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          50条信息

            • 1.

              科学家从某无限增殖细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因(prG),该基因能激发细胞分裂,这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景。请回答:

              (1)利用动物细胞融合技术制备单克隆抗体,常用聚乙二醇、________、电激等诱导因素诱导动物细胞融合。经选择性培养的杂交瘤细胞,还需进行________和________,经多次筛选以获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。

              (2)有人提出用核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体,请完成设计方案:

              ①取________细胞的细胞核,移植到去核的________细胞中,构成重组细胞。

              ②将重组细胞在________条件下做大规模培养或注射到小鼠________内增殖,以获得大量单克隆抗体。

              (3)也有人提出,可以直接通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体,其思路如图所示。

              ①酶A是指________,酶B是指__________________________。

              ②图中Ⅰ表示________,对Ⅱ进行检测与鉴定的目的是______________,Ⅲ所指的细胞具有的特点是_______________。

            • 2. 番茄营养丰富,是人们喜爱的一类果蔬。但普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因(PG),控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶,该酶能破坏细胞壁,使番茄软化,不耐贮藏。为满足人们的生产生活需要,科学家们通过基因工程技术,给普通番茄细胞中导入抗多聚半乳糖醛酸酶基因(抗PG),培育出了抗软化、保鲜时间长的番茄新品种。操作流程如如图所示,请据图回答:

              (1)过程①通常会用两种限制酶切割目的基因的原因是_______________________ 。
              (2)经过程②可获得三种土壤农杆菌,除依据质粒上的___________筛选出的含重组DNA的土壤农杆菌外,还有___________、___________的两种土壤农杆菌。
              (3)从图中可见,mRNA1和mRNA2的结合直接导致了___________无法合成,最终使番茄获得抗软化的性状。
              (4)目的基因能否在番茄细胞内稳定存在的关键是___________。

              (5)如果利用上述方法培育出的蕃茄不具抗软化性状,经分子杂交技术检测,发现细胞内有抗PG存在,但检测不到mRNA2分子,可能原因是目的基因(抗PG)上游缺少___________。

            • 3. 某一质粒载体如图所示,外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因).有人将此质粒载体用BamHI酶切后,与用BamHI酶切获得的目的基因混合,加入DNA连接酶进行连接反应,用得到的混合物直接转化大肠杆菌,结果大肠杆菌有的未被转化,有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种,分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题:

              (1)限制性核酸内切酶作为基因工程的工具,其作用特点是 ______ 。
              (2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选,在上述四种大肠杆菌细胞中,未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的,其原因是 ______ ;并且 ______ 和 ______ 的细胞也是不能区分的,其原因是 ______ 。在上述筛选的基础上,若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落,还需使用含有 ______ 的固体培养基。
            • 4.

              治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义。流程如下:


              (1)过程①采用的是细胞工程中的__________技术,过程②采用的是胚胎工程中的_____技术。

              (2)体细胞进行体外培养时,所需气体主要有O2和CO2, 其中CO2的作用是维持培养液的____。
              (3)如果克隆过程中需进行基因改造,在构建基因表达载体(重组载体)时必须使用__________和_________两种工具酶。基因表达载体上除目的基因外,还需有__________基因,以便选出成功导入基因表达载体的细胞。

              (4)胚胎干细胞可以来自于囊胚中的___________。在一定条件下,胚胎干细胞可以分化形成不同的组织器官。若将图中获得的组织器官移植给个体_____(填“A”或“B”),则不会发生免疫排斥反应。

            • 5.

              屠呦呦因发现青蒿素治疗疟疾的新疗法而获得诺贝尔奖。寄生于人体细胞内的疟原虫是疟疾的病原体。科学家通过紫外线处理大量青蒿幼苗后,偶然发现一株高产高效植株,进行基因测序发现该植株控制青蒿素合成相关的一种关键酶的基因发生了突变。

              (1)如果用高产青蒿关键酶基因的mRNA反转录产生的cDNA片段与载体连接后储存在一个受体菌群中,这个受体菌群叫做青蒿的___________;获得的cDNA与青蒿细胞中该基因碱基序列_________(填“相同”或“不同”)。在提取RNA时需要向提取液中添加RNA酶抑制剂,其目的是___________。

              (2)将获得的突变基因导人普通青蒿之前,先构建基因表达载体,图1、2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答:

              用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒时不能使用Sma Ⅰ切割,原因是__________。构建重组质粒时,在其目的基因前需要添加特定的启动子,启动子的作用是________________。

              (3)转基因技术是否成功,需要对受体细胞进行分子水平的检测,首先是用____________方法检测受体细胞染色体DNA上是否插入目的基因,其次需要用_____________方法检测目的基因是否转录出了mRNA。最后,还要检测人乳铁蛋白是否成功表达。

            • 6. 下图为某转基因小鼠培育过程示意图,①~⑦表示相关过程。请回答:

              (1) 过程①注射的A物质是指________________________

              (2) 过程③需要用同种限制酶分别切割目的基因和载体,其目的是________。

              (3) 基因工程技术引起的生物变异属于可遗传变异中的________。

              (4) 过程③中构建的基因表达载体除了含有目的基因外,在组成上还需要含有            。

              (5) 过程④中,受精卵一般作为动物基因工程的受体细胞,除了因为受精卵的具备全能性外,还有什么优点?         。

            • 7.

              在培育转基因植物的研究中,卡那霉素抗性基因(kan)常作为标记基因,只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。

              请据图回答:

              (1)A过程需要的酶有___________________________。

              (2)B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是① _______________,

              ②_______________________。

              (3)C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外,还必须加入___________。

              (4)如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测,D过程应该用________________作为探针。

               (5)离体的棉花叶片组织经过C-D过程成功的培育出了转基因抗虫植株,此过程涉及的细胞工程技术是______________,该技术的原理是_______________。

               (6)科学家将植物细胞培养到____________,包上人工种皮,就制成了神奇的人工种子。

            • 8.     为筛选出含重组质粒的受体细胞,需在培养基中添加的物质是___________。


            • 9.

              人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白,可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下:


              (1)htPA基因与载体用 切割后,通过DNA连接酶连接,以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA,可采用      技术。 

              (2)为获取更多的卵(母)细胞,要对供体母羊注射 ,使其     。采集的精子需要经过 才具备受精能力。 

              (3)将重组表达载体导入受精卵常用的方法是     。为了获得母羊,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行 。在胚胎移植前,通过 技术可获得较多胚胎,这体现了早期胚胎细胞的 。 

              (4)若在转htPA基因母羊的羊乳中检测到 ,说明目的基因成功表达。 

            • 10.

              下图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病(基因缺陷导致胰岛B细胞不能正常合成胰岛素)的过程设计图解,请据图回答:

              (1)图中①、③所示的结构分别是__________、__________。

              (2)图中②、④所示的生物工程技术分别是__________、______

              __________。

              (3)过程④通常用③做受体细胞的原因是③细胞__________。

              (4)过程④的完成需要用到的基因操作工具有__________。

              (5)图示方法与一般的异体移植相比最大的优点是__________

              __________。

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