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            • 1.

              含有限制酶的细胞中通常还具有相应的甲基化酶,这两种酶对DNA分子有相同的作用序列,但具有不同的催化功能。甲基化酶可以对DNA序列进行修饰,使限制酶不能对这一序列进行识别和切割。回答下列问题:

              (1)目前,基因工程中使用的限制酶主要是从_________生物中分离纯化获得的。构建“基因组文库”和“cDNA文库”的过程中需要使用DNA连接酶的是____________________。(填字母A:基因组文库、B:cDNA文库、C:基因组文库和cDNA文库)。

              (2)含有某种限制酶的细胞,可以利用限制酶切割外源DNA,但不破坏细胞自身的DNA,其原因可能有①______________;②___________。

              (3)利用PCR技术扩增目的基因的过程由高温变性(90~95℃)、低温复性(55~60℃)、适温延伸(70~75℃)三个步骤构成一个循环,为使得DNA聚合酶能够重复利用,选用的酶应在____________℃处理后仍然具备催化活性。

              (4)在PCR扩增目的基因时,为实现序列中的腺嘌呤被放射性同位素标记,反应体系中添加的原料应包括碱基已被标记的____________(填"腺嘌呤核糖核苷酸"、"dATP"或"ATP")。

            • 2.

              有关PCR技术中引物的表述错误的是

              A.一般成对加入                    
              B.引导DNA子链的合成

              C.为复制提供模板                   
              D.可以与目的基因两端的序列互补配对
            • 3.

              下图为cDNA形成和PCR扩增过程示意图。下列相关叙述正确的是

              A.催化②⑤过程的酶都是DNA聚合酶,都能耐高温

              B.催化①过程的酶是RNA聚合酶

              C.④过程发生的变化是引物与单链DNA结合

              D.如果RNA单链中A与U之和占该链碱基含量的40%,则一个双链DNA中,A与U之和也占该DNA碱基含量的40%
            • 4.

              有关PCR技术的说法,不正确的是(  )

              A.PCR是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术
              B.PCR技术的原理是DNA双链复制
              C.利用PCR技术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列
              D.PCR扩增中必须有解旋酶才能解开双链DNA
            • 5.

              请利用所学知识回答基因工程方面的有关问题:

              (1)基因工程所用的生物学原理为_________________,其操作的核心步骤为_________________,在操作的过程中没有涉及碱基互补配对的步骤为_________________,获取目的基因的来源有_________________和_________________。

              (2)利用PCR(聚合酶链式反应)技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物A、B为单链DNA片段,它是目的基因子链合成延伸的基础。

              PCR过程除需要适宜的温度、模板DNA、引物,还需要_____________、_____________等条件才能扩增出大量DNA片段。

              (3)将目的基因导入植物细胞时,采用最多的方法是_________________。目的基因进入受体细胞后的表达过程中,RNA聚合酶需与_________________识别和结合,从而驱动转录过程。最终目的基因是否成功表达,常用_____________方法进行检测,若出现杂交带,表明目的基因已形成蛋白质产品。

              (4)蛋白质工程是在基因工程的基础上发展起来的,其基本流程为_________________、________________、________________、找到对应的脱氧核苷酸序列。

            • 6.

              下列关于现代生物科学技术与应用的叙述中,正确的是

              A.利用PCR扩增目的基因时,需利用Taq DNA 聚合酶

              B.通过植物组织培养获取细胞产物的过程中,需对培养基进行灭菌处理

              C.在胚胎分割移植前,可用分割针取滋养层细胞鉴定性别

              D.生态农业实现了物质与能量的循环利用
            • 7.

              将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗,饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。

              图乙
                                                          图甲
                 

                 表甲      表乙                         

                       

              请根据以上图表回答下列问题。

              (1)在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中,使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶,其最主要的是____________________ 。通过PCR技术扩增目的基因前,需要根据这两个基因的一段已知核苷酸序列来合成__________ 。

              (2)PCR过程中退火(复性)温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表1为根据模板设计的两对引物序列,图2为引物对与模板结合示意图。请判断哪一引物对需采用较高的退火温度?____________________。

              (3)图甲步骤③所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求?__________  。

              (4)为将外源基因转入马铃薯,图甲步骤⑥转基因所用的细菌B通常为____________________。

              (5)构建重组DNA分子所用的限制性内切酶和DNA连接酶分别作用于图中的_________处(填“a”或“b”)。



              (6)对符合设计要求的重组质粒T进行酶切。假设所用的酶均可将识别位点完全切开,请根据图甲中标示的酶切位点和表乙所列的识别序列,对以下酶切结果作出判断。

              ①采用EcoRⅠ和PstⅠ酶切,得到__________种DNA片断。

              ②采用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切,得到__________种DNA片断。

            • 8.

              将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗,饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。

               

              请根据以上图表回答下列问题。

              (1)在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中,使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶,其最主要的特点是                             。通过PCR技术扩增目的基因前,需要根据这两个基因的一段已知核苷酸序列来合成                                  

              (2)PCR过程中退火(复性)温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表1为根据模板设计的两对引物序列,图2为引物对与模板结合示意图。请判断哪一引物对需采用较高的退火温度?                            

              (3)图1步骤③所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求?                         

              (4)为将外源基因转入马铃薯,图1步骤⑥转基因所用的细菌B通常为     

              (5)构建重组DNA分子所用的限制性内切酶和DNA连接酶分别作用于图中的                               处(填“a”或“b”)。

              (6)若将目的基因成功导入马铃薯细胞后通常需用到            技术得到马铃薯植株。该技术的核心步骤是                   与再分化。

              (7)马铃薯块茎合成淀粉时需要酶A的催化,若要获得马铃薯块茎生物反应器,则在构建动物致病菌的抗原基因表达载体时,应选择                  基因的启动子。

            • 9.
              PCR技术扩增DNA,需要的条件是(  )
              ①目的基因  ②引物 ③四种脱氧核苷酸 ④耐高温的DNA聚合酶等 ⑤mRNA  ⑥核糖体.
              A.①②③④
              B.②③④⑤
              C.①③④⑤
              D.①②③⑥
            • 10.

              利用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂的流程如下图所示,有关叙述正确的是

              A.过程①需使用反转录酶
              B.过程②利用PCR扩增CarE基因需使用解旋酶和耐高温的DNA聚合酶
              C.过程③可用NaCl溶液处理大肠杆菌,使之成为感受态细胞
              D.过程④可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞
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