。

第五步：挑选符合要求的菌落。

（2）某同学计划统计食醋中该发酵菌的总数，他选用10⁴、10⁵、10⁶稀释液进行涂布，每种稀释液都设置了3个培养皿。从设计实验的角度看，还应设置的一组对照实验是                        　　　　　　　    ，此对照实验的目的是证明                是否被杂菌污染。

（3）果胶酶能分解果胶，瓦解植物的___________________，使榨取果汁变得更容易；果胶分解成可溶性的__________________，从而使浑浊的果汁变得澄清。果汁生产时，为了使果胶酶得到充分的利用，节约成本，在控制好温度和PH的基础上还需要控制好              。

(2）由霉菌发酵生产果胶酶是食品工业中使用量最大的酶制剂之一，果胶酶是分解果胶的一类酶的总称，包括          、果胶分解酶、果胶酯酶等；在探究果胶酶的用量实验中，因变量是              。

(3)无菌技术是影响植物组织培养能否成功的重要因素。用       和质量分数为0．l%的氯化汞对外植体消毒，用        清洗，接种时每次使用器械后都需要        灭菌；接种3-4d后，观察外植体的生长情况，若发现外植体被污染，分析其原因可能是          。（至少答出两点）

下面是A同学探究温度对果胶酶活性影响的实验步骤：

用搅拌器制苹果泥，适量且等量的注入到编号为1、2、3、4、5、6的6支试管中；

分别向这6支试管依次注入适量且等量的果胶酶溶液，并混合均匀；

将6支试管分别放入 25℃、 30℃、 35℃、 40℃、 45℃、 50℃的恒温水浴保温10 min；

过滤，比较获得果汁的体积。

（1）①上述实验中步骤有一处明显不严谨，请指出并改进                                                                                                      ；

         ②有同学认为该实验缺乏对照，应补充一组果汁和蒸馏水相混合的实验，你认为有没有必要？说明理由_____________________________。

（2）B同学探究的是 35℃和 45℃下果胶酶的最适用量，他在实验过程中除了温度以外还应该控制                     等因素保持不变(列举两个)。下表是该同学的实验结果，请根据他的实验结果画出曲线，并得出结论。