1.
科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图。
请回答:
(1)步骤①中,卵母细胞应培养到 期。
(2)步骤②中,重组胚胎培养到囊胚期时,可从其 分离出ES细胞。ES细胞具有胚胎细胞的特性,在形态上,表现为 ;在功能上,具有 。
(3)步骤③中,需要构建含有干扰素基因的基因表达载体。基因表达载体的组成除了目的基因外,还必须有 等。由于DNA复制时,子链只能由5′向3′方向延伸,故构建前利用PCR技术扩增干扰素基因时,可以从下图A、B、C、D四种单链DNA片段中选取 作为引物。用下图所示的质粒作运载体时,对干扰素基因片段和质粒进行酶切,可选用限制酶的组合为 或 。