棉铃虫是一种严重危害棉花的害虫.我国科学工作者发现一种生活在棉铃虫消化道内的苏云金杆菌能分泌一种毒蛋白使棉铃虫致死，而这种毒蛋白对人畜无害．通过基因工程方法．我国已将该蛋白基因转入棉花植株并成功表达．由于棉铃虫吃了这种转基因棉花的植株后就会造成死亡，所以该棉花新品种在1998年推广后，已取得了很好的经济效益．请根据上述材料回答下列问题：

（1）毒蛋白对人畜无害，但能使棉铃虫致死，从蛋白质特性来看，蛋白质具有______________．

（2）利用苏云金杆菌防治棉铃虫属于生物防治，它突出的优点是___________________．

（3）转基因棉花的抗虫变异来源，属于可遗传变异类型中的___________________________．

（4）从苏云金芽孢杆菌中切割抗虫基因所用的工具是_________，此工具主要存在于______中，其特点是___________________________

癌症是一种由于基因突变的细胞发生异常大量累积而形成的。癌症基因疗法几乎没有耐药性，因此即使患者在化疗和放疗过程免疫力低下的情况下，也同样可以接受基因治疗。研究人员设计了三种治疗方案：

(1)方案一：研究人员从病人体内提取“T细胞”，利用______________技术在体外完成基因的转移，然后将成功转移的细胞进行______________增加细胞的数量，最后将这些改变了的“T细胞”成功移植回到患者体内，这些改变了的“T细胞”识别攻击癌细胞。

(2)方案二：研究人员利用修饰的腺病毒5号作为______________，将Endostatin基因和Interferon基因等有治疗效果的基因导入癌细胞内。对腺病毒进行修饰的目的是使病毒______________，但能够复制增加相关基因的数量。

(3)方案三：新型基因疗法JG-1是结合CDC6shRNA活性基因和癌抑制基因pl6这两种基因的强有力的疗法。“CDC6shRNA活性基因”的使用原理着眼于癌细胞具有______________的特性，它能消灭在癌细胞里存在的一种被称为CDC6的DNA的复制因子。然后通过pl6来修复抑癌基因Rb路径上的起效机制，并促使癌细胞在刚开始增殖阶段即停止增殖。

(4)对癌细胞进行体外培养时，可以形成____________________层细胞，这是由于癌细胞的细胞膜表面的糖蛋白减少的原因，使癌细胞培养时不具有原代培养的____________和______________的特点。

我国科学家通过基因工程成功培育出能抗棉铃虫的棉花植株——抗虫棉。请回答：

（1）生产转基因抗虫棉的核心步骤是                ，该过程用到的工具酶有______和_______。

（2）含有Bt毒蛋白基因的重组Ti质粒导入棉花细胞培养成棉花植株后，是否翻译出Bt毒蛋白，检测的方法是进行              杂交。

（3）为了克服季节、气候、地域限制，快速制种，便于大面积推广种植，可将抗虫棉植株组织培养得到的胚状体、不定芽等，制成__________。

玉米是重要的粮食作物之一。已知玉米的矮秆、抗倒伏（A）对高秆、易倒伏（a）为显性，易感病（B）对抗病（b）为显性，控制上述两对性状的基因分别位于两对同源染色体上。现以两个纯合的玉米品种甲（AABB）和乙（aabb）为亲本培育AAbb新品种（如图1）。请分析回答下列问题：

​

（1）由品种AABB、aabb经过a、b、c过程培育出新品种AAbb的育种方式称为______，F₂的矮秆感病玉米中杂合子比例为              。

（2）过程e常采用             方法得到Ab幼苗植株。与过程a、b、c的育种方法相比，过程a、e、f的优势是                              。

（3）欲使玉米中含有人类胰岛素基因，可采用图1过程           所示的育种方法，该育种方法依据的原理是                。

（4）上述育种方法中，过程g最不容易获得AAbb新品种的原因是              。

（5）将图1中F₁与另一玉米品种丙杂交，后代的表现型及其比例如图2所示，则丙的基因型为____    __。

为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。

(1)   获得耐盐基因后，可用PCR技术对该基因进行扩增，此技术的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便                                 。

(2)   在构建基因表达载体的过程中，所用的限制性内切酶和DNA连接酶分别作用

于                处。(填“a”或“b”)

(3)将基因导入植物细胞的常用方法有农杆菌转化法和                     三种。

(4)将导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用植物组织培养技术，

该技术的核心环节是                              。

(5)为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，可以在分子水平上用放射性同位素标记的                 作探针进行分子杂交检测，

