含有限制酶的细胞中通常还具有相应的甲基化酶，这两种酶对DNA分子有相同的作用序列，但具有不同的催化功能。甲基化酶可以对DNA序列进行修饰，使限制酶不能对这一序列进行识别和切割。回答下列问题：

（1）目前，基因工程中使用的限制酶主要是从_________生物中分离纯化获得的。构建“基因组文库”和“cDNA文库”的过程中需要使用DNA连接酶的是____________________。（填字母A:基因组文库、B:cDNA文库、C:基因组文库和cDNA文库）。

（2）含有某种限制酶的细胞，可以利用限制酶切割外源DNA，但不破坏细胞自身的DNA，其原因可能有①______________；②___________。

（3）利用PCR技术扩增目的基因的过程由高温变性（90~95℃）、低温复性（55~60℃）、适温延伸（70~75℃）三个步骤构成一个循环，为使得DNA聚合酶能够重复利用，选用的酶应在____________℃处理后仍然具备催化活性。

（4）在PCR扩增目的基因时，为实现序列中的腺嘌呤被放射性同位素标记，反应体系中添加的原料应包括碱基已被标记的____________(填"腺嘌呤核糖核苷酸"、"dATP"或"ATP")。

棉铃虫是一种严重危害棉花的害虫.我国科学工作者发现一种生活在棉铃虫消化道内的苏云金杆菌能分泌一种毒蛋白使棉铃虫致死，而这种毒蛋白对人畜无害．通过基因工程方法．我国已将该蛋白基因转入棉花植株并成功表达．由于棉铃虫吃了这种转基因棉花的植株后就会造成死亡，所以该棉花新品种在1998年推广后，已取得了很好的经济效益．请根据上述材料回答下列问题：

（1）毒蛋白对人畜无害，但能使棉铃虫致死，从蛋白质特性来看，蛋白质具有______________．

（2）利用苏云金杆菌防治棉铃虫属于生物防治，它突出的优点是___________________．

（3）转基因棉花的抗虫变异来源，属于可遗传变异类型中的___________________________．

（4）从苏云金芽孢杆菌中切割抗虫基因所用的工具是_________，此工具主要存在于______中，其特点是___________________________

下列是利用生物技术制备抗体的两个途径模式简图。请据图回答下列问题：

(1)过程①至②所获取的抗体1称为____________，其中过程①是指细胞工程中的____________技术。

(2)④过程需要____________酶，⑤过程需要的工具酶为________________________________。

(3)②处需要筛选，其培养基称为____________(填“选择培养基”或“鉴别培养基”)。结构甲的组成必须包括启动子________________________________及目的基因等(写两项)。

(4)如果想用棉花产生该种抗体，则⑥过程的受体细胞通常选用____________菌，经过筛选后再侵染棉花体细胞，转化成功后通过____________技术获得能产抗体的转基因棉花植株。

根据基因工程的有关知识，回答下列问题。

(1)限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有________和________。

(2)质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下：

AATTC……G

G……CTTAA

为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是____________________________________。

(3)按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即________DNA连接酶和________DNA连接酶。

(4)反转录作用的模板是________，产物是________。若要在体外获得大量反转录产物，常采用________技术。

(5)基因工程中除质粒外，________和________也可作为运载体。

水稻白叶枯病病菌可使水稻叶片形成病斑导致水稻减产。研究者将野生稻中找到的抗白叶枯病基因X转入水稻植株中，培育出抗白叶枯病水稻，对其白叶枯病抗性进行鉴定和遗传分析。

（1）将基因X与载体结合构建______________，用农杆菌转化法导入感病水稻，获得T₀代植株。

（2）用____________稀释白叶枯病菌液，接种于T₀代植株，以_________占叶片面积的百分率（M）作为抗病反应参数，以__________作为感病对照，筛选抗病植株。

（3）选T₀代植株中M为1%，PCR鉴定基因X为阳性的植株种植，收获__________（填“自交”、“杂交”或“测交”）种子种植获得T₁代，对T₁代进行抗病及分子鉴定，其结果如下表所示：

注：15%为抗感界限

据表分析，T₁代的抗病性状出现了__________现象，说明T₀代植株为__________。最早在__________代能够选择到稳定遗传的抗病植株。

（4）T₁代某一植株表现为感病，但PCR检测为阳性，最可能的原因是插入的基因X______________造成的。

（5）研究人员发现有一转基因水稻植株自交后代的统计结果中，抗白叶枯病植株:不抗白枯叶病植株=15:1，检测其转入的基因X功能正常，推测转入了两个抗性基因，且两个抗性基因位于___________上。

生物学家利用基因工程技术通过生物反应器生产人的血清蛋白。请根据相关知识回答下列问题：

（1）在基因工程的操作中的“分子手术刀”是        _     _    。

（2）在基因工程的操作中的“分子缝合针”是                     。

（3）基因工程中最常用的运载体是                            。

为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。

(1)   获得耐盐基因后，可用PCR技术对该基因进行扩增，此技术的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便                                 。

(2)   在构建基因表达载体的过程中，所用的限制性内切酶和DNA连接酶分别作用

于                处。(填“a”或“b”)

(3)将基因导入植物细胞的常用方法有农杆菌转化法和                     三种。

(4)将导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用植物组织培养技术，

该技术的核心环节是                              。

(5)为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，可以在分子水平上用放射性同位素标记的                 作探针进行分子杂交检测，

研究人员将动物体内的能够合成胰岛素的基因与大肠杆菌的DNA分子重组，并且在大肠杆菌中表达成功．请据图1回答：

C．既不能被E也不能被F切开 D．能被F但不能被E切开．