含有限制酶的细胞中通常还具有相应的甲基化酶，这两种酶对DNA分子有相同的作用序列，但具有不同的催化功能。甲基化酶可以对DNA序列进行修饰，使限制酶不能对这一序列进行识别和切割。回答下列问题：

（1）目前，基因工程中使用的限制酶主要是从_________生物中分离纯化获得的。构建“基因组文库”和“cDNA文库”的过程中需要使用DNA连接酶的是____________________。（填字母A:基因组文库、B:cDNA文库、C:基因组文库和cDNA文库）。

（2）含有某种限制酶的细胞，可以利用限制酶切割外源DNA，但不破坏细胞自身的DNA，其原因可能有①______________；②___________。

（3）利用PCR技术扩增目的基因的过程由高温变性（90~95℃）、低温复性（55~60℃）、适温延伸（70~75℃）三个步骤构成一个循环，为使得DNA聚合酶能够重复利用，选用的酶应在____________℃处理后仍然具备催化活性。

（4）在PCR扩增目的基因时，为实现序列中的腺嘌呤被放射性同位素标记，反应体系中添加的原料应包括碱基已被标记的____________(填"腺嘌呤核糖核苷酸"、"dATP"或"ATP")。

干扰素是动物或人体细胞受病毒感染后产生的一类糖蛋白，具有抗病毒、抑制肿瘤及免疫调节等多种生物活性。回答下列问题：

(1)干扰素的作用机理是：干扰素作用于宿主细胞膜上的相应受体，激活细胞核中基因表达产生多种抗病毒蛋白，其中有些蛋白可通过激活____________使病毒的RNA水解；有些则可与__________(细胞器)结合，通过抑制病毒多肽链的合成发挥抗病毒作用。

(2)利用基因工程产生干扰素的方法之一：利用________酶将干扰素基因与牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件连接在一起构建基因表达载体，采用__________的方法导入牛的受精卵细胞中，经胚胎早期培养至________________期，移植入母体内发育成熟，即可获得能产生干扰素的转基因牛。

(3)由于干扰素在体外保存困难，可利用蛋白质工程对干扰素进行改造，基本途径是：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的_______→找到相对应的脱氧核苷酸序列。

我国曾经发生过因“非典型性肺炎”而死亡的病例，经研究发现，该病是由SARS病毒(一种RNA病毒)感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。某研究小组为了研制预防SARS病毒的疫苗，开展了前期研究工作，其简要的操作流程如图：

(1)步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用限制性核酸内切酶和__________酶，后者的作用是将_______________和_______连接起来。

(2)步骤③常用___________处理大肠杆菌，使其成为________细胞，有利于吸收重组DNA分子。

(3)为了检验步骤④所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性，可用___________________与_______________进行抗原—抗体特异性反应实验，从而得出结论。

(4)步骤④和⑥的结果相比，原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基酸序列________(填“相同”或“不同”)，根本原因是________。

编码蛋白甲的DNA序列(序列甲)由A、B、C、D、E五个片段组成，编码蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段组成，如图1所示。

回答下列问题：

现通过基因工程方法获得了甲、乙、丙三种蛋白，要鉴定这三种蛋白是否具有刺激T淋巴细胞增殖的作用，某同学做了如下实验：将一定量的含T淋巴细胞的培养液平均分成四组，其中三组分别加入等量的蛋白甲、乙、丙，另一组作为对照，培养并定期检测T淋巴细胞浓度，结果如图2。

①由图2可知，当细胞浓度达到a时，添加蛋白乙的培养液中T淋巴细胞浓度不再增加，此时若要使T淋巴细胞继续增殖，可采用的方法是________________。细胞培养过程中，培养箱中通常要维持一定的CO₂浓度，CO₂的作用是________________。

②仅根据图1、图2可知：上述甲、乙、丙三种蛋白中，若缺少________________(填“A”“B”“C”“D”或“E”)片段所编码的肽段，则会降低其刺激T淋巴细胞增殖的效果。

干旱会影响农作物产量，科学家们对此进行了研究。如图为用探针检验某一抗旱植物基因型的原理，相关基因用R和r表示。据图回答下列问题：

(1)在利用PCR技术扩增R或r基因的过程中，利用________可寻找抗旱基因的位置并进行扩增。

(2)若被检植株发生A现象，不发生B、C现象，则被检植物的基因型为________。

(3)用从基因文库中获取目的基因的方法获取抗旱基因时需要用到限制酶，限制酶能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的____________断开。

(4)经检测，抗旱基因已经导入到烟草细胞，但未检测出抗旱基因转录出的mRNA，从构建基因表达载体的角度推测，最可能的原因是__________________

(5)要快速繁殖转基因抗旱烟草植株，目前常用的技术是____________，该技术的基本过程是：将离体的烟草细胞诱导脱分化形成____________，然后再分化出根和芽并发育成小植株。该技术在作物新品种的培育方面两个最主要的应用是：突变体的利用和____________。

近期《肝脏学》杂志发表了一篇文章称科学家经研究发现：乙肝病毒HBX蛋白质能调控宿主细胞内许多基因的转录，广泛影响宿主细胞的各种生命活动，包括调节细胞凋亡、抑制细胞DNA的修复、干扰细胞有丝分裂和细胞周期进程等，因此可利用该蛋白质治疗乙肝。下图表示利用乳腺反应器生产乙肝病毒HBX蛋白的流程示意图。请回答问题：

(1)已知HBX蛋白基因的核苷酸序列，则①可采用__________获得目的基因，并利用________技术进行扩增。

(2)为获得更高活性的HBX蛋白质，需要对蛋白质结构进行设计改造，但必须通过基因修饰或基因合成来完成，而不直接改造蛋白质的原因是_______________________________。

(3)图中⑥表示_________，在该步骤操作前对胚胎进行了检查和筛选，发现有些胚胎因为外源基因的插入而死亡，请你分析外源基因插入导致胚胎死亡的原因：_________________。

为培育出含β-胡萝卜素的“黄金大米”，科研人员提出以下两套培育方案。请分析回答下列问题：

甲方案：β-胡萝卜素基因“黄金大米”

乙方案：

(1)甲方案中，β-胡萝卜素基因能在玉米和水稻体内出现相同表达结果的原因是________________________________________________。若研究人员已知β-胡萝卜素基因序列，可采用________________方法获得β-胡萝卜素基因。②过程中可用________________技术检测水稻体细胞DNA上是否插入了β-胡萝卜素基因。

(2)乙方案中，在体细胞杂交前需要用__________酶除去细胞壁获得原生质体，诱导其融合的化学试剂常用__________。通过⑤获得“黄金大米”幼苗需要经过___________两个过程，依据的原理是___________。在培养过程中，除了在培养基中添加营养物质外，还需要添加________________。

(3)与传统育种方法相比，甲、乙两套方案共同的优点是_________________________________________________。