A．导入胰岛素基因时，同时导入furin酶基因

B．导入胰岛素基因后，加入furin酶

C．使胰岛素基因的表达产物中含furin酶切位点

D．改造furin酶基因，使其丧失识别和切除功能

下面①～⑤列举了五种育种方法。请回答下列问题：

①甲品种×乙品种→F₁→自交→F₂→人工选择→自交→F₃→人工选择→自交…→性状稳定遗传的新品种。

②甲品种×乙品种→F₁→F₁花药离体培养→若干幼苗→秋水仙素处理芽尖→若干植株→人工选择→新品种。

③正常的幼苗→秋水仙素处理→人工选择→新品种。

④人造卫星搭载种子→返回地面种植→发生多种变异→人工选择→新品种。

⑤获取甲种生物的某基因→通过某种载体将该基因携带入乙种生物→新生物个体。

（1）假设A、b代表玉米的优良基因，这两种基因是自由组合的。现有AABB、aabb两个品种，为培育出优良新品种AAbb，可以采用第①种方法，第①种方法的原理是________________，该方法属常规育种，一般从F₂代开始选种，这是因为________________。若F₂总数为1552株，则其中基因型为AAbb的理论上有________株。基因型为Aabb的类型经过自交，在子代符合生产要求的性状中AAbb占________。

（2）在第②种方法中，我们若只考虑F₁分别位于n对同源染色体上的n对等位基因，则利用其花药离体培育成的幼苗应有________种类型（理论数据）。与第①种方法相比，第②种方法突出的优点是________________。

（3）第③种育种方法中使用秋水仙素的作用是促使染色体加倍，其机理是________________。

（4）第④种方法中发生的变异一般是________，卫星搭载的种子应当选用萌发的（而非休眠的）种子，试阐述原因________________。

（5）第⑤种方法培育的新生物个体可以表达出甲种生物的遗传信息，该表达过程包括遗传信息的________________，该方法必须用到的工具酶是________________。与第①种方法相比，该方法育种的优势是________________。

下图是利用基因工程培育抗虫棉过程的示意图。请据图回答下列有关问题。

(1)科学家在进行图中①操作时，要用____________分别切割运载体和目的基因，还要用______________将运载体和目的基因连接起来，形成______

(2)经过②操作将目的基因导入_________________，然后经过组织培养形成抗虫棉植株，质粒是存在于_____________能够自主复制的很小的环状DNA分子。

(3)下列是几种氨基酸对应的密码子，据此推断图中合成的多肽前三个氨基酸的种类为(按前后顺序排列)_____________。(提示：几种氨基酸对应密码子：甲硫氨酸(AUG)、甘氨酸(GGA)、丝氨酸(UCU)、酪氨酸(UAC)、精氨酸(AGA)、丙氨酸(GCU))

(4)经过培养、筛选获得一株有抗虫特性的转基因植株。经过分析，该植株细胞中含有一个携带目的基因的DNA片段，因此可以把它看作杂合子。理论上，在该转基因植株自交产生的F₁中，仍具有抗虫特性的植株占总数的________。将上述抗虫棉植株的后代种子种植下去后,后代往往有很多植株不再具有抗虫特性，原因是____________。要想获得纯合子，常采用的方法是________________。

在转B基因（B基因控制合成毒素蛋白B）抗虫棉商品化的同时，棉虫对毒素蛋白B产生抗性的研究也正成为热点。请分析回答：

（1）研究者发现豇豆胰蛋白酶抑制剂（由D基因控制合成）可抑制昆虫肠道内蛋白酶活性，使害虫减少进食而死亡。于是将同时含B基因和D基因的__________导入棉花细胞中，获得双价转基因棉。

（2）棉花短纤维由基因A控制，研究者获得了多个基因型为 AaBD的短纤维抗虫棉植株。其中B基因和D基因位于同一条染色体上，减数分裂时不发生交叉互换。

①植株I相关基因位置如图1，该植株自交，F₁中长纤维不抗虫植株的基因型为____，能够稳定遗传的长纤维抗虫植株的比例是_______。

②植株II自交，F₁性状分离比是短纤维抗虫∶长纤维不抗虫=3∶1，则植株II中B基因和D基因位于_______号染色体上（填图2中编号）。

③植株III自交，F₁性状分离比是短纤维抗虫∶短纤维不抗虫∶长纤维抗虫=2∶1∶1，则植株III产生的配子的基因型为________。

（3）从防止抗虫基因污染，提高转基因植物安全性的角度分析，理论上可将抗虫基因转入棉花细胞的________（选填选项前的符号）。

a．细胞核        b．叶绿体        c．线粒体        d．核糖体

红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病。由于天然EP0来源极为有限，目前临床使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(rhEPO），其主要生产流程如图：

（1）图中①所指的是         技术，图中②所指的物质是               ，③所指的物质是               。

（2）构建的人EPO基因表达载体必须包括：人EPO基因、复制原点、           、终止子、               等。

（3）培养重组CHO细胞时，为便于清除代谢产物，防止细胞产物积累对细胞自身造成危害，应定期更换           。

（4）检测rhEPO的活性需用抗rhEPO单克隆抗体。分泌单克隆抗体的              细胞，可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成。